Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)注意事项1.本产品所讲述的缓冲体系需要自行配置。2.不建议37℃条件下酶切,可能会有非特异性酶切出现。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切会受到影响。如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种,为获得理想的酶切结果,请先将样品透析到25mMTris-HCl8.0缓冲液中,然后再进行酶切实验;若不方便透析,可将样品稀释到咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶切,酶的用量与蛋白比例不变;若干扰因素很多,且不便去除,需要适当增加酶量或延长酶切时间,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用,痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性,因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。5.本品是具有高酶活力重组肠激酶,切割蛋白使用量少,可不考虑除去。后续如需去除重组肠激酶,可用阴离子交换树脂(如DEAE-FF)对其进行洗脱。推荐洗脱条件如下:平衡缓冲液:25mMTris-HClpH8.0洗脱缓冲液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,可适当增加酶量,或适当延长酶切时间。常用的跨膜蛋白表达系统包括大肠杆菌表达系统、酵母表达系统、昆虫细胞表达系统和哺乳动物细胞表达系统等。Recombinant Human HVEM-Fc/TNFRSF14
IdeSProtease全称免疫球蛋白G降解酶(ImmunoglubulinG-degradingenzymeofStreptococcuspyogenes,IdeS),是由人类致病菌酿脓链球菌(Streptococcuspyogenes)产生并分泌至胞外的一种半胱氨酸水解酶。该蛋白酶具有极高的底物特异性,能识别IgG,在抗体下铰链区的特定位点进行酶切,使IgG水解为完整的F(ab’)2片段和Fc片段。IdeS可识别人源和其他多种动物来源的IgG,比如人、兔、猴、绵羊以及人动物嵌合IgG等。IdeS具有独特的底物选择性,可以作为工具酶应用于抗体类药物或抗体融合蛋白药物的结构表征分析。本产品利用大肠杆菌重组表达,纯度高,具有良好的酶切活性,是用于表征抗体、Fc融合蛋白和抗体-药物复合物的有价值的工具。产品信息规格2000U/5000U产品性质中文别名(Chinesesynonym)免疫球蛋白G降解酶英文别名(Englishsynonym)IdeSProtease来源(Source)大肠杆菌表达标签(label)N-terminalHisTag纯度(Purity)经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度>95%分子量(Molecularweight)35.3kDa缓冲液组分(Buffer)50mM磷酸钠,150mMNaCl(pH6.6),50%glycerolRecombinant Human FGF-17α-凝血酶的多面性质在其临床使用中提出了挑战,特别是在平衡其止血效果与血栓形成风险之间。
大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质,由于只需要简单的培养基和条件,因此费用低且方便。此外,除了无细胞表达,它是速度的系统,大肠杆菌倍增时间(约20min)比酵母(2h)、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说,在大肠杆菌中表达重组蛋白包括:1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌;2.培养细胞至对数生长期;3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后,相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的,以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类:E.coliRNA聚合酶转录的载体
BovineThrombin,HighSpecificActivity,>2000IU/mg牛凝血酶(高活力,>2000IU/mg)本品有效切割质量比1:2000,通常在未做过预实验的情况下建议在1:1000质量比进行体系的优化,即1mg的目的蛋白加入2U的酶(2000U/mg),使用时可用生理盐水将酶配成100U/mL,有效消化缓冲液:20mMTris-HCl,含150mMNaCl,pH8.0。在20℃-37℃切割0.3-16h。注意:①具体反应温度可根据融合蛋白的性质而定,如需要低温保存的蛋白,可在4℃切割24h。②因为凝血酶会吸附在玻璃上,建议用塑料管分装冻存(-20℃)凝血酶溶液。注意事项1.此冻干产品稳定性好,2~8℃条件下保存3年,酶活力未有变化。室温条件下保存1年,酶活力未有变化。2.本产品作科研用途。3.为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。C5AR与其配体C5a结合后,可以激发多种免疫细胞,促进炎症反应和细胞趋化。
生物医学应用止血和血栓形成研究牛纤维蛋白原用于研究以理解止血和血栓形成的机制。它作为研究可溶性纤维蛋白原转化为不溶性纤维蛋白及其与血小板和其他凝血因子相互作用的模型。组织工程在组织工程领域,由于纤维蛋白原能够在凝固时形成稳定的网状结构,因此被用来创建细胞生长的支架。这一特性使其成为伤口愈合和组织再生应用的理想候选物。药物开发纤维蛋白原与各种药物和化合物的相互作用是研究的一个课题。例如,研究其与某些药物的结合可以帮助我们理解药物在分子水平上的运输和代谢过程,这对药物开发至关重要。诊断学纤维蛋白原还用于开发各种疾病的诊断试验,其中纤维蛋白原的异常水平可以表明炎症、损伤或其他病理条件。结论牛纤维蛋白原是一个多面的手分子,在研究和临床应用中具有重要作用。它的结构复杂性和功能性重要性使其成为持续研究的宝贵主题。随着提取和纯化方法的不断改进,其在医学和生物技术领域的实用性也将不断提高。跨膜蛋白的表达与制备需要采用合适的表达载体、宿主细胞、培养条件和纯化工艺等方法,优化表达和纯化过程。Recombinant Mouse CD79B Protein,His Tag
酵母重组表达N-糖苷酶F,是一种利用酵母作为宿主细胞,通过基因工程技术表达特定酶的过程。Recombinant Human HVEM-Fc/TNFRSF14
Trop-2,alsoknownasepithelialglycoprotein-1antigen(EGP-1),isaproteinthatinhumansisencodedbytheTACSTD2gene.Mutationsofthisgeneresultingelatinousdrop-likecornealdystrophy,anautosomalrecessivedisordercharacterizedbyseverecornealamyloidosisleadingtoblindness.产品性质别名EGP1;EGP-1;TROP2;GA733-1;gp50;T16;TACSTD2;TROP-2;M1S1;TACD2UniprotNo.P09758表达区间及表达系统RecombinantBiotinylatedHumanTROP-2/TACSTD2ProteinisexpressedfromHEK293cellswithHistagandAvitagattheC-terminal.ItcontainsHis27-Thr274.分子量TheproteinhasapredictedMWof30.5kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto46-55kDabasedonTris-BisPAGEresult.纯度>95%asdeterminedbySDS-PAGEandHPLC活性ELISAData:ImmobilizedAnti-TROP-2Antibody,hFcTagat0.5μg/mL(100μL/well)ontheplate.DoseresponsecurveforBiotinylatedHumanTROP-2,HisTagwiththeEC50of24.1ng/mLdeterminedbyELISA.0EUper1μgoftheproteinbytheLALmethod.制剂Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally5%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.Recombinant Human HVEM-Fc/TNFRSF14
磁珠法在基因克隆中的应用主要体现在以下几个方面:1.**质粒DNA的提取**:磁珠法可以用于从细菌细胞中提取质粒DNA,这对于质粒的克隆和表达至关重要。通过磁珠法提取的质粒DNA纯度高,适合用于后续的酶切、连接、转化等分子克隆步骤。2.**基因组DNA的提取**:磁珠法可以用于从各种生物样本中提取基因组DNA,这对于基因组的克隆和分析非常重要。提取的基因组DNA可以用于PCR扩增、基因表达分析、基因突变检测等。3.**mRNA的提取和纯化**:在mRNA克隆中,磁珠法可以用于提取和纯化mRNA,这对于cDNA的合成和基因表达分析非常关键。磁珠法提取的mRNA纯度高,可以用于后续的cDNA合成和...