Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque EpCAM/TROP1 Protein

Endo H糖苷内切酶H：结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H（Endo H）是一种专门切割N-连接糖链的内切酶，用于糖生物学和蛋白质工程领域。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制、以及其在研究和临床应用中的潜力。引言N-连接糖基化是一种在真核细胞中普遍存在的蛋白质修饰方式，涉及将糖链添加到蛋白质的天冬酰胺残基上。Endo H作为一种内切酶，能够特异性地识别并切割N-连接糖链中的β-N-乙酰葡糖胺苷键，从而在蛋白质工程和生物制药中发挥重要作用。Endo H的结构特性Endo H通常来源于流感嗜血杆菌（Hemophilus influenzae），其分子质量约为50 kDa。该酶由两个结构域组成：一个负责识别糖链的催化结构域和一个有助于酶稳定性的非催化结构域。催化机制Endo H的催化机制涉及对N-连接糖链的特异性识别和切割。酶的活性位点含有多个氨基酸残基，这些残基与糖链的特定结构相互作用，导致酶对底物的高特异性。Endo H催化的糖苷键断裂是一水解反应，需要水分子的参与。泛素蛋白（Ubiquitin，简称Ub）是一种在真核细胞中普遍存在的小分子蛋白，具有高度保守性。Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque EpCAM/TROP1 Protein

AngiotensinIConvertingEnzyme(ACE-2),alsocalledACEH(ACEhomologue),isadimeric,zinc-dependentmetalloproteaseoftheACEfamilythatalsoincludessomaticandgerminalACE.ACE-2mRNAisfoundathighlevelsinheart,testis,andkidneyandatlowerlevelsinawidevarietyoftissues.ACE-2istheSARS-CoVandSARS-CoV2Spikeproteinreceptorinvivo,functionscatalyticallyasacarboxypeptidasetocleaveseveralsubstratesincludingangiotensinsIandII,andactsasapartnerforB0AT1-familyaminoacidtransporters.Throughthesefunctions,ACE-2hasbeenshowntobeinvolvedinseveraldiseasesincludingSARS,COVID19,acutelunginjury,heartdisease,liverandlungfibrosis,inflammatorylungdisease,andcardiopulmonarydisease.FulllengthACE-2proteinincludesanextracellularregioncomposedofasingleN-terminalpeptidasedomainandC-terminalcollectrin-likedomain(CLD),atransmembranedomain,andashortcytoplasmictail.TheN-terminalpeptidaseregionisrequiredforbindingtoSARS-CoVandSARS-CoV2spikeproteins,whiletheCLDcontainsaregionthatpromotesdimerizationandassociationwithaminoacidtransporters.Recombinant Human AREG Protein,hFc Tag透明质酸的生产可以通过动物组织提取、微生物发酵或化学合成等方法进行。

利用PCR技术扩增得到编码土豆羧肽酶抑制剂(carboxypeptidaseinhibitorfrompotato，CPI)活性多肽基因，克隆于表达载体pGEX一4T一1的多克隆位点中，得到重组质粒pGCPI，测序后将重组质粒转化到受体茵EscherichiacoliBL21中。重组茵经IPTG诱导表达，超声波破茵后，通过谷胱甘肽sepheroseFF亲和层析柱一步纯化得到融合蛋白，纯度大于97％。融合蛋白经凝血酶切割并分离除去谷胱甘肽一S一转移酶后得到纯度大于98％的重组CPI，ELISA鉴定产物具有免疫原性，体外检测表明其促进纤溶的生物功能与天然CPI无明显差异。

