保存条件斜面、穿刺菌和冻干粉可常温运输,但应在4-10度长期保存。甘油菌可常温运输,但应在-80度长期保存。微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退。
冻干管的开启方法:方法一:将冻干粉甩至底部圆球位置,然后用70%的酒精脱脂棉球擦净冻干管,将冻干管的前列(注意不是圆球端)放在火焰上加热。然后迅速滴几滴无菌水至加热处,此时冻干管的前列会自动破开。然后用镊子轻轻敲下冻干管前列,并将冻干管开口处在火焰上加热灭菌一下,并且保持下面的菌种菌种活化步骤在火焰旁操作。然后逐渐敲开冻干管,直至适当位置。(敲开位置以可以很好注入无菌水以及吸取混匀后的液体为准)直接敲开法。方法二:首先将冻干粉甩至底部圆球位置,然后用70%的酒精脱脂棉球擦净冻干管,将冻干管的前列(注意不是圆球端)放在火焰稍微加热灭菌。然后直接用大镊子敲打前列,敲开后将破口处在火焰上加热灭菌一下,并且保持下面的菌种菌种活化步骤在火焰旁操作。然后逐渐敲开冻干管,直至适当位置。(敲开位置以可以很好注入无菌水以及吸取混匀后的液体为准)。 金黄色葡萄球菌无鞭毛,不能运动。无芽胞,除少数菌株外一般不形成荚膜。胎儿别样希瓦氏菌菌种
大肠杆菌可以在多种底物上生存,并在厌氧条件下使用混合酸发酵,产生乳酸盐、琥珀酸盐、乙醇、乙酸盐和二氧化碳。由于混合酸发酵中的许多途径产生氢气,因此这些途径要求氢气水平低,例如大肠杆菌与耗氢生物如产甲烷菌或硫酸盐还原菌生活在一起。大肠杆菌在37°C(98、6°F)条件下生长至佳,但一些实验室菌株在49°C(120°F)条件下可以繁殖。大肠杆菌生长在各种确定的实验室培养基中,如LB培养基或任何含有葡萄糖、磷酸一铵、氯化钠、硫酸镁、磷酸氢钾和水的培养基。生长可以通过有氧或无氧呼吸来驱动,使用多种氧化还原对,包括酸、甲酸、氢和氨基酸的氧化,以及底物如氧、硝酸盐、富马酸盐、二甲基亚砜和三甲胺氮氧化物的还原。[21]大肠杆菌被归类为兼性厌氧菌。当氧气存在并可用时,它就使用氧气。然而,它可以通过发酵或厌氧呼吸在无氧条件下继续生长。在无氧条件下继续生长的能力对细菌来说是一个优势,因为在水占主导地位的环境中,细菌的存活率会提高的。野油菜黄单胞菌栖青苋致病变种枯草芽孢杆菌的芽孢位于菌体中心或稍偏。
冻干粉菌种复苏中注意事项:菌种活化前,如要长期保藏,可将冻干管放在-20度条件下保存。此冻干菌是经冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能剩菌粉下次使用。冻干管中大部分是用牛奶做保护剂,菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接种在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功。冻干粉是在冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间还未长出,请继续在相应的环境下多培养24小时或更长时间,直至菌种培养出。正常情况下,菌种是需要培养2代后才会具备稳定的活性,所以建议做2次继代培养后才能用于您后续的实验。打开冻干管应在专业的微生物专业人员才可操作,注意生物危害程度为三级的菌种应在生物安全柜中操作。其中标准菌种可以在超净台中操作,并且做好个人防护。开管时要注意做好个人面部防护,防止碎片飞入眼中。以上开管操作都应该在安全柜或超净台中操作,并且操作完后所有器皿都要经灭菌后再销毁。所有的菌种操作和转移应依「实验动物微生物学等级及监测」规定订定安全等级,履行生物安全防护责任及採取必要之措施;并遵守「病原微生物实验室生物安全管理条例」。
枯草芽孢杆菌菌剂的生产关键技术在于发酵培养。发酵培养的优化改良涉及提高菌株生长繁殖速度及抗类菌物质的分泌量两个方面,可以通过发酵条件如pH值、温度、通气条件及发酵配方的优化来实现,不同的菌株所需的条件也各异。枯草芽孢杆菌在含大豆水溶物的培养基或土壤中生长良好,且分泌较多的抗类菌物质。菌株操作应在无菌条件下进行,防止杂菌污染。斜面菌苔转接方法,将配套液体培养基倾入斜面试管中并使用无菌接种环将菌苔刮取于液体中,将含有菌苔的液体培养基倒回原始管中,振荡使菌苔分布均匀。将无菌棉拭子充分浸入菌悬液,并涂布平板1/5~1/3区域,使用接种环交叉划线涂布区域使形成单菌落。枯草芽孢杆菌能够改善有害蓝藻泛溢造成的水质浑浊问题,水质由浑变清,具有很强的净化水质功能。
金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)简称为金葡菌,是较常见的革兰氏阳性球菌,也是引起细菌性食源性疾病的重要病原菌之一。在显微镜下看,金葡菌聚集成簇,像葡萄一样;在良好的营养环境中,它们会生长成金黄色的菌落,金葡菌由此而得名。金葡菌在哪?金葡菌普遍分布于自然界,人和动物是它们的优良居所。健康人的咽喉、鼻腔、皮肤上常有它的踪迹,伤口化脓传染处和上呼吸道传染者的鼻腔更是它的主要聚集地。上呼吸道传染者的鼻腔带菌率超过80%。常见的污染食品为蛋白质或淀粉含量丰富的食品,如:奶和奶制品、肉和肉制品、糕点、剩饭等。当枯草芽孢杆菌作用于作物或土壤时,能够在作物根际或体内定殖,并起到特定肥料效应。海水希瓦氏菌菌株
铜绿假单胞菌的标本采集,包括来自医院环境中的各种标本如水、空气、物体表面采样等。胎儿别样希瓦氏菌菌种
大肠杆菌耐药性的产生机制:细菌获得耐药性是因为存在耐药基因、敏感菌一旦通过突变选择或结合,转导或转化就可获得耐药性,而几乎所有的病原菌均可查见耐药质粒、质粒的传递加速了耐药性在各菌株间的传播、大肠杆菌是临诊上由质粒介导耐药性的重要细菌之一。1959年日本Aki-ba等人发现并证实多重耐药性可在大肠杆菌和痢疾杆菌间互相传递、1962年此种传递耐药性的因子被命名为耐药因子或R质粒。1963年Lebek从致病性大肠杆菌中发现了R质粒。1969年,Smith曾亲自服用带有质粒的大肠杆菌,证明R质粒的出现与使用抗s素呈正相关。其后,有很多关于正常人、病人及畜禽R质粒检出情况的报道、现在已知R质粒的宿主普遍,可以在多种菌属中传播,目前已发现携带R质粒的细菌有:葡萄球菌、链球菌、淋球菌、几乎整个肠菌科、假单胞杆菌、流感杆菌等。胎儿别样希瓦氏菌菌种
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