培养基是指供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质,也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。一般培养基在受热、吸潮后,易被细菌污染或分解变质,因此一般培养基必须防潮、避光、阴凉处保存。对一些需严格灭菌的培养基(如组织培养基),较长时间的贮存,必须放在3-6℃的冰箱内。由于液体培养基不易长期保管,均改制成粉末。培养基还可以根据需要进行额外的修改和调整。嗜冷菌计数琼脂
细菌培养基之根瘤菌培养基:葡萄糖10g,磷酸氢二钾0.5g,碳酸钙3g,硫酸镁0.2g,酵母粉0.4琼脂20g,水1000ml,1%结晶紫溶液1ml。先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。放线菌培养基:(1)淀粉硝酸盐培养基(高氏一号培养基)可溶性淀粉2.0g,硝酸钾0.1g,磷酸氢二钾0.05g,氯化钠0.05g,硫酸镁0.05g,硫酸亚铁0.001g,琼脂2g,水100ml。先把淀粉放在烧杯里,用5ml水调成糊状后,倒入95ml水,搅匀后加入其他药品,使它溶解。在烧杯外做好记号,加热到煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水。调整pH值到7.2-7.4,分装后灭菌,备用。嗜冷菌计数琼脂大多数细菌都能在富含有机物的基质中繁殖生长,因此有机培养基是基本的培养基之一。
细菌培养基之面粉琼脂培养基:面粉60g,琼脂20g,水1000ml把面粉用水调成糊状,加水到500ml,放在文火上煮30分钟。另取500ml水,放入琼脂,加热煮沸到溶解后,把两液调匀,补充水分,调整pH值到7.4,分装,灭菌,备用。微藻培养基,BG-11培养基:NaNO3 1.5g,K2HPO4 ·3H2O0.04g,MgSO4·7H2O0.075g,CaCl2 ·2H2O0.036g Citric Acid (柠檬酸)0.006g,Ferric ammonium citrate(柠檬酸铁铵0.006g,EDTA (dinatrium-salt) 0.001g,Na2CO3 0.02g,A5 + Co solution * (A5溶液1000×)1ml Distilled Water (蒸馏水)919ml。
使用预装培养基前应该检查其有效期,确认其是否过期。如果装在容器中的培养基已经超过了其有效期,即使它看起来没有问题,也不能在实验中使用。因为过期的培养基可能会因为细菌、病毒等微生物侵入而变质,使得实验结果不准确或者完全失败。因此在使用前需要仔细检查有效期。使用预装培养基需要先检查容器的密封性,确认容器是否完好无损,是否密封良好。因为培养基是灵敏的生物制品,如果容器未密封良好,其中的培养基可能会受到外部污染,细菌、霉菌等微生物可能会侵入其中,导致实验结果不准确或失败。所以在使用前要检查容器完整性和密封性。在制备培养基时,要注意保持一定的 pH 值。
使用过的预装培养基必须被按照正确的程序处理和处置。这意味着必须将预装培养基放置在专门用于处理微生物培养垃圾的容器中。这些容器通常是极度防护的,以避免包含在培养基中的微生物穿透到周围的环境中。在放入容器之前,预装培养基建议以封闭方式分装,以避免可能包含在其中的微生物侵入周围环境中。此外,使用过的预装培养基应该如实记录,以便跟踪以确定实验过程中是否出现任何异常结果。在处理使用过的预装培养基时,必须严格遵守实验室的安全和卫生标准。这包括穿戴适当的防护服、口罩和手套等防护用品。建议逐层穿戴,从内到外,以确保较大限度地减少微生物的扩散。在处理过程中,必须避免任何可能导致污染或扩散微生物的行为。应定期清洗处理容器和其他设备,以确保卫生和安全标准较大化。按照固态和液态的分布方式,培养基也可分为固态和液态培养基。嗜冷菌计数琼脂
固体培养基包括琼脂或血琼脂,它们的主要作用是提供一个支撑基质以帮助细胞滋生。嗜冷菌计数琼脂
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