DNA序列的快速分析法是70年代末发展起来的。利用限制性内切酶,人们可以完全重复地把从某一生物体中得到的DNA切割成大小不同的片段。这些片段在原来的DNA分子中的排列顺序可以通过实验得以确定。这时,确定一个长度为500bp的DNA片段的顺序也已成为现实。因此,要分析7个长达10kb的DNA分子的序列也已没有任何困难。也就是说,任何DNA分子都可进行分离和序列分析。这为人们了解复杂的真核生物基因组结构开辟了道路。依靠计算机的帮助,我们可以自动分析DNA的序列,并将序列资料进行贮存、比较和分析。可以预见,人们还将了解整个人类基因组的顺序。首尾相连的氨基酸通过氨基与羧基的缩合形成链状结构,称为肽链。普陀区标准分子生物学商家
蛋白质的特殊性质和生理功能与其分子的特定结构有着密切的关系,这是形形**的蛋白质所以能表现出丰富多彩的生命活动的分子基础。研究蛋白质的结构与功能的关系是分子生物学研究的一个重要内容。随着结构分析技术的发展,1962年已有几千个蛋白质的化学结构和几百个蛋白质的立体结构得到了阐明。70年代末以来,采用测定互补DNA顺序反推蛋白质化学结构的方法,不仅提高了分析效率,而且使一些氨基酸序列分析条件不易得到满足的蛋白质化学结构分析得以实现。发现和鉴定具有新功能的蛋白质,仍是蛋白质研究的内容。例如与基因调控和高级神经活动有关的蛋白质的研究很受重视。普陀区标准分子生物学商家细菌,如大肠杆菌的基因组,含4×10^6碱基对。人体细胞染色体上所含DNA为3×10^9碱基对。
随着基因工程的蓬勃兴起而首先受益的产业领域就是制药工业。现已有些多肽或蛋白质药物,如人胰岛素、生长***、干扰素等能够通过“工程菌”大量生产,更多的药物则正在开发之中。疫苗的研制正在极大地促进预防医学的发展,例如,乙型肝炎疫苗、非甲非乙肝炎疫苗、轮状病毒疫苗、疟疾疫苗等等,有些已能付诸应用,有些尚在开发之中。通过蛋白质工程技术,采用定点突变的方法,还可望制造出新型的蛋白质。例如,白细胞介素 2和β干扰素是两种具有***作用的蛋白质,在其多肽链中各有三个半胱氨酸残基,但只形成一对二硫键,由于分子中含有多余的一个半胱氨酸残基,所以二个分子容易缔结合成二聚体而失活,用定点突变法改变半胱氨酸的密码子为丝氨酸密码子,就可防止二聚体的形成,从而在不损害活性的情况下**延长这两个蛋白质的半衰期,提高了疗效。
所以,可检双链均有一样的FLR 正链,杂交双链的电泳迁移率可能相同,但是由于反义单链的差异双链变性程度的差异而**终造成电泳迁移率的不同。不像SSCP 技术,DSCA能够任意操纵变性双链的形成,选用不同的FLR可以达到难分样本的比较好分离效果。另外,通过调整FLR 和样本待测DNA分子的比例,可专一性增强杂交异质双链信号并减弱纯合双链信号。DSCA技术的优点还在于它依据样品经过固定检测仪的时间差,而非相同电泳时间迁移的距离差来判断突变的有无,这样就避免了诸如SSCP 等技术分析中因迁移速率差异而降低的泳动速度慢的条带检测率。另一方面,DSCA的有效检测片段长度可达1 kb。由于激光系统的介入,DSCA的灵敏度和上样量分别得以提高和降低,不到1 秒的泳动差异也足以检测。该技术已被成功地用于囊性纤维化基因(cystic fibrosis gene) 的4 种突变,以及HLA Ñ型基因中131 种等应基因的检测。而分子生物学则着重在分子(包括多分子体系)水平上研究生命活动的普遍规律;
变性- 高压液相色谱分析变性- 高压液相色谱(denaturing high- performance liquid chromatography,DHPLC) 是利用DNA构型改变检测基因突变和遗传多态性的方法之一,其可以检测单核苷酸多态和可遗传的突变。实验主要过程包括PCR 扩增待测和正常DNA样品,将扩增产物变性后再复性,若存在突变,在这一复性过程中可形成异源双链。在部分变性条件下,高压液相色谱分析可以有效地区分由变异碱基与正常碱基形成的异源DNA双链和正常DNA双链。由于DHPLC 的分辨率可达到1bp/ kb,而且操作过程可以全部程序化、大规模化和自动化,使得实验时间**缩短,实验准确率提高,可作为大群体任何基因突变初筛的有力手段,比SSCP 有更多的优越性,具有广泛的应用前景,许多工作都已经证实了DHPLC的敏感性、有效性和准确性。现代化学和物理学理论、技术和方法的应 用推动了生物大分子结构功能的研究,从而出现了近30年来分子生物学的蓬勃发展。浦东新区本地分子生物学推荐货源
1958年Crick在此基础上提出的中心法则,描述了遗传信息从基因到蛋白质结构的流动。普陀区标准分子生物学商家
随着医学分子生物学研究的日益深入,有关遗传病的一些概念正在发生变化。首先,这类疾病不再象过去认为的那么罕见。至今发现按照孟德尔方式遗传的遗传病已达3000余种。如果估计到疾病易感性和基因变异的关系,则遗传病范围会更加扩大,例如易患心脏病、肺气肿、高胆固醇血症、糖尿病、***反应和胃溃疡病等等的基因正在得到分离,甚至**,有的学者认为也可归属于遗传病的范畴,其根本原因在于DNA的损伤。其次,基因探针技术正在逐步扩大产前诊断和遗传病诊断的范围。显然,检查出易感某病的基因对于个人保健是十分宝贵的信息,也是针对疾病危险因素采取预防措施的科学依据。在***上,过去一切对遗传病的疗法都只能是对症的,从理论上讲,只有基因疗法才是***遗传病的*****方法。当然,要将这种方法付诸实践在当前尚有许多理论上和技术上的困难有待克服。普陀区标准分子生物学商家
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