Coronavirusesarecommonlycomprisedoffourstructuralproteins:Spikeprotein(S),Envelopeprotein(E),Membraneprotein(M)andNucleocapsidprotein(N).TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheSproteinishomotrimeric,witheach~180-kDamonomerconsistingoftwosubunits,S1andS2.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).产品性质别名SproteinRBD;SglycoproteinRBD;SpikeproteinRBDAccessionQHD43416.1表达区间及表达系统RecombinantSARS-CoV-2SpikeRBD(OmicronBA.4/BA.5/BA.5.1.3/BA.5.2)ProteinisexpressedfromExpi293withHistagattheC-terminal.ItcontainsArg319-Phe541(G339D,S371F,S373P,S375F,T376A,D405N,R408S,K417N,N440K,L452R,S477N,T478K,E484A,F486V,Q498R,N501Y,Y505H).透明质酸酶,英文名称Hyaluronidase,一类能够降低体内透明质酸活性的酶的总称,结构上由4个相同亚基构成。C-telopeptide
糖苷酶F(PNGaseF)酶活定义(UnitDefinition)1个酶活力单位指在10μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10μg变性RNaseB中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。储存条件-25~-15℃保存,有效期1年。使用方法1、变性条件下蛋白质去糖基化:1)在水中加入1μLBuffer1和目标糖蛋白(1-20μg),至终体积10μL;2)100℃温度下煮沸10min使其变性,冰上冷却,离心10秒;加入2μL的Buffer2、2μL的10%NP-40、6μL去离子水,总反应体积20μL;加入1-2μL的PNGase,轻轻混匀。在37℃孵育1-3h。2、非变性条件下蛋白质去糖基化:1)在水中加入2μL的Buffer2和目标糖蛋白(1-20μg)至体积为20μL。2)加入2~5μL的PNGaseF,轻轻混匀。3)37°C孵育4-24h。注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGaseF的量和延长孵育时间。注意事项1.PNGaseF建议搭配我司提供的配套缓冲液使用,按我司说明书建议的操作量配套缓冲液足够。如您由于使用体系造成配套缓冲液不足,可咨询当地销售进行购买Recombinant Human XPNPEP2 Protein,His Tag成纤维细胞生长因子18(FGF-18)是20 kDa蛋白,在骨骼发育和骨稳态中起着重要作用。
3C蛋白酶(3C Protease),也称为3Cpro或3C样蛋白酶(3CLpro),是一类在RNA病毒复制中发挥关键作用的酶。它们负责切割病毒的多聚蛋白前体,从而释放出成熟的病毒蛋白,这些蛋白对于病毒的复制和组装至关重要。3C蛋白酶在多种病毒中都有发现,包括冠状病毒、小RNA病毒等。结构与功能3C蛋白酶通常具有特定的酶切位点,能够识别并切割特定的氨基酸序列。例如,小RNA病毒科的3C蛋白酶识别位点为Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln↓Gly-Pro,切割位点位于谷氨酰胺(Gln)和甘氨酸(Gly)之间,称为Q-G位点4。抗病毒药物开发3C蛋白酶因其在病毒生命周期中的关键作用,成为抗病毒药物开发的重要靶点。通过抑制3C蛋白酶的活性,可以有效阻断病毒的复制过程。例如,SARS-CoV-2(病毒)的3CLpro是抗冠状病毒药物的重要靶点,西湖大学胡奇团队等合作揭示了SARS-CoV-2 3CLpro潜在耐药机制,为解决潜在的耐药问题提供了重要信息3。耐药性研究随着3CLpro抑制剂的使用,其耐药问题也日益受到关注。研究表明,3CLpro的某些突变可能导致病毒对抑制剂产生耐药性。
