Endo H糖苷内切酶H:结构、功能及其在糖生物学中的应用摘要Endo H糖苷内切酶H(Endo H)是一种专门作用于糖链的内切酶,对研究蛋白质糖基化修饰具有重要意义。本文将探讨Endo H的结构特性、催化机制以及在糖生物学研究中的应用。引言蛋白质糖基化是一种普遍存在的翻译后修饰,对蛋白质的结构、稳定性和功能发挥着关键作用。Endo H是一种能够特异性识别并切割高甘露糖型N-连接糖链的内切酶,广泛应用于蛋白质糖基化分析。Endo H的结构特性Endo H由菌Helix pomatia分泌,其分子量约为130 kDa。该酶具有一个催化中心,能够识别并切割特定的糖苷键。Endo H的三维结构尚未完全解析,但其氨基酸序列和某些关键催化残基已被确定。催化机制Endo H通过水解N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)与N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)之间的β-1,4糖苷键,从而释放高甘露糖型N-连接糖链。该过程不涉及辅因子,表明Endo H催化机制可能依赖于其活性位点的氨基酸残基。PreScission Protease是一种由人鼻病毒14型的3C蛋白酶(human rhinovirus)和GST组成的融合蛋白。Recombinant Mouse CXCL13/BCA-1 Protein,hFc Tag
CD30活性艾利莎数据:固定化抗CD30抗体,板上的氢氟碳化合物标记为0.5欧氏/毫升(100欧氏/井)。生物化人CD30的剂量反应曲线,以49ng/ml的EC50作为标记。艾丽莎数据:固定了人的CD30配体,他的标签在板上5g/ml(100ml/井)。用酶联免疫吸附法测定人CD30的剂量反应曲线,标记为27.1ng/ml的EC50。产品用Lal法测定每一种蛋白质。制剂在PBS(PPS)中用0.22离子过滤溶液冻干(PH7.4)。通常在冻干前添加5%海藻糖作为保护剂。复溶离心管打开前。建议重组到超过100克/毫升的浓度(冻干通常使用1毫克/毫升溶液)。在蒸馏水中溶解冻干蛋白。运输与保存方法冰袋运输。-20℃至-80℃保存,一年有效期。复溶后,-20至-80°C,在未开封状态下保存3-6个月。复溶后,2-8°C保存2-7天。建议使用时分装冻存,避免反复冻融。注意事项1.避免反复冻融。2.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。3.本产品作科研用途!产品数据Recombinant Mouse Siglec-15/CD33L3 Protein,His TagKex2不能识别和切割单一碱性氨基酸即精氨酸或赖氨酸的羧基端肽键。
AngiotensinIConvertingEnzyme(ACE-2),alsocalledACEH(ACEhomologue),isadimeric,zinc-dependentmetalloproteaseoftheACEfamilythatalsoincludessomaticandgerminalACE.ACE-2mRNAisfoundathighlevelsinheart,testis,andkidneyandatlowerlevelsinawidevarietyoftissues.ACE-2istheSARS-CoVandSARS-CoV2Spikeproteinreceptorinvivo,functionscatalyticallyasacarboxypeptidasetocleaveseveralsubstratesincludingangiotensinsIandII,andactsasapartnerforB0AT1-familyaminoacidtransporters.Throughthesefunctions,ACE-2hasbeenshowntobeinvolvedinseveraldiseasesincludingSARS,COVID19,acutelunginjury,heartdisease,liverandlungfibrosis,inflammatorylungdisease,andcardiopulmonarydisease.FulllengthACE-2proteinincludesanextracellularregioncomposedofasingleN-terminalpeptidasedomainandC-terminalcollectrin-likedomain(CLD),atransmembranedomain,andashortcytoplasmictail.TheN-terminalpeptidaseregionisrequiredforbindingtoSARS-CoVandSARS-CoV2spikeproteins,whiletheCLDcontainsaregionthatpromotesdimerizationandassociationwithaminoacidtransporters.
