冻存铜绿假单胞杆菌时,要先消化细胞,将细胞悬液收集至离心管中。1000rpm离心10分钟,弃上清液。沉淀加含保护液的培养,计数,调整至5×106/毫升左右。将悬液分至冻存管中,每管1毫升。将冻存管口封严。如用安瓿瓶则火焰封口,封口一定要严,否则复苏时易出现爆裂。贴上标签,写明细胞种类,冻存日期。冻存管外拴一金属重物和一细绳。按顺序降温,室温→4摄氏度(20分钟〕→冰箱冷冻室(30分钟)→低温冰箱(-30摄氏度1小时)→气态氮(30分钟)→液氮。注意操作时应小心,以免液氮冻坏。液氮定期检查,随时补充,不能挥发干净,一般30立升的液氮能用1~1.5月。金黄色葡萄球菌无鞭毛,不能运动。无芽胞,除少数菌株外一般不形成荚膜。Chryseobacterium artocarpi
金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)属葡萄球菌属(Staphylococcus),是重要的革兰氏阳性条件性致病菌。典型的金黄色葡萄球菌呈球形,排列成葡萄串状,在液体培养基中常呈双或短链状排列。无鞭毛及芽孢,幼龄菌可见荚膜。一般来说,金黄色葡萄球菌生长的较适温度为37℃。金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,能形成湿润、光滑、隆起的圆形菌落,因为含类胡萝卜素,所以常呈柠檬色及黄色。在有氧或培养基中含牛乳、血清时可产生更多的色素。血平板菌落周围形成透明的溶血环。师岗链霉菌菌种铜绿假单胞菌的菌体有时呈球杆状或线状,成对或短链状排列。
通常,铜绿假单胞杆菌温度太高,有时会得不到扩增产物;铜绿假单胞杆菌温度太低时,容易发生非特异性反应。另外,时间太短时,会得不到扩增产物或者会有一些短的非特异性产物优成。传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6摄氏度冰箱内保存。液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
枯草芽孢杆菌对水产养殖中的弧菌、大肠杆菌和杆状病毒等有害微生物有很强的抑制作用,能分泌大量几丁质酶,分解养殖池中的有毒有害物质,净化水质,同时能分解池中的残饵、粪便、有机物等,具有很强的清理水中垃圾小颗粒的作用。枯草芽孢杆菌也被普遍应用在饲料中,它具有较强的蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性,能促进饲料中营养素的降解,使水产动物对饲料的吸收利用更加充分。枯草芽孢杆菌可以减少对虾病害发生,可以较大提高对虾产量,从而提高经济效益,生物环保,刺激水产动物免疫组织的发育,增强机体免疫的能力;减少对虾病害发生,明显提高对虾产量,从而提高经济效益,净化水质,无污染,无残留。金黄色葡萄球易被常用的碱性染料着色,革兰氏染色为阳性。
枯草芽孢杆菌的主要优势在于,它是一种嗜温、好氧、产芽孢的杆状细菌,常采用人工诱变深层液体发酵浓缩精制而成。该菌在自然界中普遍存在,对人畜无毒无害,不污染环境,能产生多种抗类菌素和酶,具有广谱抗类菌活性和极强的抗逆能力。它在农作物上使用效果非常明显、稳定性强。枯草芽孢杆菌对果树、棉花、小麦、辣椒、番茄、玉米、水稻、大豆、辣椒等农作物上显示出很好的防病和增产增收效果。枯草芽孢杆菌,是芽孢杆菌属的一种,普遍分布在土壤及腐烂的有机物中,易在枯草浸汁中繁殖,故名枯草芽孢肝菌。当枯草芽孢杆菌作用于作物或土壤时,能够在作物根际或体内定殖,并起到特定肥料效应。双氮纤维单胞菌菌株
选购大肠杆菌时,应该要注意什么事项呢?Chryseobacterium artocarpi
大肠杆菌可以在多种底物上生存,并在厌氧条件下使用混合酸发酵,产生乳酸盐、琥珀酸盐、乙醇、乙酸盐和二氧化碳。由于混合酸发酵中的许多途径产生氢气,因此这些途径要求氢气水平低,例如大肠杆菌与耗氢生物如产甲烷菌或硫酸盐还原菌生活在一起。大肠杆菌在37°C(98、6°F)条件下生长至佳,但一些实验室菌株在49°C(120°F)条件下可以繁殖。大肠杆菌生长在各种确定的实验室培养基中,如LB培养基或任何含有葡萄糖、磷酸一铵、氯化钠、硫酸镁、磷酸氢钾和水的培养基。生长可以通过有氧或无氧呼吸来驱动,使用多种氧化还原对,包括酸、甲酸、氢和氨基酸的氧化,以及底物如氧、硝酸盐、富马酸盐、二甲基亚砜和三甲胺氮氧化物的还原。[21]大肠杆菌被归类为兼性厌氧菌。当氧气存在并可用时,它就使用氧气。然而,它可以通过发酵或厌氧呼吸在无氧条件下继续生长。在无氧条件下继续生长的能力对细菌来说是一个优势,因为在水占主导地位的环境中,细菌的存活率会提高的。Chryseobacterium artocarpi
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