企业商机
细胞高效转染试剂基本参数
  • 产地
  • 苏州
  • 品牌
  • 细胞高效转染试剂
  • 型号
  • 齐全
  • 是否定制
细胞高效转染试剂企业商机

细胞转染实验简介:实验原理外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和细菌介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞;细菌法是利用包装了外源基因的细菌传染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大;细菌法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响;所以现在对于很多普通细胞系,一般的瞬时转染 方法多采用脂质体法。大部分细胞可以在无血清培养基中几个小时内保持健康。合肥北京细胞高效转染试剂

合肥北京细胞高效转染试剂,细胞高效转染试剂

转染方式:细胞由带负电荷的磷脂双分子层构成,这对大分子物质来说是个不可透过的屏障,比如DNA和RNA的磷酸骨架,其也带负电荷。为了使核酸穿过细胞膜,研究人员开发了多种技术,大致分为三类:化学方法---利用载体分子包被核酸使其呈现中性电荷或正电荷。生物方法---利用基因工程细菌转染非细菌基因到细胞中。物理方法---在细胞膜表面产生一个瞬时的孔从而导入DNA。然而,没有一种方法适用于所有的细胞和实验,理想的方法应根据您的细胞类型和实验需要进行选择,理想的方法应具有高转染效率,低细胞毒性和对正常生理学的影响较小,并且易于使用和可重复性等特点。南京唐山细胞高效转染试剂其它物理和化学介导的转染方法,则各有其特点。

合肥北京细胞高效转染试剂,细胞高效转染试剂

瞬时转染和转染效率的监测:基因的瞬时表达在24-72小时内就结束了。这种快速的瞬时表达非常适用于验证质粒表达和监测转染步骤的效率。可以使用报告基因来确定优化条件,其表达蛋白易检测,在目的细胞中不含此蛋白或水平很低。常用的报告基因包括氯霉素乙酰转移酶(CAT),绿色荧光蛋白(GFP),荧光素酶(Lux或Luc)以及b- 半乳糖苷酶(b-gal)。可以使用简单的非同位素方法检测b-gal的表达以测定转染效率和活性。pCMV SPORT- bgal质粒包含CMV启动子调控下的LacZ基因,转染入真核细胞内后可以直接表达bgal。结合简单的检测步骤,可以做为监测转染条件的一种方便灵敏的方法。

细胞转染,你至少要掌握以下几点:主要有下面几种方法::化学法:磷酸钙法、DEAE-右旋糖苷法、阳离子脂质体法;物理法:电穿孔法、显微注射法、颗粒传递法;细菌介导法:逆转录细菌、腺细菌A. 阳离子脂质体法:带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞。特点:简单通用,适用性广,转染效率高,重复性好,但转染时需除血清,转染效率随细胞类型变化大。由于脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会远大于悬浮细胞,所以贴壁比悬浮转染效率要高。悬浮细胞建议使用电穿孔法。B. 电穿孔法:利用高压电脉冲对细胞膜的干扰,使其形成利于核酸进入的微孔。细胞易于生长到高密度并合成更多蛋白。

合肥北京细胞高效转染试剂,细胞高效转染试剂

细胞转染为什么不能加血清:传统的转染试剂一般会增加细胞的通透性,这样会把血清中的成分带入细胞,造成细胞毒性。阳离子脂质体,转染的过程是带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞。血清中含有大量的蛋白质,在转染过程中,带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附,影响转染效率。同时,也会将血清中的蛋白带入细胞,引发细胞毒性,故不能有血清转染。这些转染试剂要求在转染前换无血清培养基,转染后 4-6h在更换成有血清培养基,这其实是为了减轻转染造成的细胞毒性和转染效率的降低。对于转染相同量的DNA所需的较佳阳离子脂质体试剂的量会因细胞密度而异。成都细胞高效转染试剂单价

一类是瞬时转染,一类是稳定转染(很长转染)。合肥北京细胞高效转染试剂

影响转染试验的因素:细胞状态变化:(1)转染试剂与细胞不匹配细胞转染较适合的不是原代细胞,也不是传代很多次的细胞。这是因为细胞培养在实验室中保存数月和数年后会经历突变,总染色体重组或基因调控变化等而演化。这会导致和转染相关的细胞行为的变化。较适合转染的细胞是经过几次传代后达到对数生长期的细胞,细胞生长旺盛,较容易转染。(2)把握时机没错!转染也有适当的时机,相比较非分裂细胞——分裂细胞往往要比静止细胞更易于摄取并表达外源DNA。因此对大多数转染操作而言,细胞都在转染当天或前现在种板。同样重要的是细胞在种板进行转染时不应处于过度生长的状态,如细胞数量过多,互相叠加,营养物质耗竭,代谢废物积聚,转染率低下也是很正常的!合肥北京细胞高效转染试剂

苏州君欣生物科技有限公司办公设施齐全,办公环境优越,为员工打造良好的办公环境。致力于创造***的产品与服务,以诚信、敬业、进取为宗旨,以建苏州君欣生物产品为目标,努力打造成为同行业中具有影响力的企业。我公司拥有强大的技术实力,多年来一直专注于苏州君欣生物科技有限公司的经营范围包括原代细胞的定制以及相关产品的配套销售与服务,干细胞染色体核型分析与鉴定、无血清细胞培养基以及无血清细胞冻存等系列产品的生产与销售,动物疾病模型的构建以及药物效果的验证等领域。的发展和创新,打造高指标产品和服务。诚实、守信是对企业的经营要求,也是我们做人的基本准则。公司致力于打造***的原代细胞,无血清细胞冻存液,干细胞无血清培养基,动物疾病模型。

与细胞高效转染试剂相关的文章
开封细胞高效转染试剂哪家好 2024-08-15

细胞转染方法:1.脂质体转染法阳离子脂质体表面带正电荷,能与核酸的磷酸根通过静电作用,将DNA分子包裹入内,形成DNA脂复合物,也能被表面带负电的细胞膜吸附,再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前实验室较方便的转染方法之一,其转染率较高,优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞有一定的毒性,所以转染时间一般不超过24小时。常用细胞类型:cos-7、BHK、NIH3T3、Hela等2.电穿孔转染法电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内,这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或几乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般...

与细胞高效转染试剂相关的问题
与原代细胞相关的扩展资料【更多】
原代细胞(primary culture cell)是指从机体取出后立即培养的细胞。有人把培养的第1代细胞与传10代以内的细胞统称为原代细胞培养。原代细胞不仅广泛应用于分子、细胞生物学和生物医学基础研究,如蛋白质组学、基因组学、细胞株(系)研究、DNA,RNA和遗传学研究等,还可应用于当今热门的生物医药产业如药物筛选、药物代谢和毒理研究、**药物的研究等。原代细胞在生物医药领域有不可替代性作用,市场前景广阔。
信息来源于互联网 本站不为信息真实性负责