ETSA培养基基础

CAS培养基，也称为ChromeAzurolS（CAS）检测培养基，主要用于检测微生物是否产生铁载体（siderophore）。铁载体是一类能特异性结合铁离子并供给微生物细胞的低分子量物质，对于微生物在缺铁环境中的生长至关重要。CAS培养基的特点主要包括：1.**成分**：CAS培养基包含铬天青S（CAS）、十六烷基三甲基溴化铵（HDTMA）、铁离子等成分，这些成分与微生物分泌的铁载体反应，产生颜色变化，从而可以判断微生物是否产生铁载体。此外，培养基中还包含葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、氯化钙等，提供微生物生长所需的碳源、氮源和其他生长因子。2.**颜色变化**：当微生物产生的铁载体与CAS培养基中的复合物结合后，会夺走铁离子，使培养基颜色由蓝色变为橘黄色，出现铁载体分泌圈，这有助于判断细菌是否产生铁载体。3.**pH值**：CAS培养基的pH值通常控制在6.8±0.1（25℃），以保证微生物的生长和铁载体的活性。4.**配制方法**：CAS培养基的配制方法相对复杂，但一些产品如Coolaber改良的CAS琼脂培养基已经进行了改良，减少了实验准备时间。该产品分为培养基基础、已灭菌的缓冲剂和已灭菌的CAS检测液三个部分，使用时只需将这些组分按说明混合即可。这种培养基具备较高的透明度，便于观察微生物的生长状态和特征。ETSA培养基基础

营养肉汤（NutrientBroth，简称NB）是一种常用的细菌培养基，它的定义、应用和制备方法如下：1.**定义**：营养肉汤，也被称为普通肉汤，是一种用于细菌类疫苗检验的培养基，如作为疫苗杂菌计数的稀释液。2.**成分**：营养肉汤的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子，同时也提供碳源；氯化钠用于维持培养基的渗透压。3.**pH值**：营养肉汤的pH值通常控制在7.2±0.2（25℃）。4.**制备方法**：-将蛋白胨10g、氯化钠5.0g和牛肉汤加入至1000ml，混合后微热溶解，然后调整pH值至7.4-7.6，滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液，pH值应为7.2-7.4。-另一种配方是：蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5.0g和蒸馏水1000ml。将上述成分溶解在蒸馏水中，搅拌均匀后，使用NaOH或HCl调节pH至7.2±0.2，然后分装至三角瓶或试管中，121℃高压灭菌15分钟。5.**应用**：营养肉汤用于细菌的培养，尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。它适合营养需求较高的细菌的生长，但不适用于苛养型微生物。毛藓菌琼脂7号它具有较强的缓冲能力，能在一定程度上抵御外界环境变化对微生物生长的影响。

PYG培养基是一种专门用于双歧杆菌增菌培养的培养基，其特点主要包括：1.**成分**：PYG培养基的主要成分包括蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、氯化钠、半胱氨酸盐酸盐、氯化钙、硫酸镁、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾和碳酸氢钠。这些成分为双歧杆菌提供氮源、维生素、生长因子以及必要的缓冲剂。2.**pH值**：PYG培养基的pH值通常控制在6.0±0.1（25℃），以保证双歧杆菌的生长环境。3.**厌氧条件**：由于双歧杆菌是厌氧菌，PYG培养基需要在厌氧或微需氧条件下使用，以确保细菌的正常生长。4.**添加物**：为了促进双歧杆菌的生长，PYG培养基在使用时还需添加维生素K1和氯化血红素，这些添加剂提供了双歧杆菌生长所需的额外生长因子。5.**配制方法**：通常需要称取一定量的PYG培养基干粉，溶解在蒸馏水中，经过高压灭菌后，冷却至适当温度，再加入过滤除菌的维生素K1溶液和氯化血红素溶液，混匀后使用。6.**质量控制**：PYG培养基的质量控制包括对质控菌株的生长情况进行观察，以确保培养基的效果。例如，长双歧杆菌和婴儿双歧杆菌在PYG培养基上的生长情况通常表现为圆形凸起，奶油色，边缘整齐光滑的菌落。

