大环内酯类抗生养素自身几乎没有抗铜绿假单胞菌的活性,但能抑制生物膜的形成,调节免疫,增强吞噬细胞的吞噬作用,抑制铜绿假单胞菌的一些毒性因子而增强其他抗铜绿假单胞菌药物的活性,改善疗效。研究发现,红霉素、克拉霉素、阿奇霉素和罗红霉素能有效抑制生物膜形成,短期联合头孢他啶等抗铜绿假单胞菌药物后就可明显改善临床疗效(如克拉霉素5d方案),其中以阿奇霉素抑制作用较强。铜绿假单胞菌对化学药物的抵抗力比一般革兰氏阴性菌强大。1:2000的洗必泰,度米芬和新洁尔灭,1:5000的消毒净在5分钟内均可将其杀死。0.5-1%醋酸也可迅速使其死亡,有些菌株对磺胺,链霉素,氯霉素敏感,但极易产生耐药性。铜绿假单胞菌以前也叫绿脓杆菌,属于革兰氏阴性杆菌。合肥铜绿假单胞菌试管供应公司
关于铜绿假单胞菌的干冰保存法一般为-70摄氏度左右,即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。液氮保存法一般为-196摄氏度,是适用范围较广的铜绿假单胞菌保存法。冷冻干燥保存法的原理是首先将铜绿假单胞菌冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分。从菌体中除去大部分水分后,细胞的生理活动就会停止,因此可以达到长期维持生命状态的目的。绿脓假单胞菌(绿脓杆菌)保存操作流程是,菌株复苏按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏,隐球菌除传显色培养基以外,另传1/2块血平皿上述菌株统一37摄氏度孵育48小时。菌种鉴定一般在48h后观察结果。保藏方法是传代培养。合肥CMCC(B)10104二代菌种铜绿假单胞菌在乙酰胺肉汤实验下呈阳性。
使用较低温甘油保存法保存铜绿假单胞菌时,若采用1.5毫升离心管保存菌种,移种时要特别注意无菌操作,尽量采用螺口的带盖冷冻管保存菌种,以减少污染的机会。采用螺口的带盖冷冻管的方法保存肠杆菌科的细菌及革兰阳性需氧杆菌如炭疽芽孢杆菌、腊样芽孢杆菌等均取得良好的保存效果。铜绿假单胞菌保存低温存法,简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4摄氏度冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月。
使铜绿假单胞菌在土壤中繁殖后进行干燥保存的方法是,取适量土壤(5克)置于塞有棉塞的试管中,加水或加入充分稀释的液体培养基(以含水量为土壤较大持水量的60%为宜),然后高压灭菌。再将需保存的铜绿假单胞菌进行大量接种,培养至菌丝能用肉眼确认的程度为止,移入干燥器中经短时间干燥或风干后密封,冷藏或室温保存。硅胶保存法以6~16目的无色硅胶代替砂子,干热灭菌后,加入菌液。加菌液时,由于硅胶的吸附热常使温度升高,因而需设法加以冷却。磁珠保存法将菌液浸入素烧磁珠(或多孔玻璃珠)后再进行干燥保存的一种方法。铜绿假单胞菌拥有在42摄氏度可以生长的特点。
铜绿假单胞菌为专性需氧菌,生长温度范围25摄氏度~42摄氏度,较适生长温度为25C~30摄氏度,特别是该菌在4摄氏度不生长而在42摄氏度可以生长的特点可用以鉴别。在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素,如绿脓素与带荧光的水溶性荧光素等。在血平板上会有透明溶血环。若要长期保存,铜绿假单胞菌在4摄氏度~6摄氏度时易死亡。适于放置于10摄氏度~20摄氏度室温避光保存或者-20摄氏度以下保存。当铜绿假单胞菌放置于2摄氏度~8摄氏度保存时,该菌易死亡。与铜绿假单胞菌相似的菌还有副溶血性弧菌等部分弧菌,在拿到这一类菌株时要注意它们的保存温度,以免保存不当造成损失。铜绿假单胞菌菌种不能在4-10度条件下储存,容易死亡。CMCC(B)10104冻干粉报价
当铜绿假单胞菌通气足够的时候可以产绿色的色素。合肥铜绿假单胞菌试管供应公司
对铜绿假单胞杆菌的复苏,要先准备一个茶缸或1000毫升的烧坏,内装2/3杯37摄氏度的温水。从液氮中取出冻存管、迅速置于温水中并不断搅动。使冻存管中的冻存物在1分钟之内融化。打开冻存管,将细胞悬液吸到离心管中。1000rpm离心10分钟,弃去上清液。沉淀加10毫升培养液,吹打均匀,再离心10分钟,弃上清液。加适当培养基后将细胞转移至培养瓶中,37摄氏度培养,第二天观察生长情况。器材通常为液氮罐、冻存管(塑料螺口冻存管或安瓿瓶)、离心管、吸管、离心机等。试剂通常为0.25%胰酶、培养基、含保护剂的培养基(即冻存液)。冻存液配制是培养基加入甘油或DSMO,使其终浓度达5—20%。保护剂的种类和用量视不同细胞而不同。配好后4摄氏度下保存。合肥铜绿假单胞菌试管供应公司
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