另一方面,M.德尔布吕克小组从1938年起选择噬菌体为对象开始探索基因之谜。噬菌体***寄主后半小时内就复制出几百个同样的子代噬菌体颗粒,因此是研究生物体自我复制的理想材料。1941年G.W.比德尔和E.L.塔特姆提出了“一个基因,一个酶”学说(被誉为“分子生物学***大基石”),即基因的功能在于决定酶的结构,且一个基因*决定一个酶的结构。但在当时基因的本质并不清楚。1944年O.T.埃弗里等研究细菌中的转化现象,证明了DNA是遗传物质。到20世纪60年代中期,关于DNA自我复制和转录生成RNA的一般性质已基本清楚,基因的奥秘也随之而开始解开了。宝山区常见分子生物学货源充足
>C=O称为羰基(羰的字和音均由碳氧二字拼合而成)。细胞里含有羰基的化合物常见的有四种:羰基(酮基)在碳链中间的化合物称为酮;如果羰基在碳链末段的有两种形式,含-CHO的分子称为醛,含-COOH的称为羧酸(羧字是“羟基酸”的拼合);如果同时有2个羰基存在于苯环上称之为醌。醛、酮、羧酸、醌化合物在细胞里很常见,尤其是酮和羧酸,如**、β-酮丁酸(乙酰乙酸)、α-酮戊二酸、泛醌(辅酶Q)、磷酸吡哆醛等。羧基可解离产生氢离子而形成负电离子-COO-,因此,羧基是酸性基团。浦东新区耐热分子生物学均价遗传密码的阐明则揭示了生物体内遗传信息的贮存方式。
变性- 高压液相色谱分析变性- 高压液相色谱(denaturing high- performance liquid chromatography,DHPLC) 是利用DNA构型改变检测基因突变和遗传多态性的方法之一,其可以检测单核苷酸多态和可遗传的突变。实验主要过程包括PCR 扩增待测和正常DNA样品,将扩增产物变性后再复性,若存在突变,在这一复性过程中可形成异源双链。在部分变性条件下,高压液相色谱分析可以有效地区分由变异碱基与正常碱基形成的异源DNA双链和正常DNA双链。由于DHPLC 的分辨率可达到1bp/ kb,而且操作过程可以全部程序化、大规模化和自动化,使得实验时间**缩短,实验准确率提高,可作为大群体任何基因突变初筛的有力手段,比SSCP 有更多的优越性,具有广泛的应用前景,许多工作都已经证实了DHPLC的敏感性、有效性和准确性。
两个DNA分子可以在酶的催化下连接起来。因此,任何DNA的限制性片段都能插入到一个载体DNA分子中(通常是质粒DNA分子),这样,就形成了重组DNA分子,将重组DNA分子引入到合适的细胞群体中之后(常见为细菌),带有特定重组DNA分子的细胞可被挑选出来。这一过程称之为目的DNA片段的克隆。由此,我们可以制备出无限量的特定DNA分子。随着技术的发展,能够利用化学方法在机器上自动合成长度达100碱基的DNA寡聚核苷酸。因此,人们不仅能够制造出含有天然DNA的重组DNA分子,而且也能够将经过突变的或人工合成的DNA分子插入到载体分子中。随着结构分析技术的发展,1962年已有几千个蛋白质的化学结构和几百个蛋白质的立体结构得到了阐明。
DGGE 的成功有赖于双链DNA内部低温解链部分变性后迁移率的改变。但在相当于比较高Tm的变性剂浓度的位置,相应的DNA片段可能全部解链,使试验无法检出存在于高Tm DNA片段中的碱基替换。为了解决此问题,可以在一个PCR 引物的5 ' 端设计一段富含GC的尾巴,从而使PCR 扩增产物的一端富含GC 碱基对,保证了绝大多数DNA片段不会发生完全解链,在比较高变性剂浓度区域仍然可以分辨出部分解链的异源双链,这一改进使DGGE 的突变检出率接近100%,但DGGE 只能检测突变是否存在而不能确定突变的位置。研究蛋白质的结构与功能的关系是分子生物学研究的一个重要内容。宝山区常见分子生物学货源充足
如大肠杆菌乳糖操纵子上的操纵基因通过与阻遏蛋白的相互作用控制基因的开关。宝山区常见分子生物学货源充足
生物细胞分子是一种分子结构,每个生物细胞均是由这些重要的生物分子及水所构成。这些分子包含脱氧核糖核酸(DNA)、核糖核酸(RNA)、蛋白质、糖类及脂肪等。DNA 是负责遗传的主要分子,由 A、C、T、G 四种不同的单元依任意的顺序排列,例如一个有 10 个单元的 DNA 分子,会有 4 的 10 次方种不同的排列顺序,各种生物的遗传虽然均由 DNA 分子负责,由于排列顺序的差异,以致造成相互间极大的不同;RNA 是负责传递遗传讯息的分子,它将 DNA 的遗传密码携带出来,并负责将 DNA 所下达的遗传指令,合成相关的蛋白质。宝山区常见分子生物学货源充足
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