浅绿黄链霉菌

金黄色葡萄球菌中毒：潜伏期2～5小时，极少超过6小时。起病急骤，有恶心、呕吐，中上腹部痉挛性疼痛，继以腹泻。呕吐较为突出，呕吐物可带胆汁黏液和血丝，腹泻呈水样便或稀便，每天数次至数十次不等，重症可因剧烈吐泻引起脱水、虚脱和肌肉痉挛。体温大多正常或略高，绝大多数患者经数小时或1～2小时内迅速恢复。可伴有低钾、低钠等症状。我国国家卫生和计划生育委员会于2013年发布《食品安全国家标准食品中致病菌限量》(GB29921-2013)，在国标中制定了金黄色葡萄球菌的限量标准，规定熟肉制品、熟制水产品、熟制粮食制品等8大类食品中，同批次采集5份样品，每份样品中的金黄色葡萄球菌浓度均不得超出1000CFU/g，只允许其中1份样品在100~1000CFU/g之间。铜绿假单胞菌原称绿脓杆菌。浅绿黄链霉菌

金黄色葡萄球菌免疫学检测方法：分子生物学检测方法：核酸探针技术：通过使用基因特异性核苷酸序列作为探针与目的DNA杂交的一种核酸杂交技术，通过检测该段特异性的标记物，从而判断是否含有目标微生物。核酸探针具有分子生物学检测技术的灵敏度高、特异性强的优点，但是实验周期长，操作繁琐，如果样品中目标微生物含量过低，极易造成样品目标微生物未检出，出现假阴性的实验结果。环介导等温扩增技术：该技术基于DNA扩增技术，能够在恒温条件下，根据设计的多对引物，利用链置换型DNA聚合酶快速的进行核酸的扩增。与PCR方法比较，环介导等温扩增法操作更加快捷简单，花费成本较低，且对仪器要求低，能够普遍利用在食源性致病微生物的检测中。嗜粪青霉菌株金黄色葡萄球是常见的食源性致病菌，普遍存在于自然环境中。

大肠杆菌检测方法：平板计数法：用无菌吸管吸取稀释度样品1mL，该样品与乳糖胆盐发酵类似，然后将其放入无菌培养皿中，再加入温度于45℃下的CDLJJD显色培养基中10mL的量，并进行培养皿中溶液均匀混合，可以通过快速转动培养皿的方式，等溶液凝固以后，加入5mL左右，然后快速摇晃培养基，使其可以均匀覆盖平板表面，等其凝固以后，翻转培养基，在温度37℃中培养24h左右，然后观察其形态，颜色等变化。除此之外，平行设置两个稀释度培养基，步骤是先稀释样本，通过稀释后，微生物可以分散为单个细胞，然后进行一定环境条件下培养，直到其长成菌落为止，然后进行计算大肠杆菌的数量，通过稀释度和样本数量进行计算。

铜绿假单胞杆菌离心的目的是两个，去除DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大，死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液体前倒净，且一定倒干净。关于细胞贴壁少的问题，冻存细胞解冻时1毫升细胞液要加10毫升－15m培养液，而培养基越少细胞越容易贴附。复苏细胞分装的问题，试验中复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。大肠杆菌是条件致病菌。

在BP平板上，金黄色葡萄球菌的典型菌落特征是呈圆形，表面光滑、凸起、湿润、菌落直径为2mm~3mm，颜色呈灰黑色至黑色，有光泽，常有浅色(非白色)的边缘，周围绕以不透明圈(沉淀)，其外常有一清晰带。当用接种针触及菌落时具有黄油样黏稠感。有时可见到不分解脂肪的菌株，除没有不透明圈和清晰带外，其他外观基本相同。从长期贮存的冷冻或脱水食品中分离的菌落，其黑色常较典型菌落浅些，且外观可能较粗糙，质地较干燥。在血平板上，形成菌落较大，圆形、光滑凸起、湿润、金黄色(有时为白GB4789.10—20163色)，菌落周围可见完全透明溶血圈。大肠杆菌的价格取决于它的类型。西比隆醋杆菌

枯草芽孢杆菌的抗逆性强、功能多、适应性广、效果稳定。浅绿黄链霉菌

对于铜绿假单胞菌的检测，前处理直接混匀制成待测样品或者采用滤膜过滤法进行处理。直接混匀测试揭开检测板上层膜，在检测板纸片上加1毫升直接混匀制成的待测样品，迅速贴好上层膜井水平晃动检测板，静置2分钟.滤膜过滤法处理揭开检测板上层膜，在检测板纸片，上加1毫升无菌水湿润后，迅速用无菌镊子将过滤水样的滤膜移放在检测板纸片上(滤膜截留细菌面向上)，滤膜与纸片之间不要夹留着气泡，贴好上层膜。前处理25g(或25毫升)样品放入装有225毫升生理盐水的均质袋中，以8000r/分钟均质1~2分钟，制成1：10样品均液，根据样品污染程度及检验需要，可进一步制成10倍递增的样品稀释液。浅绿黄链霉菌

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