冻干粉菌种复苏中注意事项:菌种活化前,如要长期保藏,可将冻干管放在-20度条件下保存。此冻干菌是经冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能剩菌粉下次使用。冻干管中大部分是用牛奶做保护剂,菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接种在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功。冻干粉是在冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间还未长出,请继续在相应的环境下多培养24小时或更长时间,直至菌种培养出。正常情况下,菌种是需要培养2代后才会具备稳定的活性,所以建议做2次继代培养后才能用于您后续的实验。打开冻干管应在专业的微生物专业人员才可操作,注意生物危害程度为三级的菌种应在生物安全柜中操作。其中标准菌种可以在超净台中操作,并且做好个人防护。开管时要注意做好个人面部防护,防止碎片飞入眼中。以上开管操作都应该在安全柜或超净台中操作,并且操作完后所有器皿都要经灭菌后再销毁。所有的菌种操作和转移应依「实验动物微生物学等级及监测」规定订定安全等级,履行生物安全防护责任及採取必要之措施;并遵守「病原微生物实验室生物安全管理条例」。 枯草芽孢杆菌对特殊菌体进行促芽孢和微胶囊包被处理,在芽孢状态下稳定性好,能耐氧化。库尔勒盐单胞菌菌种
对铜绿假单胞菌进行保存的较低温甘油保存法与半固体保存法,二者进行比较,较低温甘油保存法具有菌种保存时间长、存活率高和色素保存完好的明显优势;并具有操作简便、污染少、传代频率低、菌株性状典型、占用的空间小等优点,易于在教学和科研中使用。但在采用较低温甘油保存法时,要注意较低温甘油保存法中甘油的浓度为15%,也有采用30%甘油和40%甘油进行保种,不同的甘油。浓度适应的菌种有所侧重。菌种复苏时速度要快,要在解冻前进行移种,移种后仍可将保存管冻于-70摄氏度冰箱中继续保存,若待完全解冻后再移种,菌株有可能无法复苏。平丝硬孔菌菌株铜绿假单胞菌菌体的一端有单鞭毛。
葡萄球菌普遍分布于自然界,如空气、水、土壤、饲料和一些物品上,还常见于人和动物的皮肤及与外界相通的腔道中。葡萄球菌中,腐生葡萄球菌数量较多,一般不致病。表皮葡萄球菌致病较弱,金黄色葡萄球菌致病力较强,可产生肠有害元素、杀白血球素、溶血素等有害元素,引起食物中毒的是肠有害元素。金黄色葡萄球菌为革兰阳性球菌,呈葡萄串状排列,无芽孢,无鞭毛,不能运动。适宜生长温度为35℃~37℃,但在0℃~47℃都可以生长。菌体不耐热,60℃的温度下,30分钟即可被杀死,但在冷藏环境中不易死亡。目前已经确认的至少有A、B、C1、C2、C3、D、E和F这8个型。A型肠有害元素引起的食物中毒较多,B型次之,C型较少。该有害元素的抗热力很强,煮沸1~1.5小时仍保持其毒力,也不受胰蛋白酶影响。120℃的温度下,20分钟还不能完全破坏。
铜绿假单胞菌生长对营养要求不高。对有正常菌群存在的临床标本或采自环境中的标本应接种选择性培养基如麦康凯琼脂培养基(MAC);对无正常菌群存在的临床标本如血液、脑脊液、穿刺液等可接种普通全营养型培养基(如TSA、PCA、营养琼脂}或血琼脂培养基、铜绿假单胞菌培养基。普通琼脂培养基上生长18~24h可以见到扁平、湿润的菌落,铜绿假单胞菌所产生的带荧光的水溶性青脓素与绿脓素相结合将使得培养基呈亮绿色;在血琼脂平板上生长时可以见到在菌落的周围有溶血环,菌落呈金属光泽;在铜绿假单胞菌培养基上呈蓝绿色或者红褐色菌落,365nm紫外灯下显荧光。如果是在液体培养基中则呈浑浊状生长,在液体表面形成菌落,而在培养基底部细菌的生长不良。金黄色葡萄球37℃为适生长温度,能在各种恶劣环境中存活下来。
大肠杆菌的基因通常由4个字母的首字母缩写来命名,这些首字母缩略词源自它们的功能(已知时)并以斜体显示。例如,recA是根据它在同源重组中的作用加上字母A来命名的。功能相关基因被命名recB,recC,recD等等。蛋白质以大写首字母缩写命名,例如RecA、RecB等。当人类的基因组大肠杆菌测序完成后,所有基因在基因组中按其顺序编号(或多或少),并用b编号缩写,如b2819(=recD)。“b”的名字是由弗雷德·布拉特纳(FredBlattner)命名的,他领导了基因组测序工作。是用另一种大肠杆菌菌株W3110的序列引入的,该菌株在日本进行了测序,因此使用的编号以JW开头(JapaneseW3110),例如JW2787(=recD)。因此,recD=b2819=JW2787。然而,请注意,大多数数据库都有自己的编号系统,例如生态基因数据库将EG10826用于recD。然后,ECK编号专门用于大肠杆菌K-12MG1655菌株的等位基因。基因及其同义词的完整列表可以从数据库中获得,如EcoGene或Uniprot。金黄色葡萄球次于沙门氏菌和副溶血杆菌的第三大微生物致病菌。肉色诺卡氏菌菌种
大肠杆菌的质量必须符合设计要求或合同要求,并有出厂检验报告。库尔勒盐单胞菌菌种
对于铜绿假单胞菌的检测,要注意将绿假单胞菌检测板上层膜不干胶标签部分揭开,用无菌吸管吸取1毫升样品稀释液均匀滴加到纸片上,迅速贴好上层膜并水平晃动检测板,静置2分钟左右,待样品稀释液完全被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两个检测板作为重复。将检测板叠在一起,倒置于恒温培养箱内,36摄氏度~1摄氏度,培养15~24h。铜绿假单胞菌又称绿脓杆菌,是一种常见的条件致病菌,属于非发酵革兰氏阴性杆菌。若为实验室长期保存菌种,因传代频繁可发生无色素变种。较低温甘油保存法和半固体保存法两种方法保存的菌种42摄氏度生长试验阳性,氧化酶阳性,氧化葡萄糖产酸不产气,动力阳性,明较液化试验阳性。库尔勒盐单胞菌菌种
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