使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
庆大霉素琼脂基础是一种用于微生物培养的培养基,其特点和应用如下:1.**用途**:主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养,符合GB标准。2.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉浸粉:3.0g/L-亚硫酸钠:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-枸橼酸钠:10.0g/L-蔗糖:10.0g/L-庆大霉素:250IU/L-琼脂:15.0g/L-pH值:8.3-8.7(25℃)3.**检验原理**:-蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素和生长因子;-氯化钠维持均衡的渗透压;-蔗糖提供碳源;-亚硫酸钠可刺激弧菌生长;-枸橼酸钠、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH值可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌;-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;-琼脂是培养基的凝固剂。4.**配制方法**:-称取本品56.0g,加热搅拌溶解于1000ml蒸馏水中,冷至50℃左右时,加入无菌1%亚碲酸钾溶液0.5ml,混匀,倾入无菌平皿,备用。-无需高压灭菌。5.**微生物质控结果**:-霍乱弧菌VBO:生长率PR≥0.7,淡灰色菌落。-大肠埃希氏菌ATCC25922:选择性G≤3,无生长。庆大霉素琼脂基础因其特定的成分和用途,在食品卫生检验、医药、水质检测等领域有着广泛的应用。DCA平板水琼脂培养基的凝胶结构在不同温度下可能会发生变化,因此需要根据微生物的特性调控培养温度。
改良McBride琼脂基础(MMA)是一种用于微生物学研究和诊断的培养基,它具有一些特定的特点和用途:1.**选择性分离培养基**:改良McBride琼脂基础(MMA)主要用于李斯特氏菌的选择性分离。它通过添加特定的抗生物质或化学物质,抑制其他非目标微生物的生长,从而促进目标微生物——在这种情况下是李斯特氏菌的生长。2.**配方成分**:该培养基的配方包括酪胨、多价胨、牛肉浸粉、葡萄糖、氯化钠、磷酸氢二钠、甘氨酸、氯化锂和琼脂等。这些成分为微生物提供了生长所需的营养物质和环境。3.**pH值**:改良McBride琼脂基础(MMA)的pH值通常控制在7.3±0.2(25℃),这为李斯特氏菌的生长提供了适宜的酸碱环境。4.**添加物**:在使用时,每升培养基中需添加2.5g苯乙醇以及200mg环乙酰亚胺或30mg复达欣,这些添加物有助于抑制其他微生物的生长,提高李斯特氏菌分离的选择性。5.**高压灭菌**:在制备过程中,需要将培养基加热至完全溶解,然后进行121℃高压灭菌15分钟,以确保培养基的无菌性。6.**冷却和添加抗生物质**:灭菌后,培养基需要冷却至50℃,然后在无菌环境下加入抗生物质,备用。
M-远藤氏防腐培养基(M-EndoAnti-corrosionMedium)是一种用于微生物检测的培养基,主要用于水中大肠菌群的膜过滤法检测。以下是它的一些特点和配制方法:1.**配方**:M-远藤氏防腐培养基的配方包含胰胨、蛋白胨、酵母浸粉、乳糖、氯化钠、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、硫酸十二烷基钠、去氧胆酸钠和亚硫酸钠等成分,以及作为指示剂的碱性品红。2.**配制方法**:通常称取一定量的培养基粉末,加入指定量的无水乙醇和蒸馏水,加热至沸腾以帮助溶解。配制好的培养基通常需要在121℃下高压灭菌15分钟。3.**用途**:这种培养基专门用于检测饮用水、废水、乳制品和食品中的大肠菌群,是执行标准方法的一部分,如美国公共卫生协会(APHA)所推荐的方法。4.**贮藏条件**:配制好的培养基通常需要在2-8°C下避光保存,以保持其有效性。5.**结果观察**:在M-远藤氏防腐培养基上,乳糖发酵型的大肠杆菌和大肠菌群会产生红色至深红色的菌落,带有金色金属光泽,而非乳糖发酵型微生物则产生无色透明菌落。6.**产品规格**:M-远藤氏防腐培养基通常以250g/瓶的规格出售,并且有较长的保存期限,一般为3年。7.**注意事项**:在配制和使用过程中,应避免摄入、吸入和皮肤接触,以确保操作安全。巴氏芽孢杆菌的芽孢形成需要特定的培养条件,包括营养和环境因素。例如,使用改良的Schaeffer培养基。
CATC琼脂是一种用于分离和培养肠球菌的选择性培养基,特别适用于食品和饮料中肠球菌的分离培养。以下是它的一些特点:1.**成分**:含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、磷酸二氢钾、柠檬酸钠、吐温80、碳酸钠、叠氮钠和红四氮唑(TTC)等成分,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.0±0.2(25℃),适合肠球菌的生长。3.**选择性**:叠氮钠可以抑制革兰氏阴性菌的生长,而红四氮唑(TTC)可以作为指示剂,粪肠球菌能将TTC还原成一种酸性的偶氮染料,显示为深红色菌落。4.**应用**:主要用于食品和饮料中肠球菌的分离培养,也可用于生活饮用水中肠球菌的计数。5.**配制方法**:通常称取58.5g的培养基粉末,加热煮沸溶解于1000mL蒸馏水中,冷却至50-55℃时倾入无菌平皿备用,无需高压灭菌。6.**质量控制**:质控菌株如粪肠球菌(ATCC29212)和大肠埃希氏菌(ATCC25922)等在CATC琼脂上的生长情况可以用于评估培养基的性能。7.**储存条件**:CATC琼脂通常在避光、干燥处保存,保质期可达三年。8.**用途**:除了用于食品和饮料中肠球菌的分离外,还适用于水质检测中的肠球菌计数。哥伦比亚肉汤为非选择性培养基,大多数微生物都能在其上生长良好,因此常用于微生物的初步分离和培养。TBA预装培养皿
哥伦比亚肉汤的pH值通常控制在7.3至7.5之间,为微生物生长提供适宜的酸碱环境 。EF-18琼脂预装培养皿
溶菌酶营养肉汤基础是一种用于微生物学研究的培养基,特别是在鉴定某些细菌对溶菌酶的敏感性方面。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:溶菌酶营养肉汤基础的主要成分包括牛肉浸粉和蛋白胨,这些成分为细菌的生长提供碳源、氮源、维生素和生长因子。此外,还需要添加0.1%的溶菌酶溶液,溶菌酶是一种能够水解细菌细胞壁的酶,主要用于检测细菌对溶菌酶的耐受性。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在6.8±0.1(25℃),以保证细菌在比较好pH环境下生长。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟,以确保无菌。4.**使用方法**:称取培养基粉末,溶解于蒸馏水中,分装于烧瓶中,每瓶99ml,高压灭菌后冷却至50℃左右时,每瓶中加入0.1%溶菌酶溶液1ml,混匀后分装无菌试管,每管2.5ml,备用。5.**用途**:溶菌酶营养肉汤基础主要用于蜡样芽孢杆菌的溶菌酶试验,如GB4789.14-2014标准所述。它可以用来鉴定细菌是否能够在溶菌酶存在的情况下生长,从而帮助鉴别不同的细菌种类。6.**添加剂**:每瓶培养基需配套添加0.1%溶菌酶溶液使用,每支添加于99mL溶菌酶营养肉汤中。EF-18琼脂预装培养皿