Cas9核酸酶是一种向导RNA(guideRNA,gRNA)引导的核酸内切酶,可催化双链DNA的裂解。NLS-Cas9-EGFP在Cas9核酸酶的基础上进行改造,它在N端包含一个核定位信号(NLS),在C端包含一个EGFP和一个6X(His)序列。当Cas9以NLS序列表达时,Cas9RNP复合物在进入细胞后立即定位到细胞核。不需要体内转录或翻译,提高了效率。此外,与其他系统相比,EGFP标签可作为追踪或分类转染细胞的报告器,通过荧光细胞分选(FACS)富集所需基因组编辑的细胞群。它降低了在基因组编辑应用中与单细胞克隆和基因分型相关的人工和成本。产品特点如下:无DNA:没有外部DNA添加;高切割效率:NLS确保Cas9蛋白高效进入细胞核;低脱靶效应:Cas9核酸酶的瞬时表达提高了切割的特异性;节省时间:无需转录和翻译;减少劳动力:通过基于EGFP的FACS富集细胞群以进行所需的基因组编辑。C端His标签增加了融合蛋白检测方法的选择。可应用于:通过体外DNA切割筛选高效和特异性靶向gRNA。通过电穿孔或注射与特定gRNA结合时的体内基因编辑。通过基于EGFP的FACS富集细胞群以进行所需的基因组编辑。储存条件-25~-15℃保存,有效期1年。人α-凝血酶,一种丝氨酸蛋白酶,是凝血级联反应中的中心酶,对止血和其他多种生理过程至关重要。Recombinant Mouse EREG Protein,hFc Tag
ERBB3,又称HH3(人表皮生长因子受体3),是一种I型膜糖蛋白,是酪氨酸激酶受体ERBC家族的成员。ERBP家族成员作为表皮生长因子(LU)家族的生长因子的受体。在ERBP家庭成员中,因为它含有一个缺陷的激酶域。ERBB3在角化细胞、黑色素细胞、骨骼肌细胞、成肌细胞和雪旺细胞中都有表达。单体ERbb3是一种低亲和性的受体。ERBB3与ERBB2的异聚反应形成高亲和性受体复合物。与此相反,ERBB3同向聚合或异向聚合形成了一个低亲和性的结合物。因为ERBB3含有一个有缺陷的激酶域,ERBB2的激酶域负责通过异二重瓣受体启动酪氨酸磷酸化信号。研究发现,ERBB3细胞质区内的三个离散氨基酸信号对ERBB2的转导至关重要。ERBB3的细胞质域也包含6个一致的结合主题,用于调节P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2领域,以及一个丰富的一致的结合主题。ERBB3的细胞质域也包含6个一致的结合主题,用于调节P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2领域,以及一个丰富的一致的结合主题。ERBB3的细胞质域也包含6个一致的结合主题,用于调节P85磷酸酶3激酶(PI3K)的HS2领域,以及一个丰富的一致的结合主题。表达区间及表达系统重组的人HR3/ERBB3蛋白表达自于C-端的HK293细胞和AVI标记。里面有血清20-Thr643。分子量大约71.6Recombinant Human LGR6 Protein-VLP重组型TEV蛋白酶(rTEV)是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶,保持天然TEV酶的功能活性。
Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门切割N-连接糖链的内切酶,用于糖生物学和蛋白质工程领域。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制、以及其在研究和临床应用中的潜力。引言N-连接糖基化是一种在真核细胞中普遍存在的蛋白质修饰方式,涉及将糖链添加到蛋白质的天冬酰胺残基上。Endo H作为一种内切酶,能够特异性地识别并切割N-连接糖链中的β-N-乙酰葡糖胺苷键,从而在蛋白质工程和生物制药中发挥重要作用。Endo H的结构特性Endo H通常来源于流感嗜血杆菌(Hemophilus influenzae),其分子质量约为50 kDa。该酶由两个结构域组成:一个负责识别糖链的催化结构域和一个有助于酶稳定性的非催化结构域。催化机制Endo H的催化机制涉及对N-连接糖链的特异性识别和切割。酶的活性位点含有多个氨基酸残基,这些残基与糖链的特定结构相互作用,导致酶对底物的高特异性。Endo H催化的糖苷键断裂是一水解反应,需要水分子的参与。
