BCA蛋白检测试剂盒是进行蛋白质浓度测定的常见的方法之一。BCA蛋白定量的主要原理是:蛋白质在碱性条件下,可以将二价Cu2+离子还原成一价Cu+离子。产生的一价Cu+离子可以与BCA(Bicinchoninicacid)试剂结合,终生成紫色的复合物。该复合物在562nm处有很强的吸收峰。复合物的多少与蛋白质的浓度呈接近的线性关系。BCA蛋白检测试剂盒有许多优点:检测的灵敏度高,检测的蛋白质浓度下限可达20μg/mL。线性范围广,在20-2000μg/mL的范围内,呈接近的线性关系。兼容性良好,产品可以兼容的化学物质非常普遍。检测试剂盒以免疫学反应为根底。Tris-HCl缓冲液(0.5mol/L,pH7.0-9.0,无菌)
检测试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验()。已知浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例关系。检测试剂盒安全性:避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取检测试剂盒里的任何成份。Tris-HCl缓冲液(0.01mol/L,pH7.0-9.0)检测试剂盒吸入液体时的的方法是吸两档打一档。
水是常用的溶剂,不具有任何药理与毒理作用, 所以水是常用的和为人体所耐受的极性溶剂。水能与乙醇、甘油、丙二醇等以任意比例混合。水能溶解无机盐、糖、蛋白质等多种极性有机物。液体试剂用水应以蒸馏水为宜。水能使某些药物水解,也容易增殖微生物,使药物霉变与酸败。在使用水作溶剂时,要考虑药物的稳定性以及是否产生配伍禁忌。甘油:为常用溶剂,特别是外用制剂应用较多。本品为黏稠状液体、味甜、毒性小,与乙醇、丙二醇、水以任意比例混合,可内服、外用。能溶解许多不易溶于水的药物。在外用制剂中,甘油常做黏膜给药的溶剂,甘油对皮肤有保湿、滋润、延长药物局部药效等作用,且对药物的刺激性有缓解作用。含水10%的甘油无刺激性,在内服溶液制剂中,甘油含量在12%(g/ml)以上,能防止鞣质的析出并兼有矫味作用。30%以上具有防腐作用。
怎样减少检测试剂盒误差?检验技师应具备从事实验室操作的基本素质和实践经验。能熟练操作实验仪器、器械,具有一定总结和分析问题的能力,对实验中出现的意外情况能及时妥善解决。使用校对过的微量移液器,排除自然误差。移液器准确与否对定量检测尤为重要。仔细阅读说明书,严格按照说明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不可混用。值得改进的地方,反复试验确定成立后才能改进。洗涤彻底,如若洗板不彻底,酶结合物本底显色会呈现假阳性。洗涤液要新鲜,现用现配,陈旧的洗涤液会出现本底增高现象,也可能出现假阳性。试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一。
科研实验中试剂取用应注意事项:1. 固体试剂的取用:取用固体药品时药匙必须是干净的.一支药匙不能同时取用两种或两种以上的试剂.药匙每取完一种试剂后都必须用干净的纸擦拭干净,以备下次使用.药匙的两端为大小两匙,取固体量较多时用大匙,较少时用小匙。2. 取用不定量(较多)液体——直接倾倒a. 瓶塞必须倒放在桌面上【防止药品腐蚀实验台或污染药品】;b. 直接倾倒时瓶口必须紧挨试管口,试管45度,并且缓缓地倒【防止药液损失】;c. 贴标签的一面必须朝向手心处【防止药液洒出腐蚀标签】;d. 倒完液体后,要立即盖紧瓶塞,并把瓶子放回原处,标签朝向外面【防止药品潮解、变质】。液体试剂易于分剂量,服用方便。阿利新蓝染色液-A液(pH2.5)
丁胺卡那霉素给药说明:烧伤患者中本品的半衰期较短(1—1.5小时)。Tris-HCl缓冲液(0.5mol/L,pH7.0-9.0,无菌)
怎样减少检测试剂盒误差?严控反应时间,反应时间过长,酶失活;反应时间过短,酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充分结合,生成物结构松散不牢固,容易洗掉,都可能造成假阴性。注意检测试剂盒保存期,过保存期的试剂不能使用。评估试剂的实用性,试剂的稳定与否,对准确率的高低到头重要。在试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品反复比照试验,判定试剂符合要求后方可使用。严格掌握显色时间,显色时间过短,加入终止液反应终止后,底物结合物的量过少,易出现假阴性。超过显色要求时间后显色,应判为假阳性,这可能与试剂本身有关。加显色剂后立即显色,不可报阳性,这可能是本底显色的结果。Tris-HCl缓冲液(0.5mol/L,pH7.0-9.0,无菌)