重组肠激酶(rEK)是一种高纯度的重组牛肠激酶轻链片段,氨基酸序列与牛肠激酶轻链一致,有着和天然提取的肠激酶同样特异的酶切位点,切割位点Asp-Asp-Asp-Asp-Lys,可去除位于蛋白N-末端的融合蛋白,以除去不需要的融合标签,同时重组肠激酶(rEK)具有比天然酶更高的切割活性。重组肠激酶为采用重组大肠杆菌分泌表达的高纯度、高活性、高特异的牛肠激酶,不含其他蛋白酶,可以在较宽pH范围(4.5-9.5)和较宽温度范围内有效切割融合蛋白,并且在各种去垢剂和变性剂存在的条件下仍具有部分活性。本品不含标签,由于具有极高酶切活性,酶切反应使用量少,不影响下游蛋白应用,可不考虑除去。产品信息规格100U/200U/500U/1000U/5000U产品性质来源(Source)大肠杆菌表达分子量(MolecularWeight)理论值25.85kDa外观(Appearance)澄清、无色至淡黄色液体酶浓度(EnzymeConcentration)≥5U/uL活性定义(ActivityDefinition)一个活性单位定义为25°C,12-16h,透明质酸由D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺组成的双糖单位构成,分子量可以从数千到数千万道尔顿不等。Recombinant Human CD117 Protein,hFc Tag
利用PCR技术扩增得到编码土豆羧肽酶抑制剂(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato,CPI)活性多肽基因,克隆于表达载体pGEX一4T一1的多克隆位点中,得到重组质粒pGCPI,测序后将重组质粒转化到受体茵EscherichiacoliBL21中。重组茵经IPTG诱导表达,超声波破茵后,通过谷胱甘肽sepheroseFF亲和层析柱一步纯化得到融合蛋白,纯度大于97%。融合蛋白经凝血酶切割并分离除去谷胱甘肽一S一转移酶后得到纯度大于98%的重组CPI,ELISA鉴定产物具有免疫原性,体外检测表明其促进纤溶的生物功能与天然CPI无明显差异。Recombinant Cynomolgus MICA Protein,His Tag在某些疾病中,特定蛋白质的泛素化水平可能发生变化,因此,泛素化蛋白质可以作为疾病的生物标志物。
3C蛋白酶(3C Protease),也称为3Cpro或3C样蛋白酶(3CLpro),是一类在RNA病毒复制中发挥关键作用的酶。它们负责切割病毒的多聚蛋白前体,从而释放出成熟的病毒蛋白,这些蛋白对于病毒的复制和组装至关重要。3C蛋白酶在多种病毒中都有发现,包括冠状病毒、小RNA病毒等。结构与功能3C蛋白酶通常具有特定的酶切位点,能够识别并切割特定的氨基酸序列。例如,小RNA病毒科的3C蛋白酶识别位点为Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro,切割位点位于谷氨酰胺(Gln)和甘氨酸(Gly)之间,称为Q-G位点4。抗病毒药物开发3C蛋白酶因其在病毒生命周期中的关键作用,成为抗病毒药物开发的重要靶点。通过抑制3C蛋白酶的活性,可以有效阻断病毒的复制过程。例如,SARS-CoV-2(病毒)的3CLpro是抗冠状病毒药物的重要靶点,西湖大学胡奇团队等合作揭示了SARS-CoV-2 3CLpro潜在耐药机制,为解决潜在的耐药问题提供了重要信息3。耐药性研究随着3CLpro抑制剂的使用,其耐药问题也日益受到关注。研究表明,3CLpro的某些突变可能导致病毒对抑制剂产生耐药性。
SARS-CoV-2,whichcausestheglobalpandemiccoronavirusdisease2019(Covid-19),belongstoafamilyofvirusesknownascoronavirusesthatalsoincludeMERS‑CoVandSARS-CoV-1.Coronavirusesarecommonlycomprisedoffourstructuralproteins:Spikeprotein(S),Envelopeprotein(E),Membraneprotein(M)andNucleocapsidprotein(N).TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheSproteinishomotrimeric,witheach~180-kDamonomerconsistingoftwosubunits,S1andS2.