dCTPSolution(脱氧胞苷三磷酸溶液)是一种分子生物学试剂,它是进行DNA合成反应的关键成分之一。dCTP与dATP、dGTP和dTTP一起,构成DNA聚合过程中所需的四种脱氧核苷三磷酸(dNTPs)。每种dNTP对应DNA中的一个碱基:腺嘌呤(A)、胞嘧啶(C)、鸟嘌呤(G)和胸腺嘧啶(T)。dCTP的化学名称是2'-脱氧胞苷-5'-三磷酸,它在DNA合成中起到以下作用:-**DNA合成**:在聚合酶链反应(PCR)和其他DNA合成过程中,dCTP作为底物,由DNA聚合酶催化,与DNA模板链上的鸟嘌呤(G)配对,形成新的DNA链。-**DNA测序**:在某些DNA测序方法中,dCTP可能用于标记或合成测序产物。-**分子克隆和其他技术**:dCTP在分子克隆、基因表达分析和其他涉及DNA合成的实验中也有应用。dCTPSolution通常以高浓度(如100mM)的溶液形式提供,以便于在实验中使用时进行稀释。这种溶液需要在低温(通常是-20°C)条件下储存,以保持其稳定性和避免分解。在购买和使用dCTPSolution时,用户应确保产品具有高纯度、无PCR抑制剂、无核酸酶污染等特性,以保证实验的准确性和重复性。此外,dCTPSolution应用于研究用途,不应用于临床诊断过程。通过测序或基于PCR的方法(如T7E1酶切和测序)来验证gRNA的编辑效率,筛选出效率高的gRNA序列 。Recombinant Human FOLR1(His-Avi Tag)
5'DNA腺苷酰化试剂盒的单步反应是一种高效的酶促反应,用于在DNA分子的5'端添加一个腺苷酸(AMP)基团。这个过程通常涉及以下步骤:1.**准备反应混合物**:-根据试剂盒说明书,将所需的5'磷酸化的单链DNA(ssDNA或pDNA)、MthRNA连接酶(或其他腺苷酰化酶)、ATP和相应的缓冲液按比例混合。2.**孵育反应**:-将混合好的反应体系在指定的温度(通常是65℃)下孵育一定的时间,以允许酶将ATP中的AMP部分转移到DNA的5'端。3.**酶失活**:-反应完成后,通常在85℃孵育5分钟以失活腺苷酰化酶,这一步是为了防止后续的去腺苷酰化现象,确保反应的稳定性。4.**产物收集**:-由于转化效率高,通常不需要进行凝胶纯化步骤。可以通过乙醇沉淀等方法收集腺苷酰化后的DNA产物。5.**产物应用**:-收集的腺苷酰化DNA可以直接用于后续的克隆、测序、连接或其他分子生物学实验。6.**注意事项**:-确保所有操作在无RNA酶和无DNA酶的环境中进行,以避免污染。-使用时需注意反应体系的准确性,确保底物、酶和ATP的比例适当。单步反应的优势在于简化了操作流程,减少了样品处理的复杂性,并且由于高转化效率,避免了耗时的纯化步骤,从而节省了时间和成本。Recombinant Human LRP10 Protein,His TagFnCas12a的双链或单链DNA靶标都能激发其反式剪切活性,即在形成三元复合物后,针对非特异序列ssDNA的剪切。
1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中的逆转录酶(ReverseTranscriptase,RT)具有一个关键特性:它们通过特定的突变消除了RNaseH活性。RNaseH是一种通常与某些逆转录酶相关的酶活性,它能够降解RNA。然而,在1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中,逆转录酶被设计成不具有这种降解RNA的能力,从而在合成cDNA的链时保护RNA模板不被降解。以下是1stStrandcDNASynthesisKit(RNaseH-)中逆转录过程的一般步骤,以及如何避免RNA降解:1.**RNA模板准备**:首先确保RNA模板的纯度和完整性,避免DNA污染。可以通过DNaseI处理去除RNA样品中的DNA污染。2.**混合反应组分**:将RNA模板、dNTPs(去氧核苷酸三磷酸)、逆转录引物(如oligo(dT)或随机引物)和缓冲液混合。3.**逆转录酶添加**:加入经过突变处理的逆转录酶,这种酶缺乏RNaseH活性,因此不会在合成过程中降解RNA。4.**逆转录反应**:在适宜的温度下进行逆转录反应,逆转录酶根据RNA模板合成cDNA链。5.**终止反应**:通过加热至一定温度来终止逆转录反应。
