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胶原蛋白的提取方法：1.碱法提取：碱法提取胶原蛋白常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等。如Holzer等[5]采用1 %～1.5 %石灰水浸泡的方法提取胶原蛋白。由于它容易造成肽键水解，因此得到的水解产物分子量比较低。所以，若想保留胶原的三股螺旋结构，此法不可取。2.盐法提取：盐法提取胶原蛋白所用的中性盐有盐酸-三羟甲基胺基甲烷(Tris-HCl)、氯化钠、柠檬酸盐等。在中性条件下，当盐的浓度达到一定量时，胶原溶解。并且可采用不同浓度的氯化钠对提取的胶原蛋白进行盐析处理，可以沉淀出不同类型的胶原蛋白。制备鼠尾胶原：重复步骤2、3，直至尾腱量够用。武汉正规鼠尾胶原厂家批发价

鼠尾Ⅰ型胶原：组装液的配置：1.50 mmol/L甘氨酸+200 mmol/L氯化钾 100 mL，用1 mol/L 氢氧化钠调节酸碱度至9.2。2.胶原纤维的重构吸取胶原10μL至小培养皿中，倒入0.5 mL自组装液，室温放置20 min。予自组装液自组装24 h。吸取0.05%戊二醛2 mL至小培养皿中，将自组装24 h的胶原浸泡在戊二醛中。然后将胶原经去离子水、50%乙醇、100%乙醇依次漂洗后进行TEM观察。3.生物矿化形成仿生骨材料静滴配置钙磷矿化液将25mL钙液(10 mmol/L 二水氯化钙+150 mmol/L氯化钠+50 mmol/L三羟甲基氨基甲烷+0.02%三氮化钠)倒入烧杯中，滴入聚丙烯(PAA)至浓度350 μg/mL；滴加1 mol/L的氯化氢，调节酸碱度至7.4，然后缓慢滴入25 mL磷液(6 mmol/L磷酸氢二钠)，约16滴/min。郑州正规鼠尾胶原厂家推荐鼠尾胶原醋酸溶解：在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。

一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法：胶原蛋白是脊椎动物和无脊椎动物支持结构的主要组成。在人的身体中这是皮肤、筋、软骨、骨骼及结缔组织的较主要的蛋白质。胶原蛋白占人体蛋白质总量的三分之一， 不论来源于哪一种动物或哪一种组织的胶原都有许多共同特性。氨基酸组成中约有三分之一为甘氨酸，有脯氨酸和羟脯氨酸。根据其遗传分子结构遗传基因的差别，胶原蛋白分为20 几个亚型。但较为常见的为Ι、Π、ΙΙΙ型胶原蛋白，即间质胶原蛋白。其中I型较为丰富且品质优良。I型胶原蛋白分布非常普遍，是主纤维束的主要成分，给结缔组织以强度；是较丰富的胶原蛋白类型，尤其是在皮肤真皮、骨、筋和腱中。

鼠尾胶原蛋白的提取方法，采用酸法与酶法相结合的工艺，保持恒低温无菌的环境，利用同样浓度的盐溶液进行两次盐析与离心，简化了提纯步骤。所用酸为低浓度酸溶液，并采用柠檬酸替代醋酸进行提纯。从提取原料到样品生成过程中，进行多次真空冷冻干燥，并经进一步处理获得含水率在3％以下的胶原蛋白微粉；较后由灭菌、无菌包装，成品胶原蛋白粉末的纯度在98％以上。本发明获得的胶原蛋白降低了蛋白的免疫原性，提高了产率和生物相容性，降低了成本，适用于生物医用材料，所得到的胶原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋结构。将无组织纤维、脂肪和多糖残留的鼠尾腱，真空冷冻干燥备用。

鼠尾胶原：1实验制备：实验设备及材料：大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。 实验内容：1、制备鼠尾胶原（两个同学一组操作）。2、切割小玻片。3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。实验步骤：制备鼠尾胶原：1、取大鼠尾巴洗净，75%酒精浸泡5分钟；2、手持尾巴，用止血钳夹住鼠尾的较高，折断尾骨后拉出尾腱；3、将尾腱剪断置于平皿中，生理盐水浸泡；4、重复步骤2、3，直至尾腱量够用；5、吸去生理盐水，将尾腱称重（0.5-1克）。探讨应用鼠尾胶原在豚鼠前庭毛细胞膜片钳实验中的促进毛细胞贴壁效果。南京济南鼠尾胶原

鼠尾胶原醋酸溶解：在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。武汉正规鼠尾胶原厂家批发价

鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用：原蛋白具有抗氧化作用,但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建,对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿(实验组)和普通培养皿(对照组)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2诱导。24 h后,以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平,Western-Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。武汉正规鼠尾胶原厂家批发价

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