Coronavirusesarecommonlycomprisedoffourstructuralproteins:Spikeprotein(S),Envelopeprotein(E),Membraneprotein(M)andNucleocapsidprotein(N).TheSARS-CoV-2Sproteinisaglycoproteinthatmediatesmembranefusionandviralentry.TheSproteinishomotrimeric,witheach~180-kDamonomerconsistingoftwosubunits,S1andS2.TheRBDofSARS-CoV-2bindsametallopeptidase,angiotensin-convertingenzyme2(ACE-2).产品性质别名SproteinRBD;SglycoproteinRBD;SpikeproteinRBDAccessionQHD43416.1表达区间及表达系统RecombinantSARS-CoV-2SpikeRBD(OmicronBA.4/BA.5/BA.5.1.3/BA.5.2)ProteinisexpressedfromExpi293withHistagattheC-terminal.ItcontainsArg319-Phe541(G339D,S371F,S373P,S375F,T376A,D405N,R408S,K417N,N440K,L452R,S477N,T478K,E484A,F486V,Q498R,N501Y,Y505H).成纤维细胞生长因子18(FGF-18)是20 kDa蛋白,在骨骼发育和骨稳态中起着重要作用。
RecombinantBiotinylatedHumanAFP(HLA-A*02:03)Protein,His-AviTag性能参数表达区间及表达系统(Source)RecombinantBiotinylatedHumanAFP(HLA-A*02:03)ProteinisexpressedfromHEK293withHistagandAvitagattheC-terminal..ItcontainsGly25-Thr305(HLA-A*02:03),Ile21-Met119(B2M)andFMNKFIYEIpeptide.[Accession|AAA03604.1(HLA-A*02:03)&P61769(B2M)&FMNKFIYEI]分子量大小(MolecularWeight)TheproteinhasapredictedMWof50.70kDa.Duetoglycosylation,theproteinmigratesto53-60kDabasedonTris-BisPAGEresult.(Endotoxin)Lessthan1EUperμgbytheLALmethod.纯度(Purity)>95%asdeterminedby>95%asdeterminedbyHPLC制剂(Formulation)Lyophilizedfrom0.22μmfilteredsolutioninPBS(pH7.4).Normally8%trehaloseisaddedasprotectantbeforelyophilization.重构方法(Reconstitution)Centrifugetubesbeforeopening.Reconstitutingtoaconcentrationmorethan100μg/mlisrecommended.Dissolvethelyophilizedproteinindistilledwater.泛素化反应可以修饰蛋白质,调节蛋白质降解。泛素化还影响蛋白质体事件,如蛋白质定位、活性和功能。Recombinant Human B7-H4 Protein,His-Avi Tag
透明质酸以其独特的分子结构和理化性质在机体内发挥多种重要的生理功能,如润滑关节、调节血管壁的通透性。Recombinant Mouse CXCL13/BCA-1 Protein,hFc Tag
重组型TEV蛋白酶(rTEV)是经过基因工程改造和纯化后的重组蛋白酶,不仅保持天然TEV酶的功能活性,且在广谱的温度范围内表现出更强的稳定性和特异性。rTEV是一种用来切除融合蛋白上亲和标签的常用工具酶,具有很强的位点特异性,严格识别七氨基酸序列EXXYXQ↓(G/S),切割位点在谷氨酰胺和甘氨酸/丝氨酸之间。普遍应用的七氨基酸序列为:Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓-Gly。rTEV在pH7.0,30℃时可达活性,但在pH6.0-8.5和温度4-30℃范围内皆有活性(见表1),使得反应条件的选择可根据目的蛋白的情况而灵活变动。另外rTEV切割后也能利用其N端的6×His标签,通过Ni-NTA树脂去除,以达到纯化目的蛋白的目的。产品性质来源(Source)大肠杆菌外观(Appearance)无色透明液体比活力(SpecificActivity)5U/μL活性定义(UnitDefinition)在1×rTEVBuffer(50mMTris,pH8.0,0.1mMEDTA,1mMDTT)中,30℃反应1h,剪切>85%的3μg底物所需要的酶量定义为一个活性单位。纯化(Purification)Ni柱亲和纯化纯度(Purity)≥95%(bySDS-PAGE)产品组分运输与保存方法冰袋运输。Recombinant Mouse CXCL13/BCA-1 Protein,hFc Tag
磁珠法在基因克隆中的应用主要体现在以下几个方面:1.**质粒DNA的提取**:磁珠法可以用于从细菌细胞中提取质粒DNA,这对于质粒的克隆和表达至关重要。通过磁珠法提取的质粒DNA纯度高,适合用于后续的酶切、连接、转化等分子克隆步骤。2.**基因组DNA的提取**:磁珠法可以用于从各种生物样本中提取基因组DNA,这对于基因组的克隆和分析非常重要。提取的基因组DNA可以用于PCR扩增、基因表达分析、基因突变检测等。3.**mRNA的提取和纯化**:在mRNA克隆中,磁珠法可以用于提取和纯化mRNA,这对于cDNA的合成和基因表达分析非常关键。磁珠法提取的mRNA纯度高,可以用于后续的cDNA合成和...