灰绿犁头霉

大肠杆菌的培养：将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养，逐级扩大培养得到纯而壮的培养物，即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程，因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同，所以要活化，让菌种逐渐适应培养环境。菌种经过冷冻干燥后，生长延迟期较长，需连续两次继代培养才能正常生长。将菌种接种至一新鲜培养基上，每萌发一次即为一代，因此，当原始菌种复溶并转至新培养基内生长，即认为已传代一次，从菌种保藏中心获得的冷冻干燥的菌种为第0代，冷冻干燥的原始菌种开启后转种为第1代，直到第3代为工作菌种。菌种的传代次数（自原始菌种冻干粉起）不得超过5代。直接从冻存摇的菌甘油放了不少可能会抑制菌的生长，活力差，而且多余的甘油对细菌生长不利，经划板的菌株活力好，可以挑菌摇菌提质粒或者做表达用。铜绿假单胞菌在普通琼脂培养基上生长18~24h可以见到扁平、湿润的菌落。灰绿犁头霉

铜绿假单胞菌普遍分布于空气、水、土壤中，在人体皮肤、肠道、呼吸道均有存在，为重要的条件致病菌，是医院影响的重要病原菌。在人体抵抗力低下时，是引起呼吸道影响、泌尿道影响、烧伤影响的主要病原菌之一，在假单胞菌属的影响中，铜绿假单胞菌的影响占70%。该菌有多种毒力因子，包括结构成分、毒养素和酶，其中绿脓素是一种绿色具有氧化还原活性的化合物，在铜绿假单胞菌的致病中起重要作用，能催化超氧化物和过氧化氢产生有毒氧基团，引起组织损伤。同时，绿脓素也是铜绿假单胞菌的典型微生物特性之一，在细菌鉴定中起重要作用。因此，保存好铜绿假单胞菌，减少菌株变异，是绿脓杆菌的临床检验、实验教学和科学研究的基础。黑龙江乳杆菌菌种枯草芽孢杆菌可提高动物体(人体)内干扰素和巨噬细胞的活性。

金黄色葡萄球菌产生的耐热性肠有害元素简称SEs，是由血浆凝固酶或耐热核酸酶阳性的菌株所产生的一类结构相关、毒力相似、抗原性不同的胞外蛋白质。有A-E、G-V及X型(即SEA等)，其中C型抗原又分为3个亚型(C1、C2、C3)，SEG、SEI、SEK为新发现的肠有害元素。所有的有害元素都有以下共同特性：具有引起急性胃肠炎的能力(催吐性)；刺激非特异性T细胞增殖的超抗原特性；对热和蛋白酶消化作用的抵抗能力(即肠有害元素对热和水解酶的变性都有很高的耐性)；分子内都存在二硫键。

通常，铜绿假单胞杆菌温度太高，有时会得不到扩增产物；铜绿假单胞杆菌温度太低时，容易发生非特异性反应。另外，时间太短时，会得不到扩增产物或者会有一些短的非特异性产物优成。传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用)，培养后于4-6摄氏度冰箱内保存。液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。金黄色葡萄球菌无鞭毛，不能运动。无芽胞，除少数菌株外一般不形成荚膜。

金葡菌的危害是什么？金葡菌本身的杀伤力有限，但如果在食物中大量繁殖，就可产生金黄色葡萄球菌肠有害元素。这种有害元素才是真正的“致病元凶”，它的耐热性很强，普通的烹煮过程无法将其完全破坏，摄入1微克（百万分之一克）金葡菌肠有害元素就可导致食源性疾病。患者在摄入含有金葡菌肠有害元素的食物后30分钟至8小时内，会出现恶心、剧烈呕吐、肚子痛、腹泻等急性肠胃炎症状，病程短，大部分患者通常1-2天即可自行恢复。易感人群为儿童，且年龄越小对金葡菌肠有害元素越敏感。枯草芽孢杆菌是一种新型的微生物源生物农药。罗伊氏乳杆菌菌株

铜绿假单胞菌较适生长温度为25~30摄氏度。灰绿犁头霉

大肠杆菌耐药性产生的原因：内在原因1940年，Abraham和Chain从大肠杆菌中分离和鉴定出了一种能水解青霉素的酶，这一发现说明了耐药性不只是反复用药的结果，而且也是大肠杆菌增强在不利环境中生存能力的自身防卫系统的重要组成部分，这也是大肠杆菌容易产生耐药性的自身原因。药物诱发作用：由于养殖户把使用药物当作控制大肠杆菌的主要手段，并且在实际生产中有时用药不合理，如随意加大剂量，或低剂量长时间使用，投药途径不当、不注意轮换用药，这些错误的用药的方子法和用药程序是造成大肠杆菌产生耐药性的主要原因、在某些养殖场畜禽发病后一旦怀疑由大肠杆菌引起，不管何种药物，只要是抗s素便用，但很少能收到有效的疗养效果。某些肉鸡场为防止疫病的发生，便采用饲料或饮水中长期添加药物的预防方法，还有一些养殖场为防止产生高的药物残留而小剂量反复用药也会导致细菌逐步产生耐药性。此外，有试验表明联合用药是加快大肠杆菌产生耐药性的又一原因、联合用药有时的确能起到尽快控制该病的目的，但用药剂量不足或用药时间过长，不只增加了用药开支费用，而且扩大了细菌耐药范围，使其对更多的药物产生耐药性。灰绿犁头霉

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