干粉培养基的组成:干粉培养基通常由基础草料、营养(或培养)成分、缓冲剂、指示剂、氨基酸、维生素和其他有机化合物等组成。具体成分的选择和比例取决于所需培养的微生物类型和生长条件。基础草料通常由各种蛋白质来源(如动物肌肉、黄豆、酵母等)组成,提供微生物生长所需的碳、氮、磷、硫、镁、铁等元素。营养(或培养)成分则包括转化碳源、氮源、磷酸盐、微量元素等,是培养基的主要能量源和合成原料。缓冲剂用于维持培养基的 pH 值稳定,适当的 pH 值对于微生物生长和代谢至关重要。指示剂常用于检测微生物在培养基中的生长和代谢情况,如酚红、溴蓝、氧化亚铁等。氨基酸和维生素等是微生物在生长过程中所需的营养物质,能够促进微生物的代谢和生长。干粉培养基的配方通常包括氨基酸、维生素、矿物质和葡萄糖等营养成分。胆盐乳糖培养基(BL)
需要特别注意的是,预装培养基的储存时间不能太长。虽然一般来说,预装培养基可以在 4℃ 到 8℃ 的环境下保存数个月的时间,但是长时间的储存也会导致培养基失去一定的活性和营养价值。因此,建议在使用预装培养基之前,应该先检查一下储存时间和储存条件是否符合要求,以保证实验结果的准确性和可靠性。预装培养基的储存温度和储存条件至关重要,在实验室工作中应该引起足够的重视。在使用预装培养基时,应当注意储存温度不能太高,要存放在干燥、阴凉、避光和密封的地方,同时也需要注意储存时间不能太长,以保证培养基的效果和实验结果的准确性。葡萄糖酵母浸粉蛋白胨培养基/GYP培养基LG培养基 SSM琼脂 平板计数琼脂(PCA)标准方法琼脂(SA) TAT肉汤基础 心浸液肉汤(Huntoon)HIB培养基。
干粉培养基的制备与使用:干粉培养基制备的关键是控制成分比例准确和混合均匀。首先按照制备配方精确称量所需成分,然后在无菌条件下将其混合均匀,并在高真空下冻干得到干粉培养基。在使用前,将所需量的干粉培养基加入无菌蒸馏水中,经过充分搅拌和加热灭菌后即可使用。干粉培养基的使用方法和液体培养基类似。首先将制备好的培养基倒入灭菌好的培养皿、试管、瓶子等容器中,然后接种微生物,放入恒温培养箱中进行培养。在培养过程中,不同微生物对于温度、氧气、CO2 等环境条件的要求是有所不同的,需要选择相应的恒温箱和合适的培养条件。
基础培养基:含有基础生长所需的基本营养成分,较常用的是肉浸液,俗称肉汤,主要成分含牛肉浸液和蛋白胨。基础培养基普遍用于细菌的增菌、检验,也是制备其他培养基的基础成分。营养培养基:在基础培养基中可加入葡萄糖、血液、生长因子等特殊成分,供营养要求较高的细菌和需要特殊生长因子的细菌生长。较常用的是血琼脂平板、巧克力血平板等。特殊培养基:包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基,除含营养成分外,还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势,如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型,由于胞内渗透压较高,故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。细胞类培养基则可分为无血清培养基和含血清培养基两类。
干粉培养基的保存和注意事项:干粉培养基的储存条件应保持干燥、防潮、防晒,并存放于阴凉干燥处,避免受到光线、温度、湿度等外界环境的影响。一旦开封,干粉培养基应立即密封并放回原包装中,以免受到环境中的污染和变质。在使用干粉培养基时,应注意其有效期和使用方法。有效期是指干粉培养基在储存条件下能够保持理想品质的时间,一般为 2 年至数年不等。在该期限内使用的干粉培养基能够保证培养实验的有效性和可重复性。同时,使用干粉培养基时应遵循无菌操作的原则,注意消毒、净化和防止污染,保证实验结果的准确和可靠。好氧菌需要富含氧气和富含葡萄糖的培养基,而厌氧菌则需要采用无氧培养技术。乙酰胺肉汤
无机盐类培养基包括霍普克因、潜水组分等,主要用于高盐菌的培养。胆盐乳糖培养基(BL)
影响预装培养基有效期的因素:预装培养基的有效期不是固定不变的,它受到多种因素的影响,如生产流程、储存环境等。以下是一些预装培养基配制和存储过程中可能影响有效期的因素。温度:因为温度的波动会导致预装培养基内的病原体、细菌和寄生虫数量的变化,从而影响培养基的有效性。时常保持其在4℃左右不变温度有助于更长时间的保质。光照:光照强度高会发生多种生化变化(相反的低光照也可能会影响),甚至会使预装培养基中的化学物质发生变化而影响其有效性。包装:预装培养基的包装也很重要,因为任何包装方法都无法完全阻止外来物质的输入。因此,在储存过程中,尽可能采取防止预装培养基受到污染的措施以确保有效期的准确性。胆盐乳糖培养基(BL)