肉浸液肉汤是一种基础的微生物培养基,其主要特点和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉汤主要由绞碎牛肉、氯化钠、蛋白胨和磷酸氢二钾组成,再加上一定量的蒸馏水。具体配比为:绞碎牛肉500g、氯化钠5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾2g、蒸馏水1000mL。2.**制作方法**:首先将绞碎的去筋膜无油脂牛肉与蒸馏水混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量。然后加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30分钟。3.**用途**:肉浸液肉汤通常用于培养那些营养要求不是特别高的细菌,如溶血性链球菌及其他营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了细菌生长所需的氮源、维生素和生长因子。4.**培养特征**:在肉浸液肉汤中,细菌可以很好地生长,通常表现为肉汤混浊,这是由于细菌的代谢活动导致的。5.**储存**:肉浸液肉汤的脱水培养基应避光储存于25℃下阴凉干燥处,开过封的脱水培养基应盖紧瓶盖注意密封储存。DC培养基主要用于分离大肠杆菌等肠道革兰氏阴性细菌,因为这些细菌对去氧胆酸盐的敏感性较低。乙酰胺琼脂平板
TYCSB培养基基础(TryptoneYeastCystineSucroseBacitracinMediumBase)是一种用于分离和培养特定细菌的选择性培养基。它的特点包括:1.**成分**:包含胰蛋白胨、酵母膏粉、L-胱氨酸盐酸盐、亚硫酸钠、氯化钠、无水磷酸氢二钠、碳酸氢钠、无水乙酸钠和蔗糖等,琼脂作为凝固剂。这些成分为细菌提供氮源、碳源、维生素和生长因子。2.**pH值**:培养基的pH值控制在7.3±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:添加的杆菌肽(Bacitracin)可以抑制革兰氏阴性菌的生长,有助于选择性地分离革兰氏阳性菌,特别是链球菌和肠球菌。4.**应用**:主要用于变异链球菌(Streptococcusmutans)的分离和培养,也适用于其他链球菌和肠球菌的分离。5.**配制方法**:通常称取培养基粉末,加入到一定量的蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。6.**质量控制**:通过使用特定的质控菌株进行测试,确保培养基支持目标菌株的生长,同时抑制非目标菌株。7.**储存条件**:未配制的培养基粉末应密封保存在阴凉干燥处,配制好的培养基应保存在2-8°C。8.**结果观察**:在TYCSB培养基上,可以观察到细菌的生长情况,用于进一步的鉴定和分析。结晶紫中性红胆盐琼脂预装培养皿TTC的显色作用可以使大肠埃希菌等产生红色的菌落。
改良McBride琼脂基础(MMA)是一种用于微生物学研究和诊断的培养基,它具有一些特定的特点和用途:1.**选择性分离培养基**:改良McBride琼脂基础(MMA)主要用于李斯特氏菌的选择性分离。它通过添加特定的抗生物质或化学物质,抑制其他非目标微生物的生长,从而促进目标微生物——在这种情况下是李斯特氏菌的生长。2.**配方成分**:该培养基的配方包括酪胨、多价胨、牛肉浸粉、葡萄糖、氯化钠、磷酸氢二钠、甘氨酸、氯化锂和琼脂等。这些成分为微生物提供了生长所需的营养物质和环境。3.**pH值**:改良McBride琼脂基础(MMA)的pH值通常控制在7.3±0.2(25℃),这为李斯特氏菌的生长提供了适宜的酸碱环境。4.**添加物**:在使用时,每升培养基中需添加2.5g苯乙醇以及200mg环乙酰亚胺或30mg复达欣,这些添加物有助于抑制其他微生物的生长,提高李斯特氏菌分离的选择性。5.**高压灭菌**:在制备过程中,需要将培养基加热至完全溶解,然后进行121℃高压灭菌15分钟,以确保培养基的无菌性。6.**冷却和添加抗生物质**:灭菌后,培养基需要冷却至50℃,然后在无菌环境下加入抗生物质,备用。
蜡状芽孢杆菌琼脂基础(TSSB)是一种用于分离和培养蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)的培养基。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:蜡状芽孢杆菌琼脂基础的配方包含胰酪蛋白胨、牛肉浸粉、D-甘露醇、氯化钠、苯酚红和琼脂等成分。其中,胰酪蛋白胨和牛肉浸粉提供碳源和氮源,D-甘露醇作为可发酵的糖,氯化钠维持渗透压,苯酚红作为pH指示剂,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.2±0.2(25℃)。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟。4.**添加剂**:每瓶需配套添加多粘菌素B和50%卵黄乳液使用,每100ml蜡样芽孢杆菌选择性琼脂培养基基础中添加1支多粘菌素B和2支50%卵黄乳液。5.**用法**:称取本品43.0g加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装每瓶100ml,121℃高压灭菌15分钟,冷至50℃左右时,每瓶加入10ml50%的无菌卵黄乳液和多粘菌素B10000IU混匀,倾入无菌平皿,备用。6.**菌落特征**:蜡样芽孢杆菌在TSSB上生长时,菌落通常为微粉红色,周围有淡粉红色沉淀环,这有助于识别蜡样芽孢杆菌。7.**质量控制**:进行微生物灵敏度试验时,按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置36±1℃需氧培养24-48小时。马铃薯浸出液琼脂培养皿可以更好地维持微生物的多样性,有利于保留微生物的天然群落结构。
改良亚硫酸盐琼脂(ModifiedSulfiteAgar)是一种用于微生物培养的培养基,具有以下特点:1.**用途**:主要用于食品中嗜热菌芽孢(包括需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢)的分离培养和计数。2.**成分**:通常包含蛋白胨、无水亚硫酸钠和琼脂。具体配方为每升培养基含蛋白胨10.0克、无水亚硫酸钠1.0克、琼脂20.0克。3.**配制方法**:称取31.0g培养基粉末,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装试管,再于各试管内加入适量清洁的混铁粉或铁屑,不调pH,121℃高压灭菌20分钟,备用。4.**微生物灵敏度试验**:按标签用法制备培养基,接种质控菌株,放置于55℃厌氧培养48小时以验证培养基的性能。5.**加热灭菌**:在加热灭菌前,培养基成分应边搅拌边溶解于水中。灭菌时间通常要在121℃下保持15~20分钟,从中心温度达到121℃开始计算。6.**储存条件**:未提供具体储存条件,但一般培养基应密封保存于2-25°C的环境中。7.**注意事项**:避免摄入、吸入、皮肤接触,并确保在制备和使用过程中遵循适当的安全措施。改良亚硫酸盐琼脂因其特定的成分和用途,在食品卫生检验、医药、水质检测等领域有着广泛的应用。EMB培养基的特点是它对大肠杆菌等产酸革兰氏阴性菌的选择性较强。沙氏葡萄糖琼脂培养基平板
VRBA培养基提供了一种简便而有效的方法,用于选择性地富集和分离肠道细菌。乙酰胺琼脂平板
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。