在5'DNA腺苷酰化试剂盒中,"5'"表示DNA分子的5'端,即DNA链的起始端。DNA和RNA分子由核苷酸单元组成,每个核苷酸由一个糖分子、一个磷酸基团和一个含氮碱基组成。在DNA中,糖分子是脱氧核糖。这些核苷酸通过磷酸二酯键连接在一起形成多核苷酸链。DNA链有两个端点,分别是5'端和3'端,这两个端点是根据糖分子上碳原子的编号来命名的:-**5'端**(5'-phosphategroup):这个端点的磷酸基团连接在脱氧核糖的第五个碳原子上。-**3'端**(3'-hydroxylgroup):这个端点的脱氧核糖上第三碳原子上有一个自由的羟基(-OH)。5'DNA腺苷酰化试剂盒的目的是将腺苷酸(AMP)加到DNA分子的5'端,形成5'-磷酸腺苷键。这种修饰对于某些分子生物学应用非常重要,例如在RNA干扰(RNAi)、高通量测序、连接反应或PCR检测中制备特定的接头或适配体。在5'DNA腺苷酰化试剂盒中,通常包含一种酶(如腺苷酸化酶或某些RNA连接酶),它可以催化将ATP中的AMP部分转移到DNA的5'端磷酸基团上,从而完成腺苷酰化过程。在一项研究中,比较了具有不同NLS融合的Cas9蛋白和Cas9 mRNA在斑马鱼基因组编辑中的效率。
AdvanceFastPCRMasterMix(2×)与高保真DNA聚合酶之间的具体联系主要体现在以下几个方面:1.**成分**:高保真DNA聚合酶是AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中的关键成分之一。这种酶负责在PCR过程中合成新的DNA链,其保真度决定了扩增过程的准确性。2.**保真度**:AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中的HieffCanace™AdvanceFastHigh-FidelityDNAPolymerase具有高保真度,这意味着在复制DNA时,它能够更准确地维持原始模板DNA的序列,减少错误或突变的引入。3.**酶的活性**:该产品中的高保真DNA聚合酶具有5'→3'DNA聚合酶活性和3'→5'核酸外切酶活性,这些活性有助于提高PCR扩增的特异性和效率。4.**扩增速度**:高保真DNA聚合酶在AdvanceFastPCRMasterMix(2×)中提供了快速的扩增速度,如5秒/kb,这有助于减少PCR扩增过程中的非特异性扩增。5.**适用性**:高保真DNA聚合酶使得AdvanceFastPCRMasterMix(2×)能够适用于不同GC含量的基因扩增,包括高GC和低GC区域,提高了PCR的适用性和成功率。
全长A2aR蛋白具有天然完整构象,VLP(病毒样颗粒)固有特征可以带来更高的免疫原性。Recombinant Human FOLR1(His-Avi Tag)
T4UvsX重组酶是一种来源于T4噬菌体的酶,属于RecA/Rad51家族的同源体。这种重组酶在双链DNA断裂的修复以及复制叉重新启动的过程中扮演着重要角色。T4UvsX重组酶能够与其他DNA结合蛋白或辅助因子协同作用,与单链DNA形成核酸蛋白复合物。该复合物通过寻找与目标DNA互补的区域进行杂交,以完成链置换反应,且此酶本身不具有核酸酶活性。产品应用方面,T4UvsX重组酶主要用于等温扩增技术,如重组酶聚合酶扩增(RPA)技术。它在实验中与T4UvsY重组酶、BsuDNA聚合酶(大片段)、T4基因32蛋白(gp32)等组分一同使用,以优化RPA扩增反应。T4UvsX重组酶的保存条件为-20℃,可保存3年,或者-20℃储存有效期为2年,避免反复冻融。其储存液通常包含Tris-HCl、KCl、DTT、EDTA和甘油等成分,以保持酶的稳定性和活性。热失活处理为60℃孵育10分钟。在使用T4UvsX重组酶时,需要注意其保存液中甘油含量较高,建议单独分装保存,并且在操作时穿着实验服并佩戴一次性手套,以确保安全。此外,该产品供科研使用,不应用于临床诊断。Recombinant Human FOLR1(His-Avi Tag)
磁珠法在基因克隆中的应用主要体现在以下几个方面:1.**质粒DNA的提取**:磁珠法可以用于从细菌细胞中提取质粒DNA,这对于质粒的克隆和表达至关重要。通过磁珠法提取的质粒DNA纯度高,适合用于后续的酶切、连接、转化等分子克隆步骤。2.**基因组DNA的提取**:磁珠法可以用于从各种生物样本中提取基因组DNA,这对于基因组的克隆和分析非常重要。提取的基因组DNA可以用于PCR扩增、基因表达分析、基因突变检测等。3.**mRNA的提取和纯化**:在mRNA克隆中,磁珠法可以用于提取和纯化mRNA,这对于cDNA的合成和基因表达分析非常关键。磁珠法提取的mRNA纯度高,可以用于后续的cDNA合成和...