鼠尾胶原实验应用:探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效果。方法制作鼠尾胶原,观察全细胞膜片钳实验中,自制的鼠尾胶原对前庭毛细胞的贴壁黏附作用。结果无鼠尾胶原时,前庭毛细胞悬浮于外液,不宜封接;有鼠尾胶原时,前庭毛细胞贴附于培养皿底壁,易于封接和长时间(约8h)的观察和记录。鼠尾胶原对前庭毛细胞具有良好的贴壁黏附促进作用。结论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。鼠尾胶原醋酸溶解:按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。济南鼠尾胶原服务电话
胶原蛋白(Collagen)是结缔组织和内脏部位外基质的主要成分,但在皮肤、肌腱、骨骼中分布*为普遍。胶原蛋白在结构和遗传学上被分为不同类型,I型胶原蛋白(Collagen, Type I)结构上是由2个α1链和1个α2链组成的异源多聚体,在37℃中性条件下可形成3股螺旋结构,被普遍用于多种细胞的培养基质,如肝细胞、纤维细胞、脊髓神经节、雪旺氏细胞等。另外,I型胶原蛋白在细胞生长、分化、迁移和组织态的发生等方面也具有重要应用。注意事项:1) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。2) 整个操作请于冰上进行,因室温下鼠尾胶原I可迅速成胶。3) 整个操作请在无菌环境下无菌操作,避免污染以影响细胞生长。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。深圳鼠尾胶原厂家批发价用无菌0.006mol/L乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/mL。
鼠尾胶原蛋白I型,用那一种胶原酶可以溶解:1.将胶原加入到0.1M 的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。 4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5.从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的,这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。 在接种细胞前用无菌的水漂洗。
一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法:一般的生物体中提取的胶原蛋白多为混合型,之前多从牛皮、猪皮、牛腱中提取, 但这类胶原蛋白不光有油脂等其他杂质,也存在着II型及其他一些胶原蛋白亚型;同时, 这种畜牧业大量饲养的动物存在着例如疯牛病等一些生物性疾病及病毒传染,如果用此开发医用产品更加存在着品质的不稳定及潜在的风险及危害;再次,人的真皮中主要含有I 型和III型,但III型不易大量获得,故应用单一的I型胶原蛋白是解决体外应用的医用产品引起的抗原性问题的关键,这也是I型胶原蛋白抗原性低的原因之一。同时,I型胶原蛋白的三重螺旋的氨基酸结构决定了它的一些特有的性能,如机械性能、促进细胞生长、弱抗原性、可生物降解性和胶原的自缔合性。酸法提取主要采用低离子浓度酸性条件浸渍处理原料,从而破坏分子间的盐键和希夫碱。
鼠尾胶原蛋白I型,用那一种胶原酶可以溶解:1.将胶原加入到0.1M 的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。 4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5.从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的,这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。 在接种细胞前用无菌的水漂洗。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。手持尾巴,用止血钳夹住鼠尾的较高,折断尾骨后拉出尾腱。杭州正规鼠尾胶原供应商
加到相应的培养器皿中,确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面。济南鼠尾胶原服务电话
胶原蛋白分离提纯实验方案:提取鼠尾胶原蛋白的实验步骤: 1、使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液对初步处理的鼠尾腱进行 酶解, 持续一段时间待混合物变成无色、 透明、 粘稠液体后即可在 4℃, 5000g 的离心力下离心 20min, 收集上清即为粗制鼠尾胶原蛋白原液。 2、将一定浓度的氯化钠溶液加入其中,持续搅拌直至白色絮状沉淀 从溶液中析出,继续加入氯化铵直至沉淀不在析出为止,4℃,5000g 的离心力下离心 20min 后获得白色沉淀。 沉淀物加入一定浓度的醋酸 溶液中溶解。 3、将溶解后的鼠尾胶原蛋白溶液继续反复进行盐析处理,重复步骤 2 的过程 2~4 次。 _x000c_鼠尾胶原蛋白经 SDS- PAGE 蛋白质电泳。济南鼠尾胶原服务电话
鼠尾Ⅰ型胶原:选择适当的骨修复材料是治好骨缺损的中心环节。目前,临床上常用的有人工骨移植、自体骨移植和同种异体骨移植。其中,人工骨材料多为磷酸三钙、半水硫酸钙等含有钙和磷的无机矿物材料[1-2],由于不含自体骨组织中的有机大分子Ⅰ型胶原蛋白,其临床疗效远远低于自体骨组织。但是,自体骨移植和同种异体骨移植均来源于人类自身骨组织,数量有限,难以满足临床需要。因此,研发与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料,成为全世界骨组织工程学者孜孜以求的目标。由于天然骨组织是Ⅰ型胶原蛋白和羟基磷灰石钙生物矿化的产物,在分子结构上,羟基磷灰石钙晶体是以Ⅰ型胶原纤维为模板,呈片状镶嵌在胶原纤维分子间隙,...