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).BeforebindingtotheACE-2receptor,structuralanalysisoftheS1trimershowsthatonlyoneofthethreeRBDdomainsisinthe"up"conformation.Thisisanunstableandtransientstatethatpassesbetweentrimericsubunitsbutisneverthelessanexposedstatetobetargetedforneutralizingantibodytherapy.PolyclonalantibodiestotheRBDoftheSARS-CoV-2proteinhavebeenshowntoinhibitinteractionwiththeACE-2receptor,confirmingRBDasanattractivetargetforvaccinationsorantiviraltherapy.泛素是一种小分子蛋白,存在于真核生物中,它在细胞内起到调节蛋白质降解、信号转导、细胞周期控制。
标题:牛凝血酶(Bovine Thrombin)的高比活应用及其在生物医学研究中的重要性摘要牛凝血酶(Bovine Thrombin),一种高比活度的丝氨酸蛋白水解酶,具有>2000 IU/mg的特异性活性,广泛应用于生物医学研究和临床,本文综述了牛凝血酶的分子特性、在血液凝固中的作用机制以及其在科研和工业生产中的应用。引言牛凝血酶是从牛血浆中提取的酶,分子量为37KD,由两条肽链(31KD和6KD)通过二硫键组成。作为凝血过程中的关键酶,牛凝血酶催化纤维蛋白原(fibrinogen)水解,形成纤维蛋白单体,进而促进血凝块的形成。由于其高度的序列专一性和水解效率,牛凝血酶不仅在生理止血中发挥作用,也作为分子生物学研究中的工具酶。材料与方法产品性质分析:分析牛凝血酶的CAS号、分子量、比活度、外观和纯度等物理化学性质。运输和保存方法:评估牛凝血酶的运输条件和长期储存稳定性。使用方法:探讨牛凝血酶在不同实验条件下的溶解、复溶和消化条件。α-凝血酶不仅在凝血中起作用,还在细胞信号中发挥作用。它可以启动血小板并刺激炎症介质的产生。MARK Substrate
研究泛素-蛋白酶体途径:重组人泛素可用于研究泛素化修饰和蛋白降解过程。Recombinant Human CD117 Protein,hFc Tag
分子特性的重要性:牛凝血酶的高比活度和纯度使其成为科研中理想的工具酶,有助于提高实验的准确性和重复性。在医学研究中的应用:牛凝血酶在血液学研究、药物筛选和疾病模型构建中具有广泛的应用,对于理解血液凝固机制和开发新型抗凝血药物具有重要意义。安全性与稳定性:牛凝血酶的稳定性好,2~8℃条件下可保存3年,室温下可保存1年,且在生产过程中进行了病毒灭活处理,保证了科研使用的安全性。结论牛凝血酶(高活力,>2000 IU/mg)因其高效性和专一性,在生物医学研究中具有不可替代的作用。深入研究其分子特性和生物学功能,将有助于推动相关疾病的诊断。未来方向未来的研究可以集中在以下几个方面:牛凝血酶在新型抗凝血药物开发中的应用。牛凝血酶在疾病模型,特别是血栓性疾病研究中的应用。牛凝血酶作为分子生物学工具酶的进一步优化和改进。Recombinant Human CD117 Protein,hFc Tag
磁珠法在基因克隆中的应用主要体现在以下几个方面:1.**质粒DNA的提取**:磁珠法可以用于从细菌细胞中提取质粒DNA,这对于质粒的克隆和表达至关重要。通过磁珠法提取的质粒DNA纯度高,适合用于后续的酶切、连接、转化等分子克隆步骤。2.**基因组DNA的提取**:磁珠法可以用于从各种生物样本中提取基因组DNA,这对于基因组的克隆和分析非常重要。提取的基因组DNA可以用于PCR扩增、基因表达分析、基因突变检测等。3.**mRNA的提取和纯化**:在mRNA克隆中,磁珠法可以用于提取和纯化mRNA,这对于cDNA的合成和基因表达分析非常关键。磁珠法提取的mRNA纯度高,可以用于后续的cDNA合成和...