高活性枯草芽孢杆菌菌株是其普遍应用的重要前提。枯草芽孢杆菌筛选可依据形态特性、产酶能力、抑菌能力和抗逆性分析等方法在动物肠道、植物根际、土壤环境、发酵体等环境中分离,并进行分子生物学及生理生化鉴定,以挑选出性能优良的菌株。筛选出性能优良的菌株后,如何获得有效生物量更高的产品,是枯草芽孢杆菌工业化生产中的中心问题。目前,应用于工业化的发酵工艺主要有以下3种:液态发酵、固态发酵和液固两相发酵。实际生产中,以液态发酵为主。液态发酵是将活化菌种接种到发酵罐中,进行液体培养的方法。其一般流程为菌种接种,发酵罐培养、过滤、浓缩、干燥从而得到菌剂。金黄色葡萄球易被常用的碱性染料着色,革兰氏染色为阳性。毛韧革菌
铜绿假单胞菌是一种常见的条件致病菌,属于非发酵革兰氏阴性杆菌。菌体细长且长短不一,有时呈球杆状或线状,成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛,在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。铜绿假单胞菌为专性需氧菌,生长温度范围25~42摄氏度,较适生长温度为25~30摄氏度,特别是铜绿假单胞菌在4摄氏度不生长,而在42摄氏度可以生长的特点可用以鉴别。在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素,如绿脓素与带荧光的水溶性荧光素等。在血平板上会有透明溶血环。铜绿假单胞菌有菌体o抗原和鞭毛h抗原。o抗原含有内毒养素和原内毒养素蛋白质两种成份。原内毒养素蛋白质是一种高分子、低毒性,原性强的保护性抗原,不只存在于不同血清型铜绿假单胞菌中。土正青霉菌株铜绿假单胞菌是一种常见的条件致病菌。
大肠杆菌的耐药可以是天然固有的,也可以通过后天的基因突变、基因转移获得。固有耐药性(intrinsicresistance),即耐药性的产生并不依赖于抑菌药物的存在,而是细菌细胞所固有的,与细菌的遗传和进化密切相关。固有耐药性包括自发基因突变导致的耐药性和细胞膜药物外输作用引起的耐药性。获得性耐药(acquiredresis—tance)是指细菌在抑菌药物选择性压力存在下经过基因突变,或细菌在生长过程中由于移动耐药因子的转移而获得的一种表型。主要包括移动因子和抑菌药压力作用下引起基因突变所导致的耐药性。就目前的研究现状来看,大肠杆菌的耐药性机制主要有5种:①抗s素作用位点的改变或新作用位点的产生。②酶对抗s素的修饰和破坏。③增加抗s素从大肠杆菌向细胞外的主动排出作用。④细菌外膜通透性的改变。⑤质粒介导的耐药性。一种耐药机制可以对多种抗s素表现为抗性,同一种抗s素也常常出现多种耐药性机制共同抑制的现象。
使铜绿假单胞菌在土壤中繁殖后进行干燥保存的方法是,取适量土壤(5克)置于塞有棉塞的试管中,加水或加入充分稀释的液体培养基(以含水量为土壤较大持水量的60%为宜),然后高压灭菌。再将需保存的铜绿假单胞菌进行大量接种,培养至菌丝能用肉眼确认的程度为止,移入干燥器中经短时间干燥或风干后密封,冷藏或室温保存。硅胶保存法以6~16目的无色硅胶代替砂子,干热灭菌后,加入菌液。加菌液时,由于硅胶的吸附热常使温度升高,因而需设法加以冷却。磁珠保存法将菌液浸入素烧磁珠(或多孔玻璃珠)后再进行干燥保存的一种方法。大肠杆菌是现代的生物学中研究很多的一种细菌,作为一种模式生物,其基因组序列已全部测出。
大肠杆菌属的系统发育:大量属于该物种的菌株已得到分离和鉴定。除了血清型(videsupra),它们还可以根据它们的系统发育(即推断的进化史)进行分类。如下所示,其中该物种分为六组。特别是全基因组序列的使用产生了高度支持的系统发育。基于这些数据,大肠杆菌的5个亚种被区分开来。系统发育距离(“关联性”)和病理学之间的联系很小,例如O157:H7血清型菌株形成一个分支(“一个独特的群”)—下面的E群——都是肠出血性菌株(EHEC),但并不是所有的EHEC菌株都是密切相关的。事实上,四种不同的志贺氏菌嵌套在大肠杆菌菌株(见上),然而E.albertii和E.fergusonii不属于这个群体。事实上,在包括类型菌株在内的系统基因组研究中,所有志贺菌都被放在大肠杆菌的一个亚种内,因此很难进行相应的重新分类。所有常用的研究菌株大肠杆菌属于a组,主要来源于Clifton的K-12菌株(λ⁺f⁺。O16)并且在较小程度上来自d'Herelle的大肠杆菌菌株(B菌株)(O7)。枯草芽孢杆菌菌体生长过程中产生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短杆菌肽等活性物质。豇豆慢生根瘤菌菌种
枯草芽孢杆菌可以提高免疫球蛋白和抗体水平,增强细胞免疫和体液免疫功能,提高群体免疫的能力。毛韧革菌
目前已知的大肠杆菌和志贺氏菌的完整基因组序列有三百多个。2014年之前,大肠杆菌类型菌株的基因组序列被添加到这个集中中。这些序列的比较显示出明显的多样性。每个基因组中只有大约20%的表示序列存在于每个分离株中,而每个基因组中大约80%在分离株之间有所不同。每个基因组包含4,000到5,500个基因,但是在所有已测序的大肠杆菌菌株(泛基因组)中,不同基因的总数超过16000个。这种非常多的组成基因被解释为三分之二的大肠杆菌泛基因组起源于其他物种,并通过水平基因转移过程到达。毛韧革菌
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