高活性枯草芽孢杆菌菌株是其普遍应用的重要前提。枯草芽孢杆菌筛选可依据形态特性、产酶能力、抑菌能力和抗逆性分析等方法在动物肠道、植物根际、土壤环境、发酵体等环境中分离,并进行分子生物学及生理生化鉴定,以挑选出性能优良的菌株。筛选出性能优良的菌株后,如何获得有效生物量更高的产品,是枯草芽孢杆菌工业化生产中的中心问题。目前,应用于工业化的发酵工艺主要有以下3种:液态发酵、固态发酵和液固两相发酵。实际生产中,以液态发酵为主。液态发酵是将活化菌种接种到发酵罐中,进行液体培养的方法。其一般流程为菌种接种,发酵罐培养、过滤、浓缩、干燥从而得到菌剂。枯草芽孢杆菌可提高动物体(人体)内干扰素和巨噬细胞的活性。长双歧杆菌 W51
金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)属葡萄球菌属(Staphylococcus),是重要的革兰氏阳性条件性致病菌。典型的金黄色葡萄球菌呈球形,排列成葡萄串状,在液体培养基中常呈双或短链状排列。无鞭毛及芽孢,幼龄菌可见荚膜。一般来说,金黄色葡萄球菌生长的较适温度为37℃。金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,能形成湿润、光滑、隆起的圆形菌落,因为含类胡萝卜素,所以常呈柠檬色及黄色。在有氧或培养基中含牛乳、血清时可产生更多的色素。血平板菌落周围形成透明的溶血环。文昌野野村氏菌菌种枯草芽孢杆菌的芽孢位于菌体中心或稍偏。
枯草芽孢在净化水质,降低氨氮,在减少死鱼上作用非常明显。枯草芽孢杆菌在菌体生长过程中,产生的枯草菌素、多粘菌素,制霉菌素、短杆菌肽等活性物质,这些活性物质对致病菌或内源性影响的条件致病菌,有明显的抑制作用。枯草芽孢杆菌生长速度快,对营养要求比较低,能高效分解许多蛋白质、有机质及代谢产物,且不会产生毒类素,是一种无致病性的安全微生物。壤水分、温度和有机质含量对枯草芽孢杆菌的生长繁殖均有影响,一般情况下,适宜植物生长的条件和环境也适宜枯草芽孢杆菌的生长和繁殖,反之,干旱、低温和有机质匮乏对枯草芽孢杆菌的生长繁殖不利。
通过枯草芽孢杆菌对菲与苯并芘的吸附及生物降解,以枯草芽孢杆菌为接种微生物,对菲与苯并芘都可进行吸附或生物降解,48h液相PAHs浓度达到平衡时,微生物对菲消除了98%,对苯并芘消除85%;接种的样品48h吸附等温线均呈线形,能较好地符合线性方程;在接种微生物情况下,沉积物与土壤对菲和苯并芘吸附特征均发生较大变化,对菲的吸附量增大约35倍,而对苯并芘的吸附量却降低了2/3左右;未接种微生物的土壤和沉积物对菲解吸率为20%,接种的样品组为2.9%,而对苯并芘的解吸结果与菲相反,未接种的对照组为4%,接种的样品组为l3%。金黄色葡萄球利用70%的乙醇可以在几分钟之内将其快速杀死。
大肠杆菌生物学特征:1、理化特性。大肠杆菌是短杆菌,两端呈钝圆形,革兰阴性。有时因环境不同,个别菌体出现近似球杆状或长丝状。大肠杆菌多是单一或两个存在,但不会排列呈长链形状。大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构,但是不能形成芽孢。多数大肠杆菌菌株生长有菌毛,其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛。2、生化特性。大肠杆菌的生化代谢非常活跃。大肠杆菌可以发酵葡萄糖产酸、产气,个别菌株不产气,大肠杆菌还能发酵多种碳水化合物,也可以利用多种有机酸盐。大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中,甲基红试验呈阳性,吲哚产生和乳糖发酵是阳性(个别菌株表现阴性),维-培试验是阴性,尿素酶和柠檬酸盐利用呈阴性(极个别菌株表现阳性),硝酸盐还原试验表现阳性,氧化酶表现阴性,氧化-发酵试验表现为F型[1]。铜绿假单胞菌拥有在42摄氏度可以生长的特点。阪崎氏年轻泰坦杆菌菌种
铜绿假单胞菌在365nm紫外灯下显荧光。长双歧杆菌 W51
制备大肠杆菌感受态细胞的关键是什么?(1)感受态细胞的质量:所用的CaCl2等试剂均需是至高纯度的,并用至纯净的水配制,建议分装保存于4℃。(2)细胞的生长状态和密度建议从-70℃或-20℃甘油保存的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液。不要用已经过多次转接,及贮存在4℃的培养菌液。细胞生长密度以每毫升培养液中的细胞数在5×107个左右为佳。即应用对数期或对数生长前期的细菌,可通过测定培养液的OD600控制。对TG1菌株,OD600为0、5时,细胞密度在5×107个/ml左右。(应注意OD600值与细胞数之间的关系随菌株的不同而不同)。密度过高或不足均会使转化率下降。长双歧杆菌 W51
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