基因工程与抗体技术通过基因工程方法,可以构建重组3C蛋白酶,并利用其切割特异性进行活性验证。此外,通过动物实验获得3C蛋白酶抗体,可以探索利用抗体技术抑制3C蛋白酶活性,进而达到抑制病毒复制的目的4。研究进展与挑战3C蛋白酶及其抑制剂的研究进展迅速,但仍面临挑战。例如,需要深入了解不同耐药突变对3CLpro自身活性的影响,以及不同抑制剂之间的交叉耐药风险。这些研究对于开发新的广谱抗病毒药物具有重要意义38。结论3C蛋白酶是一类在RNA病毒复制中发挥关键作用的酶,是抗病毒药物开发的重要靶点。深入研究3C蛋白酶的结构、功能以及耐药机制,对于开发有效的抗病毒药物和方法具有重要意义。随着科学技术的不断进步,3C蛋白酶的研究将为人类战胜病毒性疾病提供更多的科学依据策略。泛素化反应可以修饰蛋白质,调节蛋白质降解。泛素化还影响蛋白质体事件,如蛋白质定位、活性和功能。
大肠杆菌系统通常是小分子细胞质蛋白或结构域表达的宿主。用大肠杆菌生产蛋白质,由于只需要简单的培养基和条件,因此费用低且方便。此外,除了无细胞表达,它是速度的系统,大肠杆菌倍增时间(约20min)比酵母(2h)、昆虫细胞和哺乳动物细胞都快。一般来说,在大肠杆菌中表达重组蛋白包括:1.将一个编码目标蛋白的质粒导入宿主菌;2.培养细胞至对数生长期;3.诱导蛋白表达。选择合适的表达载体合适的宿主选定后,相应的有许多工程化克隆位点和用于驱动蛋白表达的非编码序列的载体可用。启动子通常是可诱导的,以在细胞生长到合适的密度前阻止目标蛋白表达。大部分载体还提供目标蛋白与一系列蛋白标签构建融合蛋白的选择。常用的大肠杆菌表达载体分为以下两大类:E.coliRNA聚合酶转录的载体透明质酸的生物相容性使其在生物材料领域具有潜在应用,如作为药物递送载体。Recombinant Ferret TNF alphaProtein,His Tag
重组型TEV蛋白酶(rTEV)是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶,保持天然TEV酶的功能活性。C-telopeptide
Enterokinase,Recombinant,ExpressedinE.coli大肠杆菌表达重组肠激酶(不带标签)注意事项1.本产品所讲述的缓冲体系需要自行配置。2.不建议37℃条件下酶切,可能会有非特异性酶切出现。3.在>200mM咪唑,或>200mMNaCl,或>5%甘油,酶切会受到影响。如果样品溶液中含有上述成分的一种或多种,为获得理想的酶切结果,请先将样品透析到25mMTris-HCl8.0缓冲液中,然后再进行酶切实验;若不方便透析,可将样品稀释到咪唑含量在100mM以下,NaCl浓度在50mM以下,甘油浓度小于5%以下进行酶切,酶的用量与蛋白比例不变;若干扰因素很多,且不便去除,需要适当增加酶量或延长酶切时间,有助于得到理想的酶切效果。4.磷酸盐对Enterokinase有很强的抑制作用,痕量的磷酸盐都会严重影响Enterokinase的活性,因此在酶切体系内不能存在磷酸盐。5.本品是具有高酶活力重组肠激酶,切割蛋白使用量少,可不考虑除去。后续如需去除重组肠激酶,可用阴离子交换树脂(如DEAE-FF)对其进行洗脱。推荐洗脱条件如下:平衡缓冲液:25mMTris-HClpH8.0洗脱缓冲液:25mMTris-HClpH8.0,含100mMNaCl6.蛋白酶切效果不好,可适当增加酶量,或适当延长酶切时间。C-telopeptide
磁珠法在基因克隆中的应用主要体现在以下几个方面:1.**质粒DNA的提取**:磁珠法可以用于从细菌细胞中提取质粒DNA,这对于质粒的克隆和表达至关重要。通过磁珠法提取的质粒DNA纯度高,适合用于后续的酶切、连接、转化等分子克隆步骤。2.**基因组DNA的提取**:磁珠法可以用于从各种生物样本中提取基因组DNA,这对于基因组的克隆和分析非常重要。提取的基因组DNA可以用于PCR扩增、基因表达分析、基因突变检测等。3.**mRNA的提取和纯化**:在mRNA克隆中,磁珠法可以用于提取和纯化mRNA,这对于cDNA的合成和基因表达分析非常关键。磁珠法提取的mRNA纯度高,可以用于后续的cDNA合成和...