天然培养基血清种类:目用于组织培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。选择用牛血清培养细胞的原因:来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。牛血清是细胞培养中用量比较大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质比较高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较少。培养基根据功能分为选择性培养基、区分性培养基、富集培养基等。营养琼脂
培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好,营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需,浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用,例如高浓度糖类物质、无机盐、重金属离子等不仅不能维持和促进微生物的生长,反而起到抑菌或杀菌作用。另外,培养基中各营养物质之间的浓度配比也直接影响微生物的生长繁殖和(或)代谢产物的形成和积累,其中碳氮比(C/N)的影响较大。严格地讲,碳氮比指培养基中碳元素与氮元素的物质的量比值,有时也指培养基中还原糖与粗蛋白之比。例如,在利用微生物发酵生产谷氨酸的过程中,培养基碳氮比为4/1时,菌体大量繁殖,谷氨酸积累少;当培养基碳氮比为3/1时,菌体繁殖受到抑制,谷氨酸产量则大量增加。 NGM培养基添加剂培养基种类繁多,根据需求选择适合的培养基对于成功的微生物培养至关重要。
在培养基中加人某种抑制剂和指示剂,抑制某些细菌生长,促进目的菌的繁殖,并使所生长的细菌菌落具有一定特征,以助鉴别挑选,这类培养基称为选择性鉴别培养基。如SS琼脂,在该培养基配方中含有乳糖(反应底物)、中性红和柠檬酸铁铵(指示剂)、灿烂绿及胆盐等(抑菌剂)。灿烂绿和胆盐等抑菌剂能抑制革兰氏阳性菌及部分大肠埃希菌的生长,而对沙门菌及志贺菌基本无影响,而且大肠埃希菌能发酵乳糖产酸,使菌落变红色,沙门菌和志贺菌不发酵乳糖,其菌落为无色。如细菌产生硫化氢,则与柠檬酸铁铵反应生成硫化亚铁沉淀,菌落中心呈黑色或褐色。以此达到鉴别的目的。
不同类型微生物生长对氧化还原电位(F)的要求不一样,一般好氧性微生物在F值为+0.1V以上时可正常生长,一般以+0.3—+0.4V为宜,厌氧性微生物只能在F值低于+0.1V条件下生长,兼性厌氧微生物在F值为+0.1V以上时进行好氧呼吸,在+0.1V以下时进行发酵。F值与氧分压和pH有关,也受某些微生物代谢产物的影响。在pH相对稳定的条件下,可通过增加通气量(如振荡培养、搅拌)提高培养基的氧分压,或加入氧化剂,从而增加F值;在培养基中加入抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等还原性物质可降低F值。如果细菌的生长受到限制,可以尝试调整培养基的成分或添加辅助物质,例如控制培养基中氧气的含量。
上海瑞楚生物科技有限公司小编介绍,厌氧菌培养基(anaerobic media) 供厌氧菌的分离、培养和鉴别用的培养基,称为厌氧菌培养基。由于厌氧菌自身缺乏有氧代谢所必需的各种酶,如细胞色素和细胞色素氧化酶、过氧化氢酶和过氧化物酶、超氧化歧化酶,所以造成自身代谢的缺陷,无法进行有氧代谢,而无氧酵解所产生的能量又不足,因此厌氧菌在正常的大气环境下不能生长和生存。为使厌氧菌能正常生长,必须制备营养成分丰富,氧化还原电势较低,具有特殊生长因子的专门用的培养基。在实际应用过程中,常常需要调整培养基的组成和配方,以优化细胞或微生物的生长和功能表现。平板计数琼脂(PCA) GB
Luria-Bertani 培养基是一种常用的细菌培养基,可用于大肠杆菌 E. coli 的培养。营养琼脂
细胞培养过程中,细胞培养基是不可或缺的,细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质,也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。通常细胞体外培养时需要加入血清,以维持细胞的生长和存活。而除了血清之外,部分细胞在培养过程中需要添加胰岛素和β-巯基乙醇(β-mercaptoethanol)等成分来维持细胞状态。MCF-7和NIH:OVCAR-3等细胞需要额外添加胰岛素,而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等细胞则需要添加β-巯基乙醇,不同细胞加入量会有差异,需根据细胞类型判断。营养琼脂
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