需要特别注意的是,预装培养基的储存时间不能太长。虽然一般来说,预装培养基可以在 4℃ 到 8℃ 的环境下保存数个月的时间,但是长时间的储存也会导致培养基失去一定的活性和营养价值。因此,建议在使用预装培养基之前,应该先检查一下储存时间和储存条件是否符合要求,以保证实验结果的准确性和可靠性。预装培养基的储存温度和储存条件至关重要,在实验室工作中应该引起足够的重视。在使用预装培养基时,应当注意储存温度不能太高,要存放在干燥、阴凉、避光和密封的地方,同时也需要注意储存时间不能太长,以保证培养基的效果和实验结果的准确性。常见的培养基类型包括诱导性培养基、不含某种特定营养成分的培养基和选择性培养基。厌氧基础琼脂
干粉培养基的制备与使用:干粉培养基制备的关键是控制成分比例准确和混合均匀。首先按照制备配方精确称量所需成分,然后在无菌条件下将其混合均匀,并在高真空下冻干得到干粉培养基。在使用前,将所需量的干粉培养基加入无菌蒸馏水中,经过充分搅拌和加热灭菌后即可使用。干粉培养基的使用方法和液体培养基类似。首先将制备好的培养基倒入灭菌好的培养皿、试管、瓶子等容器中,然后接种微生物,放入恒温培养箱中进行培养。在培养过程中,不同微生物对于温度、氧气、CO2 等环境条件的要求是有所不同的,需要选择相应的恒温箱和合适的培养条件。脂肪酸溶液孟德尔-韦伯利法可以计算培养基的可利用能量。
如何有效避免培养基污染?做好实验操作规则:在实验中制定好统一意识的操作规则至关重要。例如,制定有关实验前和实验中洗手、换鞋、穿戴实验服的规定。还要保证操作的环境卫生、实验材料消毒等等。这样可以降低实验环境中的细菌来源,保证实验材料的纯度,同时也可以提高操作人员的自觉性和流程规范性,然后避免因人为原因而产生的污染。做好培养基制作:在培养基的制作过程中,一些常见的问题往往会导致污染,例如:不干净的试管,不洁净的机器设备,不正确的过滤操作和培养基储存不当等。为了避免这些问题,实验室人员应该采用高标准的实验原料,在制作培养基前彻底清洗操作区,并使用无菌试管及机器设备,千万不要盲目省事不进行适当的实验准备和操作过程。
预装培养基主要由以下成分组成:碳水化合物:如葡萄糖、半乳糖等。这些为微生物提供能源,帮助它们进行代谢和生长。氮源:如胨、氨基酸等。氮是微生物制造细胞壁和核酸的重要营养成分之一,也是蛋白质的主要组成部分。磷酸盐:如二氢磷酸钠和三钠磷酸等。这些物质含有的磷是组成核酸的重要成分之一,还能促进细菌的生长。硫酸盐:如硫酸钠、硫酸镁等。这些物质主要是为了促进微生物生长所需的微量元素的吸收,如铁离子、镁离子等。镁盐:如氯化镁、硫酸镁等。镁离子是生物体内许多重要酶的活性离子,可以帮助微生物进行代谢反应,同时也是良好的缓冲体系的组成部分。选择培养基时,必须考虑具体微生物的生长条件。
在培养基中加人某种抑制剂和指示剂,抑制某些细菌生长,促进目的菌的繁殖,并使所生长的细菌菌落具有一定特征,以助鉴别挑选,这类培养基称为选择性鉴别培养基。如SS琼脂,在该培养基配方中含有乳糖(反应底物)、中性红和柠檬酸铁铵(指示剂)、灿烂绿及胆盐等(抑菌剂)。灿烂绿和胆盐等抑菌剂能抑制革兰氏阳性菌及部分大肠埃希菌的生长,而对沙门菌及志贺菌基本无影响,而且大肠埃希菌能发酵乳糖产酸,使菌落变红色,沙门菌和志贺菌不发酵乳糖,其菌落为无色。如细菌产生硫化氢,则与柠檬酸铁铵反应生成硫化亚铁沉淀,菌落中心呈黑色或褐色。以此达到鉴别的目的。大多数细菌都能在富含有机物的基质中繁殖生长,因此有机培养基是基本的培养基之一。三糖铁琼脂培养基(TSI) ChP
常用的富营养培养基包括麦康奈尔培养基和肉膏葡萄糖琼脂培养基。厌氧基础琼脂
培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不只不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。再如,在维生素发酵生产过程中,可以通过控制培养基中碳源与迟效氮(或碳)源之间的比例来控制菌体生长与维生素的合成协调。厌氧基础琼脂
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