选择性培养基是指根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌样中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。酵母菌富集培养基:葡萄糖5%,尿素0.1%,硫化铵0.1%,磷酸二氢钾0.25%,磷酸氢二钠0.05%,七水合硫酸镁0.1%,七水合硫酸铁0.01%,酵母膏0.05%,孟加拉红0.003%,pH4.5。富集好氧自生固氮菌:甘露醇1%,磷酸二氢钾0.02%,七水合硫酸镁0.02%,氯化钠0.02%,二水合硫酸钙0.01%,碳酸钙0.5%自诱导SB肉汤培养基 2×YT琼脂 双倍乳糖蛋白胨培养液双料乳糖蛋白胨培养液 三倍乳糖蛋白胨培养液。胆汁液态培养基
按培养基的营养成分是否完全区分:1.基本培养基,亦称“较低限度培养基”。只能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基,称为基本培养基,是含有营养要求较低成分的合成培养基,常用“[-]”表示。这种培养基往往缺少某些生长因子,所以经过诱变过的营养缺陷型菌株不能生长。2.完全培养基,基础培养基添加血清等物质后,叫完全培养基,也叫(血清)细胞培养基。完全培养基可用来满足微生物的各种营养缺陷型菌株的生长需要,常以“[+]”表示。3.补充培养基,凡是只能满足相应的营养缺陷型生长需要的组合培养基,称为补充培养基,它是在基本培养基中加入该菌株不能合成的营养因子而组成的。根据在基本培养基中加入的是A或B等营养因子代谢物而分别用[A]或[B]等来表示。硫酸巴龙霉素溶液AB培养基基础 地杆菌培养基基础 硫还原泥土杆菌培养基基础 固氮菌琼脂(甘露醇) 固氮菌肉汤(甘露醇,葡萄糖)。
1951年厄尔开发了供动物细胞体外生长的人工合成培养基(MEM)。合成培养基的种类相当多。合成培养基成分已知,便于对实验条件的控制。但与天然培养基相比,有些天然的未知成分尚无法用已知的化学成分所替代,因此,细胞培养中使用的基础合成培养基还必须加入一定量的天然培养基成分,以克服合成培养基的不足。普遍的作法是加入小牛血清。动物血清成分复杂,各种生物大小分子混合在一起,有些成分至今尚未搞清楚。血清对细胞生长很有效,但后期对培养产物的分离、提纯以及检测造会成一定困难。另外高质量的动物血清来源有限,成本高,限制了它的大量使用。无血清培养基不加动物血清,在基础培养基中加入细胞生长有效因子等。
长时间高温还会引起磷酸盐、碳酸盐与某些阳离子(特别是钙、镁、铁离子)结合形成难溶性复合物而产生沉淀,因此,在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时,常需在培养基中加入少量螯合剂,避免培养基中产生沉淀,常用的螯合剂为乙二胺四乙酸(EDTA)。还可以将含钙、镁、铁等离子的成分与磷酸盐、碳酸盐分别进行灭菌,然后再混合,避免形成沉淀;高压蒸汽灭菌后,培养基pH会发生改变(一般使pH降低),可根据所培养微生物的要求,在培养基灭菌前后加以调整。THB培养基基础 BETA-SSA琼脂基础 轻唾杆菌肽琼脂(MSBA)基础 屎肠球菌选择性培养基。
培养基分类有哪些?营养缺陷型:野生型菌株经过人工诱变或者自然突变失去合成某种营养(氨基酸,维生素,核酸等)的能力,只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子才能生长,称为营养缺陷型(auxotroph)。营养缺陷型是一种生化突变株,它的出现是由基因突变引起的。遗传信息的载体是一系列为酶蛋白编码的核酸系列,如果核酸系列中某碱基发生突变,由该基因所控制的酶合成受阻,该菌株也因此不能合成某种营养因子,使正常代谢失去平衡。Elliker琼脂 RSMA培养基 脱脂乳培养基 改良番茄汁肉汤培养基 番茄汁琼脂MRS肉汤(不含葡萄糖)。结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA) GB/SN
头孢磺啶-氯苯酚-新生霉素(CIN)琼脂 尿素吲哚培养基 吡嗪酰胺酶检测酪蛋白大豆琼脂 木糖-明胶培养基。胆汁液态培养基
天然培养基血清种类:目用于组织培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。选择用牛血清培养细胞的原因:来源充足、制备技术成熟、经过长时间的应用考验人们对其有比较深入的理解。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。牛血清是细胞培养中用量比较大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,具有极为重要的功能。牛血清分为小牛血清、新牛血清、胎牛血清。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质比较高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分较少。胆汁液态培养基
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