3C样蛋白酶(3CLpro)或主要蛋白酶(Mpro),正式名称为C30内肽酶或3-胰凝乳蛋白酶样蛋白酶,[2]是在冠状病毒中发现的主要蛋白酶。它在11个保守位点切割冠状病毒多蛋白。它是一种半胱氨酸蛋白酶,是蛋白酶PA家族的成员。它在其活性位点具有半胱氨酸-组氨酸催化二联体并裂解Gln–(Ser/Ala/Gly)肽键。酶委员会将这个家族称为SARS冠状病毒主要蛋白酶(Mpro;EC3.4.22.69)。3CL蛋白酶对应于冠状病毒非结构蛋白5(nsp5)。通用名中的“3C”指的是3C蛋白酶(3Cpro),是一种在小核糖核酸病毒中发现的同源蛋白酶。3C样蛋白酶能够催化裂解P1位谷氨酰胺和P1'位小氨基酸(丝氨酸、丙氨酸或甘氨酸)之间的肽键。例如,SARS冠状病毒3CLpro可以自我切割以下肽:[3][4][5]TSAVLQ-SGFRK-NH2和SGVTFQ-GKFKK是对应于SARS3C样蛋白酶的两个自切割位点的两个肽该蛋白酶在冠状病毒复制酶多蛋白(P0C6U8)的加工过程中很重要。它是冠状病毒中的主要蛋白酶,对应于非结构蛋白5(nsp5)。[6]它在11个保守位点切割冠状病毒多蛋白。3CL蛋白酶在其活性位点具有半胱氨酸-组氨酸催化二元组。[4]半胱氨酸的硫作为亲核试剂,组氨酸的咪唑环作为一般碱基。重组人泛素是一种蛋白质,它是一种含有76个氨基酸的高度保守的蛋白质,存在于细胞核和细胞质中。Recombinant Cynomolgus CEACAM-5/CD66e Protein,His Tag
分子特性的重要性:牛凝血酶的高比活度和纯度使其成为科研中理想的工具酶,有助于提高实验的准确性和重复性。在医学研究中的应用:牛凝血酶在血液学研究、药物筛选和疾病模型构建中具有广泛的应用,对于理解血液凝固机制和开发新型抗凝血药物具有重要意义。安全性与稳定性:牛凝血酶的稳定性好,2~8℃条件下可保存3年,室温下可保存1年,且在生产过程中进行了病毒灭活处理,保证了科研使用的安全性。结论牛凝血酶(高活力,>2000 IU/mg)因其高效性和专一性,在生物医学研究中具有不可替代的作用。深入研究其分子特性和生物学功能,将有助于推动相关疾病的诊断。未来方向未来的研究可以集中在以下几个方面:牛凝血酶在新型抗凝血药物开发中的应用。牛凝血酶在疾病模型,特别是血栓性疾病研究中的应用。牛凝血酶作为分子生物学工具酶的进一步优化和改进。Smcy HY Peptide (738-746)在某些疾病中,特定蛋白质的泛素化水平可能发生变化,因此,泛素化蛋白质可以作为疾病的生物标志物。
CD19蛋白在B细胞和体液免疫反应中起着作用。成熟B细胞对抗原刺激、胚芽中心发育和抗体亲和性成熟的反应能力是必需的。CD19已成为血液学和实体的有前途的靶点。产品性质同义词CD19;B4;CVID3;Leu-12;MGC12802工会编号P15391来源生化重组人CD19蛋白表达于HK293细胞,标记于C-端。它含有金属1-Lys291。分子量重组cd19由283个氨基酸组成,预测分子质量为31.6kda。纯洁90%由社会发展秘书处----政策和两性平等局确定。内用Lal法测定每一种蛋白质。公式化用0.22腔形过滤液对PBS进行冻干。冻干前添加5%-8%海藻糖、甘露醇和0.01%TWEen80作为保护剂。重建离心管打开前。建议将其重组为100克/毫升以上的浓度。在蒸馏水中溶解冻干蛋白。
N-糖苷酶F(PNGaseF)酶活定义(UnitDefinition)1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。储存条件-15~-25℃保存,有效期1年。使用说明变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白(1-20μg),至终体积10μL;2)100℃温度下煮沸10min使其变性,冰上冷却,离心10秒;3)加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去离子水,总反应体积20μL;4)加入0.2~0.5μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。非变性条件下蛋白质去糖基化1)在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白(1-20μg)至体积为20μL。2)加入0.5~1μL的PNGaseF,轻轻混匀。3)37°C孵育4-24h。注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGaseF的量和延长孵育时间。使用全长A2AR蛋白进行药物筛选:全长A2AR蛋白可以用于ELISA、SPR亲和分析,以筛选和优化潜在的A2AR调节剂。
抑肽酶(Aprotinin),一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,广泛应用于生物技术领域。本研究探讨了利用大肠杆菌(E. coli)表达系统生产重组抑肽酶的方法,及其在科研和工业生产中的优势。引言抑肽酶,又称胰蛋白酶抑制剂,是一种小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等丝氨酸蛋白酶的活性。在生物制药、细胞培养和分子生物学研究中,抑肽酶的使用对于防止非特异性蛋白水解至关重要。传统的抑肽酶主要来源于动物,如牛肺,但存在外源病毒污染的风险。因此,利用大肠杆菌表达系统进行重组抑肽酶的生产,可以提供一种无动物源、高纯度、质量稳定的替代品。材料与方法基因克隆与表达载体构建:人源Ⅲ型胶原蛋白基因被克隆并构建到适合大肠杆菌表达的质粒载体中。大肠杆菌表达菌株的构建:通过转化,将构建好的质粒导入大肠杆菌宿主菌中,构建表达菌株。发酵培养:利用发酵罐进行大肠杆菌的扩大培养,以提升重组抑肽酶的产量。蛋白纯化:通过多次柱纯化获得高纯度的重组抑肽酶。人α-凝血酶,一种丝氨酸蛋白酶,是凝血级联反应中的中心酶,对止血和其他多种生理过程至关重要。Recombinant Human VSIG8 Protein,hFc Tag
随着年龄的增长,人体合成透明质酸的能力会逐渐下降,导致皮肤中透明质酸的含量降低。Recombinant Cynomolgus CEACAM-5/CD66e Protein,His Tag
大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质,由于只需要简单的培养基和条件,因此费用低且方便。此外,除了无细胞表达,它是速度的系统,大肠杆菌倍增时间(约20min)比酵母(2h)、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说,在大肠杆菌中表达重组蛋白包括:1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌;2.培养细胞至对数生长期;3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后,相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的,以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类:E.coliRNA聚合酶转录的载体Recombinant Cynomolgus CEACAM-5/CD66e Protein,His Tag
磁珠法在基因克隆中的应用主要体现在以下几个方面:1.**质粒DNA的提取**:磁珠法可以用于从细菌细胞中提取质粒DNA,这对于质粒的克隆和表达至关重要。通过磁珠法提取的质粒DNA纯度高,适合用于后续的酶切、连接、转化等分子克隆步骤。2.**基因组DNA的提取**:磁珠法可以用于从各种生物样本中提取基因组DNA,这对于基因组的克隆和分析非常重要。提取的基因组DNA可以用于PCR扩增、基因表达分析、基因突变检测等。3.**mRNA的提取和纯化**:在mRNA克隆中,磁珠法可以用于提取和纯化mRNA,这对于cDNA的合成和基因表达分析非常关键。磁珠法提取的mRNA纯度高,可以用于后续的cDNA合成和...