变异链球菌(Streptococcusmutans)是一种在口腔中发现的细菌,与龋齿的形成有关。它是一种革兰阳性球菌,常以成对或短链状排列。在胰蛋白胨培养基中和含有95%氮气及5%二氧化碳混合气体的环境下生长良好。对于变异链球菌的培养,通常使用TSA+5%脱纤维蛋白羊血(血琼脂平板)作为培养基。在这种培养基上,变异链球菌的菌落特征为较小(直径约1mm)、灰白色、凸起、边缘不齐、干燥、有α溶血环。在选择培养基时,需要考虑培养基的pH值、营养成分、氧气需求和抑制剂等因素,以确保目标细菌能够在抑制杂菌的同时良好生长。例如,改良爱德华培养基(Edwardmodifiedmedium)是一种常用的培养基,它含有血液、血清或其它营养成分,适合于培养对营养要求较高的细菌,如链球菌。在实验室中,变异链球菌的培养和鉴定是一个多步骤的过程,包括接种、培养、观察菌落特征、进行生化试验和药敏分析等。通过这些步骤,可以准确地识别和鉴定变异链球菌,从而为临床诊断提供依据。克氏双糖铁试验时间通常控制在18-24小时,以确保细菌发酵充分且不过度,避免影响判断结果。LB培养基平板
DTA培养基的pH值对微生物生长有影响。pH值是描述溶液酸碱性的基本指标,对微生物的生长和繁殖有深远的影响。微生物的适应pH范围各不相同,不同种类的微生物对pH值的敏感度不同,存在一定的平衡范围。pH值的过高或过低都可能对微生物的生长造成不利影响。在DTA培养基中,pH值被控制在6.7±0.1(25℃),这个pH值范围是为嗜热菌芽孢的分离培养而优化的。在这个pH值下,胰酪蛋白胨能够提供适宜的碳氮源和生长因子,而葡萄糖作为可发酵的糖,溴甲酚紫作为酸碱指示剂,琼脂作为凝固剂,共同为嗜热菌芽孢提供适宜的生长环境。当培养基的pH值偏离这个范围时,可能会影响微生物的新陈代谢和酶活性,改变细胞膜的通透性,影响微生物对营养物质的吸收和代谢产物的排泄,进而影响微生物的生长。例如,如果pH值过低,可能会抑制菌体中某些酶的活性,阻碍新陈代谢;如果pH值过高,可能会导致细胞膜通透性改变,影响营养物质的吸收。因此,在配制和使用DTA培养基时,严格控制pH值是非常重要的,以确保微生物能够在适宜的环境中生长。LK培养基培养皿海藻糖-脯氨酸培养基被推荐用于稀有放线菌的分离培养基,因为它有助于提高稀有放线菌的出菌率 。
嗜盐菌选择性琼脂是一种专门用于分离和培养嗜盐菌的培养基,其特点和应用如下:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g/L-氯化钠:40.0g/L-结晶紫:0.0005g/L-琼脂:17.0g/L-pH值:8.7±0.1(25℃)2.**检验原理**:-蛋白胨提供氮源和碳源,支持微生物生长。-高含量的氯化钠创造高渗环境,有利于嗜盐菌的生长,同时抑制不耐高盐的细菌。-结晶紫抑制革兰氏阳性菌的生长。-琼脂作为凝固剂,使培养基凝固成固体。-高pH值有助于抑制部分杂菌的生长。3.**配制方法**:-称取77.0g培养基粉末,加热搅拌溶解于1000mL蒸馏水中。-分装后,121℃高压灭菌15分钟,备用。4.**使用方法**:-将培养基倾注成平板,待凝固后使用。-接种样品后,放置于36±1℃恒温培养箱中需氧培养18-24小时。5.**细菌生长特征**:-副溶血性弧菌ATCC17802:无色菌落,较湿润。-溶藻弧菌ATCC17749:无色菌落。-金黄色葡萄球菌ATCC25923:抑制生长。6.**微生物灵敏度试验**:-按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置于36±1℃需氧培养18-24小时。-回收率计算时,用TSA琼脂做对照培养基。
