导致腹泻的大肠埃希菌根据血清型的不同,分为肠侵袭性大肠杆菌(EIEC)、肠致病性大肠杆菌(EPEC)、肠产毒性大肠杆菌(ETEC)、肠出血性大肠杆菌(EHEC)、肠集聚型大肠杆菌(EAEC)、产志贺毒的大肠杆菌(STEC,可引起出血性结肠炎和溶血尿毒综合征)等。大肠杆菌主要是侵袭力、内有害物质、肠有害物质等致病因素引起各种炎症,如胆囊炎、泌尿系传染、肺炎、新生儿脑膜炎、伤口传染、菌血症及腹泻等。大肠杆菌肠有害物质是引起腹泻的主要致病因子。内有害物质还可引起发热、休克、DIC等。金黄色葡萄球隶属于葡萄球菌属,可引起多种严重传染.有“嗜肉菌"的别称。抗微生物野野村氏菌菌种
通常铜绿假单胞杆菌温度太高,有时会得不到扩增产物;铜绿假单胞杆菌温度太低时,容易发生非特异性反应。另外,时间太短时,会得不到扩增产物或者会有一些短的非特异性产物优成。传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6摄氏度冰箱内保存。液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。Aurantimonas litoralis菌株铜绿假单胞菌在普通培养基上有着绿脓素与带荧光的水溶性荧光素等。
铜绿假单胞杆菌的模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55摄氏度左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。DNA模板-引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性、退火、延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩增的目的基因扩增放大几百万倍。另外,铜绿假单胞杆菌的斜面菌种和冻干菌种应在2-8摄氏度保存。铜绿假单胞杆菌应采用冻结保存管宜采用塑料冷冻保存管,使用玻璃安瓿。
铜绿假单胞杆菌的载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当普遍,寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内影响并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。冷冻保藏法可分低温冰箱(-20-30摄氏度,-50-80摄氏度)、干冰酒精快速冻结(约-70摄氏度)和液氮(-196摄氏度)等保藏法。冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70摄氏度左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。金黄色葡萄球可以供应冻干粉、甘油菌、斜面试管菌种、定量菌液、菌种涂布、菌种金属片。
大肠杆菌又称大肠埃希菌,革兰氏阴性短杆菌,隶属肠杆菌科,大小2.0-6.0um。有鞭毛,能运动,有菌毛,无芽孢,为需氧或兼性厌氧菌。大肠埃希菌抗原主要有O(菌体抗原)、K(表面抗原)、H抗原三种。大肠埃希菌为人类肠道内的正常菌群,正常情况下对人体不致病,当宿主抵抗力降低或细菌入侵肠外部位时,可成为条件致病菌而引起传染,如尿路传染、菌血症、败血症、伤口传染、肺炎、腹膜炎、阑尾炎、胆囊炎和脑膜炎等。大肠埃希菌某些血清型可致胃肠炎,与食入污染的食品和饮水有关,为肠外来源致肠内传染。菌株在人类肠道内具有重要的生理和代谢功能。杆孢篮状菌
金黄色葡萄球引起的食物中毒占食源性微生物食物中毒事件的25%左右。抗微生物野野村氏菌菌种
有些铜绿假单胞杆菌的保藏方法,如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害,保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。铜绿假单胞杆菌的多聚酶链式反应基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性、退火、延伸三个基本反应步骤构成模板DNA经加热至93摄氏度左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备。抗微生物野野村氏菌菌种
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