IdeSProtease全称免疫球蛋白G降解酶(ImmunoglubulinG-degradingenzymeofStreptococcuspyogenes,IdeS),是由人类致病菌酿脓链球菌(Streptococcuspyogenes)产生并分泌至胞外的一种半胱氨酸水解酶。该蛋白酶具有极高的底物特异性,能识别IgG,在抗体下铰链区的特定位点进行酶切,使IgG水解为完整的F(ab’)2片段和Fc片段。IdeS可识别人源和其他多种动物来源的IgG,比如人、兔、猴、绵羊以及人动物嵌合IgG等。IdeS具有独特的底物选择性,可以作为工具酶应用于抗体类药物或抗体融合蛋白药物的结构表征分析。本产品利用大肠杆菌重组表达,纯度高,具有良好的酶切活性,是用于表征抗体、Fc融合蛋白和抗体-药物复合物的有价值的工具。产品信息规格2000U/5000U产品性质中文别名(Chinesesynonym)免疫球蛋白G降解酶英文别名(Englishsynonym)IdeSProtease来源(Source)大肠杆菌表达标签(label)N-terminalHisTag纯度(Purity)经SDS-PAGE及HPLC分析,纯度>95%分子量(Molecularweight)35.3kDa缓冲液组分(Buffer)50mM磷酸钠,150mMNaCl(pH6.6),50%glycerol(FGF-21)是FGF基因家族的成员。 基于其结构,FGF-21与FGF-19和-23一起进一步分为FGF的亚家族。
3C蛋白酶(3C Protease),也称为3Cpro或3C样蛋白酶(3CLpro),是一类在RNA病毒复制中发挥关键作用的酶。它们负责切割病毒的多聚蛋白前体,从而释放出成熟的病毒蛋白,这些蛋白对于病毒的复制和组装至关重要。3C蛋白酶在多种病毒中都有发现,包括冠状病毒、小RNA病毒等。结构与功能3C蛋白酶通常具有特定的酶切位点,能够识别并切割特定的氨基酸序列。例如,小RNA病毒科的3C蛋白酶识别位点为Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro,切割位点位于谷氨酰胺(Gln)和甘氨酸(Gly)之间,称为Q-G位点4。抗病毒药物开发3C蛋白酶因其在病毒生命周期中的关键作用,成为抗病毒药物开发的重要靶点。通过抑制3C蛋白酶的活性,可以有效阻断病毒的复制过程。例如,SARS-CoV-2(病毒)的3CLpro是抗冠状病毒药物的重要靶点,西湖大学胡奇团队等合作揭示了SARS-CoV-2 3CLpro潜在耐药机制,为解决潜在的耐药问题提供了重要信息3。耐药性研究随着3CLpro抑制剂的使用,其耐药问题也日益受到关注。研究表明,3CLpro的某些突变可能导致病毒对抑制剂产生耐药性。双碱性内切酶又称为Kex2蛋白酶、YSCF蛋白酶,在酵母体内Kex2蛋白酶负责加工killer toxin和α-factor的前体。C3a (70-77)
α-凝血酶(α-Thrombin)是一种高度特异性的丝氨酸蛋白酶,由凝血酶原经蛋白水解活化而来。Recombinant Mouse EREG Protein,hFc Tag
抑肽酶(Aprotinin),一种丝氨酸蛋白酶抑制剂,广泛应用于生物技术领域。本研究探讨了利用大肠杆菌(E. coli)表达系统生产重组抑肽酶的方法,及其在科研和工业生产中的优势。引言抑肽酶,又称胰蛋白酶抑制剂,是一种小分子蛋白,能有效抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶等丝氨酸蛋白酶的活性。在生物制药、细胞培养和分子生物学研究中,抑肽酶的使用对于防止非特异性蛋白水解至关重要。传统的抑肽酶主要来源于动物,如牛肺,但存在外源病毒污染的风险。因此,利用大肠杆菌表达系统进行重组抑肽酶的生产,可以提供一种无动物源、高纯度、质量稳定的替代品。材料与方法基因克隆与表达载体构建:人源Ⅲ型胶原蛋白基因被克隆并构建到适合大肠杆菌表达的质粒载体中。大肠杆菌表达菌株的构建:通过转化,将构建好的质粒导入大肠杆菌宿主菌中,构建表达菌株。发酵培养:利用发酵罐进行大肠杆菌的扩大培养,以提升重组抑肽酶的产量。蛋白纯化:通过多次柱纯化获得高纯度的重组抑肽酶。Recombinant Mouse EREG Protein,hFc Tag
磁珠法在基因克隆中的应用主要体现在以下几个方面:1.**质粒DNA的提取**:磁珠法可以用于从细菌细胞中提取质粒DNA,这对于质粒的克隆和表达至关重要。通过磁珠法提取的质粒DNA纯度高,适合用于后续的酶切、连接、转化等分子克隆步骤。2.**基因组DNA的提取**:磁珠法可以用于从各种生物样本中提取基因组DNA,这对于基因组的克隆和分析非常重要。提取的基因组DNA可以用于PCR扩增、基因表达分析、基因突变检测等。3.**mRNA的提取和纯化**:在mRNA克隆中,磁珠法可以用于提取和纯化mRNA,这对于cDNA的合成和基因表达分析非常关键。磁珠法提取的mRNA纯度高,可以用于后续的cDNA合成和...