3C蛋白酶是切割小RNA病毒科非结构蛋白的关键酶，在病毒复制过程中发挥着重要作用。鼻病毒属于小RNA病毒科，其中的人鼻病毒3C蛋白酶基因编码区全长552bp，编码的蛋白质相对分子质量约为22000Da。人鼻病毒3C蛋白酶具有高度的酶切特异性，能特异切割位于Gln-Gly之间的肽键，识别位点为Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro。本公司将人鼻病毒3C蛋白酶的编码区基因，在大肠杆菌中进行重组表达，纯化后获得了高纯度的重组3C蛋白酶，该蛋白酶能特异切割含有3C酶切位点的融合蛋白，具有良好的生物学活性。同时，本公司生产的3C蛋白酶带有GST和MAT标签蛋白，有利于后期将其从酶切体系中去除。产品性质:中文别名（Chinesesynonym）:3C蛋白酶英文别名（Englishsynonym）:3CProtease来源（Source）:大肠杆菌表达标签（label）:GST-3CProtease-MAT纯度（Purity）:经SDS-PAGE及HPLC分析，纯度>95%分子量（Molecularweight）:47.38kDa比活性（Specificactivity）:500U/ml缓冲液组分（Buffer）:50mMTris-HCl，150mMNaCl，1mMEDTA，1mMDTT，pH7.0酶活定义（UnitDefinition）:在缓冲液中切割100μg被检测的融合蛋白，反应条件为4℃16小时,切割率≥90%运输和保存方法:干冰运输；保存于-20℃。泛素化是一个可逆的过程，存在去泛素化酶可以去除泛素分子，从而调节泛素化的水平和功能。

糖苷内切酶H是一种重组糖苷酶，能够对N-糖蛋白中的高甘露糖和某些杂合型寡聚糖的壳二糖结构进行切割，去除糖蛋白中的N-连接高甘露糖。糖苷内切酶H克隆自褶皱链霉菌（Streptomycesplicatus）。并在酵母中重组表达。本产品带his标签，常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。另外，我司还提供其他类型的糖苷酶，包括糖苷内切酶S（Cat#20413ES），酵母重组表达的N-糖苷酶F（比活性：750000U/mL），酵母重组表达的N-糖苷酶F（比活性：100000U/mL）。储存条件-15~-25℃保存，有效期1年。使用说明变性条件下蛋白质去糖基化1）在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白（1-20μg），至终体积10μL；2）100℃温度下煮沸10min使其变性，冰上冷却，离心10秒；3）加入2μL的Buffer2，8μL去离子水，总反应体积20μL；4）加入1-2μL的EndoH，轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。5）65℃下热失活10分钟。非变性条件下蛋白质去糖基化1）在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白（1-20μg）至终体积为20μL。2）加入2~5μL的EndoH,轻轻混匀。3）37°C孵育4-24h。注意：在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化，在非变性条件下可能需要增加EndoH的量和延长孵育时间。泛素化是一种蛋白质翻译后修饰过程，涉及将泛素分子共价结合到靶蛋白上。这个过程由一系列酶促反应组成。Recombinant Mouse IGFBP-3R Protein,hFc Tag

α-凝血酶在肝脏中作为非活性前体-凝血酶原合成，在凝血级联反应中被启用，这种活性酶由285个氨基酸组成。Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque EpCAM/TROP1 Protein

胶原蛋白是哺乳动物体内含量多的功能性蛋白[1]。胶原蛋白由3条α链的多肽链亚基组成，α链自身构型为左手螺旋，三条α链又互相缠绕成右手螺旋结构，即胶原蛋白的“胶原域”[2]。胶原蛋白的一级结构分析结果显示，其肽链由(Gly-X-Y)n组成，其中X通常是脯氨酸，Y通常是羟脯氨酸[3]。按照胶原蛋白发现的先后顺序，可将其分为Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型等28种胶原蛋白[4]，Ⅰ型胶原蛋白分子组成为[α1(Ⅰ)]2α2(Ⅰ)，主要分布于骨骼中[5]；Ⅱ型胶原蛋白由[α1(Ⅱ)]3组成，主要由软骨细胞产生，因其含有大量赖氨酸残基，因而糖基化率较高[6]；Ⅲ型胶原蛋白分子组成为[α1(Ⅲ)]3，因含半胱氨酸所以肽链间形成二硫键，因此其本身就可形成细纤维，Ⅲ型胶原蛋白血管中含量较高，主要存在于肺泡间质中且分布杂乱，因而形成复杂的网状结构，正是这种结构使得肺组织具有良好的柔韧性与弹性，并且可以为细胞提供充足养分，使得皮肤饱满透亮[7]。Recombinant Cynomolgus/Rhesus macaque EpCAM/TROP1 Protein