DRBC培养基（Dichloran-RoseBengalChloramphenicolAgar）是一种用于酵母和霉菌分离培养的培养基。它特别适用于食品中霉菌和酵母菌的计数和分离。**DRBC培养基的基本成分**包括：-酶水解动植物组织：5.0g/L-葡萄糖：10.0g/L-磷酸二氢钾：1.0g/L-硫酸镁：0.5g/L-氯硝铵：0.002g/L-虎红钠盐：0.025g/L-氯霉素：0.1g/L-琼脂：15.0g/L**pH值**通常控制在5.6±0.2（25℃）。**配制方法**一般是：1.称取31.6克DRBC培养基干粉。2.加入1升蒸馏水或纯化水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.121℃高压灭菌15分钟后备用。**使用方法**：-将灭菌后的培养基冷却至50℃左右，倾入无菌平皿中。-接种样品后，在25±1℃下进行培养。**培养结果**：-酵母菌和霉菌在DRBC培养基上会形成粉红色的菌落。-大肠杆菌和枯草芽孢杆菌等细菌在该培养基上会被抑制。**储存条件**：-应在避光、干燥处储存。-保质期通常为三年。**质量控制**：-酿酒酵母ATCC9763在DRBC培养基上生长良好，形成粉红色菌落。-大肠埃希氏菌ATCC25922和枯草芽孢杆菌ATCC6633在该培养基上应被抑制。DRBC培养基是按照ISO21527-1标准生产的，适用于食品和动物饲料中酵母和霉菌的计数。能直观呈现细菌产酸产气及产生硫化氢的情况，TSI 培养基在细菌特性研究中不可或缺。

改良R2A琼脂（R2AAgar）是一种低营养培养基，主要用于对处理过的饮用水进行细菌学平板计数。以下是改良R2A琼脂的一些关键特点：1.**成分**：改良R2A琼脂的主要成分包括胰蛋白胨、酵母粉、酸水解酪素、可溶性淀粉、葡萄糖、磷酸氢二钾、七水硫酸镁、木酮酸钠和琼脂。这些成分提供氮源、维生素、氨基酸、碳源、矿物质，同时木酮酸钠有利于受损细胞的恢复，可溶性淀粉能够吸附有毒的代谢副产物，有利于受损微生物的恢复。2.**pH值**：改良R2A琼脂的pH值通常控制在7.2±0.2（25℃）。3.**用途**：改良R2A琼脂特别适用于饮用水、纯化水、注射用水中微生物的分离、培养、计数和鉴定。它能够让受损的和耐氯细菌恢复生长，同时又不会被快速生长微生物所掩盖。4.**制备方法**：称取适量培养基，用蒸馏水重悬溶解，推荐115℃灭菌20分钟；也可121℃灭菌15分钟。5.**质量控制**：接种质控菌株，如铜绿假单胞菌ATCC9027、枯草芽孢杆菌ATCC6623、大肠埃希氏菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC6538等，放置30-35℃需氧培养48-120小时，以确保培养基的质量符合标准。品红亚硫酸钠琼脂是一种用于微生物学检测的选择性培养基，用于饮用水和水源中总大肠菌群的选择性分离。吐温80

溴甲酚紫是一种pH指示剂，其颜色变化范围在pH 5.2（黄色）至6.8（紫色）。ETSA培养基基础

牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（TryptoneSoyAgar，TSA）是一种常用的微生物培养基，其特点和制备方法如下：1.**成分**：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基的主要成分包括牛肉膏、蛋白胨、氯化钠（NaCl）和琼脂。其中，牛肉膏提供碳源和能源，蛋白胨主要提供氮源，NaCl提供无机盐，琼脂作为凝固剂。2.**pH值**：该培养基的pH值通常控制在7.4-7.6之间，以保证细菌的生长环境。3.**制备方法**：-称量：准确称取牛肉膏3.0g、蛋白胨10.0g、NaCl5.0g。-溶化：在烧杯中加入少于所需的水量，用玻璃棒搅匀，然后加热使其溶解。待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。-调pH：在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值。如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/LNaOH，边加边搅拌，并随时用pH试纸测其pH值，直至pH达7.6。反之，则用1mol/LHCl进行调节。-分装：按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。ETSA培养基基础