大肠杆菌对于药物产生抗性的过程也就是遗传基因的表达过程、质粒是存在于细菌细胞内单独染色体之外的遗传物质,是共价闭合环状双螺旋DNA分子、携带有耐药性基因的质粒称为耐药性质粒,耐药性质粒根据能否通过接合作用进行传递而分为接合性质粒(R质粒)和非接合性质粒(r质粒),接合性R质粒为耐药菌株的传播提供了物质基础,而r质料虽然不能通过接合作用进行传递,但可以通过噬菌体转导进行传递、此外,当r质粒与R质粒共同存在于一个菌细胞内时,在一定条件下r质粒可以被诱导而随同R质粒一起进行传递。另外,一个耐药性质粒可以携带多个耐药性基因,故一次传递就可使受体菌获得对抑菌药物的抗性、大肠杆菌的多重耐药性主要由接合性R质粒决定、耐药谱越广,R质粒检出率越高、R质粒越稳定,活性也越强,R质粒也越容易传播、大肠杆菌在人和动物的肠道中大量存在,因此它们携带的R质粒会在人与动物间、动物与动物间传递,使得由耐药菌引起的疾病流行不止。枯草芽孢杆菌在液体培养基中生长时,常形成皱醭。顶青霉菌株
铜绿假单胞杆菌的载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当普遍。寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内影响并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。冷冻保藏法可分低温冰箱(-20-30摄氏度,-50-80摄氏度)、干冰酒精快速冻结(约-70摄氏度)和液氮(-196摄氏度)等保藏法。冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70摄氏度左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。卡斯泰利诺莫夫氏酵母金黄色葡萄球次于沙门氏菌和副溶血杆菌的第三大微生物致病菌。
枯草芽孢杆菌有着很好的促生作用,当枯草芽孢杆菌具有解磷作用,可以将土壤中无效磷转化为能被作物吸收的有效磷,促进作物根系及植株生长,提高了作物的抗病性。枯草芽孢杆菌使用方法,水稻孕穗破口期和齐穗期各施药一次。每亩用枯草芽孢杆菌10克均匀喷雾,喷药药间隔7-12天。枯草芽孢杆菌与咪鲜胺、三环唑、井冈霉素等混用,有明显的相互增效作用。在病害集中、急性暴发时,更能显示出混用的效果。诱导植物产生抗性作用是指枯草芽孢杆菌不但能够抑制植物病原菌,而且还能够诱发植物自身抗病机制从而增强植物的抗病性能的作用。
利用较低温甘油保存法保存铜绿假单胞菌菌种时,要将保存的铜绿假单胞菌接种于1.7毫升肉汤管中,在37摄氏度恒温培养箱培养18小时后加人无菌甘油0.3毫升,使甘油浓度为15%,充分混匀,吸取1毫升分装于无菌的冷冻管或1.5毫升离心管,封好盖子,在-20摄氏度冰箱中放置3小时后,置-70摄氏度冰箱中长期保存。菌种复苏:从-70摄氏度冰箱中取出一只菌种保存管(已保存2年3个月),迅速用接种环轻轻刮取几下,转种于已预温到37摄氏度的普通琼脂平板上,37摄氏度培养18~24小时。半固体保存法,要用接种针挑取少量菌苔移种于无菌半固体培养管,肉汤中加人琼脂粉至终浓度为0.25%,于37摄氏度培养18小时;用无菌方法将培养管的软木塞换为灭菌的橡胶塞后,放人菌种保存箱4摄氏度保存。铜绿假单胞菌的标本采集,包括来自医院环境中的各种标本如水、空气、物体表面采样等。
大肠杆菌的耐药可以是天然固有的,也可以通过后天的基因突变、基因转移获得。固有耐药性(intrinsicresistance),即耐药性的产生并不依赖于抑菌药物的存在,而是细菌细胞所固有的,与细菌的遗传和进化密切相关。固有耐药性包括自发基因突变导致的耐药性和细胞膜药物外输作用引起的耐药性。获得性耐药(acquiredresis—tance)是指细菌在抑菌药物选择性压力存在下经过基因突变,或细菌在生长过程中由于移动耐药因子的转移而获得的一种表型。主要包括移动因子和抑菌药压力作用下引起基因突变所导致的耐药性。就目前的研究现状来看,大肠杆菌的耐药性机制主要有5种:①抗s素作用位点的改变或新作用位点的产生。②酶对抗s素的修饰和破坏。③增加抗s素从大肠杆菌向细胞外的主动排出作用。④细菌外膜通透性的改变。⑤质粒介导的耐药性。一种耐药机制可以对多种抗s素表现为抗性,同一种抗s素也常常出现多种耐药性机制共同抑制的现象。铜绿假单胞菌在营养琼脂上,37摄氏度,培养3d,菌体呈杆状。爪哇根霉菌株
金黄色葡萄球是人类的一种重要病原菌。顶青霉菌株
铜绿假单胞菌低温保存法主要为简单保存法,将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4摄氏度冰箱保存,保存时间不超过1~2个月,若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3~4个月。液氮较低温保存法,将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中,密封于安瓿管内,然后控制冷却速度,使安瓿管温度逐步下降至-35摄氏度时,即可置于-150~-196摄氏度的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物,都可用此法长期保存。顶青霉菌株
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