1985-1989年与1995-1999年医院传染金黄色葡萄球菌及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的情况,了解其在医院传染中的耐药性变迁,为进一步控制其在医院的暴发流行提供可靠的实验室依据。方法:对从住院患者各种临床标本中分离出的金黄色葡萄球菌,用K-B法检测MRSA。结果:金黄色葡萄球菌医院传染株从1985年的34.45上升到1989年的60.0%,MRSA从1985年的18.6%上升到1989年的33.3%,两者均有上升趋势(P0.05),但传染率均高于1985-1989年。结论:80年代中后期医院传染金黄色葡萄球及MRSA呈逐年上升趋势,但进入90年代中期相对稳定,这可能和重视及开展医院传染有着密切关系。铜绿假单胞菌的O抗原包含脂多糖,有特异性。虫草菌株
大肠杆菌摇瓶发酵常用的化学合成培养基有LB、SOB、SOC等。培养基中通常含有碳(能)源、氮源,以及微营养物如微生物和微量元素,这些营养物的浓度与比例,对实现生产重组微生物的高密度发酵是很重要的。培养基中复合氮源的种类对重组大肠杆菌的高密度发酵也很重要。在某些情况下,向培养基中添加一些营养物质能提高生产率。这些营养物的作用可能是作为产物前体,也有可能是阻止产物的降解。发酵过程:1、种子活化:将保存于-80℃的种子甘油菌室温解冻,取500ul菌接入50mlLB培养基,再加入相对应的筛选抗性,37℃培养7h。2、上罐:将上步活化的种子50ml接入3L发酵培养基中,设定温度,空气流量,压力值,监控DO与PH值。3、从发酵4小时开始,每隔1h进行取样检测OD,当OD值≥40时,开始诱导。4、诱导物:IPTG(1mol/L,过滤除菌),加入4ml,至终浓度达到1mmol/L,诱导阶段温度控制再35℃,其他条件不变,诱导10小时。5、诱导结束,放罐,5000rpm离心,收集菌体,于-80℃冰箱保存。腐皮镰孢菌株枯草芽孢杆菌可产生乳酸等有机酸类,降低肠道PH值,间接抑制其它致病菌生长。
大肠杆菌的生物学特征:1、理化特性大肠杆菌是短杆菌,两端呈钝圆形,革兰阴性。有时因环境不同,个别菌体出现近似球杆状或长丝状。大肠杆菌多是单一或两个存在,但不会排列呈长链形状。大多数的大肠杆菌菌株具有荚膜或微荚膜结构,但是不能形成芽孢。多数大肠杆菌菌株生长有菌毛,其中一些菌毛是针对宿主及其他的一些组织或细胞具有黏附作用的宿主特异性菌毛。2、生化特性大肠杆菌的生化代谢非常活跃。大肠杆菌可以发酵葡萄糖产酸、产气,个别菌株不产气,大肠杆菌还能发酵多种碳水化合物,也可以利用多种有机酸盐。大肠杆菌在常用的生化特性检测项目中,甲基红试验呈阳性,吲哚产生和乳糖发酵是阳性(个别菌株表现阴性),维-培试验是阴性,尿素酶和柠檬酸盐利用呈阴性(极个别菌株表现阳性),硝酸盐还原试验表现阳性,氧化酶表现阴性,氧化-发酵试验表现为f型。
金黄色葡萄球菌免疫学检测方法:免疫荧光法:免疫荧光技术利用荧光色素对抗体或抗原进行标记,然后检测目标抗原或抗体。抗原和抗体特异结合后,通过考察荧光信号的强弱进行定性定量检测。与酶介导的免疫测定相比,基于荧光的免疫测定具有提供高通量分析和灵敏度的更大潜力。免疫胶体金法:该方法借助硝酸纤维膜为固定相载体,样品溶液通过毛细作用在试纸条中移动,在试纸条中同时加入了针对待检测物质特异性的抗原或抗体。与ELISA技术相比,免疫胶体金技术操作更为简单,对实验人员没有特别的技术要求,适合基层单位和现场诊断。但是免疫胶体金相比较ELISA法而言,灵敏度更低,且使用范围不广,需要进一步的研究。总体而言,免疫胶体金有着强大的发展潜力和广阔的应用前景。用分子生物学方法在大肠杆菌得出的结论可用于其它生物的研究。
大肠杆菌的发生与流行染上是呈世界性分布的,但大肠杆菌的流行性还是存在一定的区域分布特征的。这些区域分布的特征在人的大肠杆菌染上中表现的更明显些,至大的可能是因为与区域间经济条件和社会卫生状况等有一定联系的。动物养殖环境的卫生条件和养殖密度、饲养管理水平和集约化程度以及畜禽粪便无害化处理效果等多种因素直接影响着动物大肠杆菌病的发生与流行,在猪、鸡、牛、家兔等养殖动物中这些因素表现尤其突出。这种很大的差异即使在同一个国家或区域也会存在。金黄色葡萄球易被常用的碱性染料着色,革兰氏染色为阳性。甘薯长喙壳菌株
大肠杆菌是动物肠道中的正常寄居菌,其中很小一部分在一定条件下引起疾病 。虫草菌株
金黄色葡萄球菌为革兰阳性球菌,呈葡萄串状排列,无芽孢,无鞭毛,不能运动。适宜生长温度为35℃~37℃,但在0℃~47℃都可以生长。菌体不耐热,60℃的温度下,30分钟即可被杀死,但在冷藏环境中不易死亡。目前已经确认的至少有A、B、C1、C2、C3、D、E和F这8个型。A型肠有害元素引起的食物中毒较多,B型次之,C型较少。该有害元素的抗热力很强,煮沸1~1.5小时仍保持其毒力,也不受胰蛋白酶影响。120℃的温度下,20分钟还不能完全破坏。其抗原成分是耐热性蛋白质和多糖。因此,当其污染食品以后,用普通的烹调方法不能避免中毒。金黄色葡萄球菌的传染源一般来自有患化脓性炎症病人或带菌者。适宜该菌繁殖并产生有害元素的食品,由于各国气候条件和饮食习惯不同而有差异。我国常引起中毒的食品除乳及乳制品外,还有腌制的肉、鸡、蛋等食品以及含有淀粉的食品。由牛乳引起的食物中毒比较多,虽然牛乳在食用前一般经过煮沸,但是有害元素不能被破坏,如煮沸前污染严重并已经产生有害元素,仍可引起食物中毒。虫草菌株
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