酚红葡萄糖肉汤(PhenolRedGlucoseBroth)是一种常用的微生物学培养基,主要用于鉴定细菌是否具有发酵葡萄糖的能力。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:酚红葡萄糖肉汤的配方包含月示胨(或称为蛋白胨)、牛肉浸粉、氯化钠、葡萄糖和酚红。其中,月示胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为可发酵的糖类;氯化钠维持渗透压;酚红作为pH指示剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.4±0.1(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌10-15分钟。4.**使用方法**:称取培养基粉末,溶解于蒸馏水中,分装试管,每管3ml。5.**质量控制**:接种蜡样芽孢杆菌后,在厌氧条件下35℃培养24小时,培养基由红色变为黄色,表明细菌发酵葡萄糖产酸。6.**用途**:酚红葡萄糖肉汤用于蜡样芽孢杆菌葡萄糖分解试验(SN标准),也用于检测大肠菌群。7.**结果观察**:如果培养基颜色由红色变为黄色,说明细菌发酵葡萄糖产酸;如果培养基颜色不变或红色加深,说明该微生物葡萄糖发酵阴性。8.**储存条件**:避光,密封,阴凉干燥处保存。由于其营养成分的丰富性,不同类型的微生物在血琼脂基础2号上能够迅速生长,并形成明显的菌落。
弯曲杆菌琼脂基础是一种专门用于分离和培养弯曲杆菌属(Campylobacter)细菌的培养基,尤其是空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)和大肠弯曲杆菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些主要特点:1.**选择性培养**:弯曲杆菌琼脂基础通常与特定的选择性添加剂一起使用,如改良Karmali选择性添加剂或弯曲杆菌选择性添加剂,这些添加剂含有抗生物质,如万古霉素和两性霉素B,以抑制其他非目标微生物的生长,提高目标弯曲杆菌的分离率。2.**无血培养基**:某些类型的弯曲杆菌琼脂基础是无血的,这使得它在某些应用中比需要添加血液的培养基更为方便和经济。无血培养基通常使用活性炭、硫酸亚铁和酸钠替代血液。3.**微需氧环境**:弯曲杆菌是微需氧菌,生长环境是含氧气5%、二氧化碳10%、氮气85%。因此,弯曲杆菌琼脂基础通常在微需氧条件下使用,这有助于弯曲杆菌的生长。4.**菌落特征**:在适宜的条件下,空肠弯曲杆菌在弯曲杆菌琼脂基础中生长,形成灰色、湿润、平铺的菌落,这些特征有助于识别弯曲杆菌。5.配方:弯曲杆菌琼脂基础的配方可能包含蛋白胨、酵母浸粉、胰酪蛋白胨、氯化钠、琼脂等,提供碳、氮源、维生素和生长因子。
PYG培养基的干粉应在避光、干燥处保存,未开封的保质期通常为三年。使用后应立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块 。LB培养基平板
PALCAM琼脂基础(PalcamAgarBase)是一种用于分离单核细胞增生李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的选择性培养基。它的特点如下:1.**成分**:PALCAM琼脂基础包含酪蛋白胰酶消化物、心胰酶消化物、玉米淀粉、肉胃酶消化物、酵母膏粉、氯化钠、葡萄糖、甘露醇、柠檬酸铁铵、七叶苷、氯化锂、酚红和琼脂等成分。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.2±0.2(25℃),为李斯特氏菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:氯化锂和抗生物质添加剂(如盐酸吖啶黄素、硫酸多粘菌素B和头孢他啶)能够抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌,从而提高对李斯特氏菌的选择性。4.**应用**:主要用于食品、水和污水样本中单核细胞增生李斯特氏菌的选择性分离培养。5.**配制方法**:通常称取71.9g培养基粉末,加入1升蒸馏水,加热至完全溶解,分装后进行高压灭菌。使用时,冷却至50℃,加入配套的添加剂,混匀后倾入无菌培养皿。6.**结果观察**:李斯特氏菌在PALCAM琼脂上生长时,会水解七叶苷生成黑色的6,7-二羟基香豆素,形成灰绿色菌落,中心凹陷,周围有黑色环。