大肠杆菌表达系统是目前应用很广的蛋白表达系统。它具有:遗传背景清楚。易于培养和控制。转化操作简单。表达水平高。成本低。周期短等特点。同时是常用也是经济实惠的蛋白表达系统,在基因表达技术中发展至早。Escherich于1885年发现大肠杆菌。1976年Struhl、1977年Vapnek及1978年Chang等分别将酵母DN段、粗糙链孢霉DN段和哺乳动物cDN段导入大肠杆菌,引起其表型的改变,证明了外源基因在大肠杆菌中可以使现有功能的活性表达。这些研究为大肠杆菌表达系统的发展奠定了理论基础。1980年,Guarante等在Science杂志上发表了以质粒、乳糖操纵子为基础建立起来的大肠杆菌表达系统。这一发展构成大肠杆菌系统的雏形。枯草芽孢杆菌有着很好的促生作用。硝酸盐还原戴氏菌
大肠杆菌的耐药机制:根据细菌耐药性的起源,可将其分为两类:一类为固有耐药性(intrinsicresistance),即耐药性的产生并不依赖于抑菌药物的存在,而是细菌细胞所固有的,与细菌的遗传和进化密切相关。固有耐药性是细菌稳定的遗传特性,它受细菌染色体DNA控制并且是同属细菌的共同特征,固有耐药性包括自发基因突变导致的耐药性和细胞膜药物外输作用引起的耐药性。另一类为获得性耐药性(acquiredresistance),是指细菌在抑菌药物选择性压力存在下经过基因突变。或细菌在生长过程中由于移动耐药因子的转移而获得的一种表型。其中,移动因子包括质粒、转座子、整合子和噬菌体。获得性耐药性主要包括移动因子和抑菌药压力作用下引起基因突变所导致的耐药性。硝酸盐还原戴氏菌金黄色葡萄球利用70%的乙醇可以在几分钟之内将其快速杀死。
由于不同培养基的选择性存在差异,检测铜绿假单胞菌时,如有必要,采用不同培养基进行分离培养,可有效防止漏检现象的发生,提高检出率。绿脓菌素试验需加入氯仿将铜绿假单胞菌产生的色素溶出,此时可采用无菌操作将培养基捣碎,并适当延长浸泡时间,这样可使阳性结果更明显。因实验室温度存在差异,室温较低时明胶培养基呈凝胶状,室温较高时呈液体状,这是正常现象,不会影响明胶液化试验的结果。进行明胶液化试验时,在(35土2)摄氏度条件下明胶培养基呈液态,要判定试验结果必须将其置于(4~10)摄氏度冰箱中10分钟~30分钟,如明胶培养基仍为液态则明胶液化试验为阳性;如明胶培养基凝固,则明胶液化试验为阴性。
大肠埃希氏菌(Escherichiacoli)通常称为大肠杆菌,约占肠道菌中的1%。是一种两端钝圆、能运动、无芽孢的革兰氏阴性短杆菌。大肠杆菌在1885年由Escherich发现,它分布在自然界,大多数不致病,主要附生在人或动物的肠道里,为正常菌群。少数大肠杆菌具有毒性,可引起疾病。婴儿出生后大肠杆菌即随哺乳进入肠道,其代谢活动能抑制肠道内分解蛋白质的微生物生长,减少蛋白质分解产物对人体的危害,还能合成维生素B和K,正常栖居条件下不致病,若进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。若在水和食品中检出大肠杆菌,可认为是被粪便污染的指标。因此大肠菌群数(或大肠菌值)常作为饮水、食物或药物的卫生学标准。枯草芽孢杆菌能够促使土壤中的有机质分解成腐殖质,刺激作物生长。
大肠杆菌常见的一种不以进化亲缘关系为基础的细分系统是血清型,它是基于主要的表面抗原(O抗原:部分脂多糖层。H:鞭毛蛋白。K抗原:包膜),如O157:H7)。然而,通常只引用血清组,即o抗原。目前,已知大约190个血清群[28]。常见的实验室菌株有一种能阻止o抗原形成的突变,因此是不可分型的。像所有生命形式一样,新品种的大肠杆菌通过突变、基因复制和水平基因转移的自然生物过程进化。特别是,自与沙门氏菌分离以来,实验室菌株MG1655的18%的基因组是水平获取的。大肠杆菌K-12和大肠杆菌b菌株是实验室至常用的品种。一些菌株会产生对宿主动物有害的特性。这些强毒株通常会引起一轮腹泻,这种腹泻在健康成人中通常是自限性的,但在发展中国家通常对儿童是致命的。毒性更强的菌株,例如O157:H7,可导致老年人、极年幼者或免疫功能低下者的严重疾病或死亡。金黄色葡萄球菌体直径约0.8μm,小球形,但在液体培养基的幼期培养中,常常分散。Amycolatopsis albidoflavus
枯草芽孢杆菌可利用蛋白质、多种糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。硝酸盐还原戴氏菌
近年来,由多重耐药性金黄色葡萄球菌引起的院内传染不只是临床医师必须经常面临的棘手问题,而且已对全人类的健康构成极大威胁·一直以来,万古霉素都是临床救治革兰阳性菌传染的选择药物,曾被称为临床抗传染的”之后底线”.但万古霉素耐药性金黄色葡萄球菌已经在许多国家分离出来,这就对开发新型抗传染救治药物提出了迫切要求。金黄色葡萄球菌(Staphalococcusaureus)属革兰阳性球菌,微球菌科,葡萄球菌属。它能引起化脓性炎症,如疖、痈等。当细菌侵入血液时,可引起致病性败血症。某些葡萄球菌产生耐热的肠有害元素,从而引起食物中毒。硝酸盐还原戴氏菌
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