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变性- 高压液相色谱分析变性- 高压液相色谱（denaturing high- performance liquid chromatography,DHPLC） 是利用DNA构型改变检测基因突变和遗传多态性的方法之一，其可以检测单核苷酸多态和可遗传的突变。实验主要过程包括PCR 扩增待测和正常DNA样品，将扩增产物变性后再复性，若存在突变，在这一复性过程中可形成异源双链。在部分变性条件下，高压液相色谱分析可以有效地区分由变异碱基与正常碱基形成的异源DNA双链和正常DNA双链。由于DHPLC 的分辨率可达到1bp/ kb，而且操作过程可以全部程序化、大规模化和自动化，使得实验时间**缩短，实验准确率提高，可作为大群体任何基因突变初筛的有力手段，比SSCP 有更多的优越性，具有广泛的应用前景，许多工作都已经证实了DHPLC的敏感性、有效性和准确性。遗传密码的阐明则揭示了生物体内遗传信息的贮存方式。普陀区标准分子生物学厂家现货

生物体的遗传特征主要由核酸决定。绝大多数生物的基因都由 DNA构成。简单的病毒，如λ噬菌体的基因组是由 46000个核苷酸按一定顺序组成的一条双股DNA（由于是双股DNA，通常以碱基对计算其长度）。细菌，如大肠杆菌的基因组，含4×10^6碱基对。人体细胞染色体上所含DNA为3×10^9碱基对。遗传信息要在子代的生命活动中表现出来，需要通过复制、转录和转译。复制是以亲代 DNA为模板合成子代DNA分子。转录是根据DNA的核苷酸序列决定一类RNA分子中的核苷酸序列；后者又进一步决定蛋白质分子中氨基酸的序列，就是转译。因为这一类RNA起着信息传递作用，故称信使核糖核酸(mRNA）。宝山区质量分子生物学均价真核细胞染色质所含的非组蛋白在转录的调控中具有特殊作用。

DNA序列的快速分析法是70年代末发展起来的。利用限制性内切酶,人们可以完全重复地把从某一生物体中得到的DNA切割成大小不同的片段。这些片段在原来的DNA分子中的排列顺序可以通过实验得以确定。这时,确定一个长度为500bp的DNA片段的顺序也已成为现实。因此,要分析7个长达10kb的DNA分子的序列也已没有任何困难。也就是说,任何DNA分子都可进行分离和序列分析。这为人们了解复杂的真核生物基因组结构开辟了道路。依靠计算机的帮助,我们可以自动分析DNA的序列,并将序列资料进行贮存、比较和分析。可以预见,人们还将了解整个人类基因组的顺序。

**30年左右的时间，分子生物学经历了从大胆的科学假说，到经过大量的实验研究，从而建立了本学科的理论基础。进入70年代，由于重组DNA研究的突破，基因工程已经在实际应用中开花结果，根据人的意愿改造蛋白质结构的蛋白质工程也已经成为现实。蛋白质的结构单位是α-氨基酸。常见的氨基酸共20种。它们以不同的顺序排列可以为生命世界提供天文数字的各种各样的蛋白质。蛋白质分子结构蛋白质分子结构的组织形式可分为 4个主要的层次。一级结构，也叫化学结构，是分子中氨基酸的排列顺序。首尾相连的氨基酸通过氨基与羧基的缩合形成链状结构，称为肽链。肽链主链原子的局部空间排列为二级结构。二级结构在空间中进行盘曲折叠形成三级结构。有些蛋白质分子是由相同的或不同的亚单位组装成的，亚单位间的相互关系为四级结构。分子生物学研究的主要目的是在分子水平上阐明整个生物界所共同具有的基本特征，即生命现象的本质；

PCR- rSSCP 法依据RNA构象对单个碱基替代更敏感的原理，在PCR 引物上加上某类启动子，通过转录的RNA构象体的电泳迁移差异进行突变鉴别。PCR- ddF 法把PCR 产物转录，将转录物用反转录酶进行Sanger 双脱氧终止测序反应，通过观察非变性胶上经解链处理所产生的单链漂移、突变后终止片段的获得与缺失来判断突变。PCR- REF 法将RFLP 和SSCP 技术优势组合，将PCR 扩增的待测片段用5~ 6 种限制酶依次消化，混合并进行末端标记，***经变性处理并在非变性凝胶上电泳分离，从而获得来自片段长度和片段构象的双重突变信息。细菌，如大肠杆菌的基因组，含4×10^6碱基对。人体细胞染色体上所含DNA为3×10^9碱基对。金山区耐热分子生物学厂家供应

而分子生物学则着重在分子（包括多分子体系）水平上研究生命活动的普遍规律；普陀区标准分子生物学厂家现货

＞C=O称为羰基（羰的字和音均由碳氧二字拼合而成）。细胞里含有羰基的化合物常见的有四种：羰基（酮基）在碳链中间的化合物称为酮；如果羰基在碳链末段的有两种形式，含-CHO的分子称为醛，含-COOH的称为羧酸（羧字是“羟基酸”的拼合）；如果同时有2个羰基存在于苯环上称之为醌。醛、酮、羧酸、醌化合物在细胞里很常见，尤其是酮和羧酸，如**、β-酮丁酸（乙酰乙酸）、α-酮戊二酸、泛醌（辅酶Q）、磷酸吡哆醛等。羧基可解离产生氢离子而形成负电离子-COO-，因此，羧基是酸性基团。普陀区标准分子生物学厂家现货

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