目前的主流观点认为,外泌体的产生过程为:细胞膜内陷,形成内体(endosome),再形成多泡体(multivesicularbodies,MVB),较后分泌到胞外成为外泌体。外泌体中携带有母细胞的多种蛋白质、脂类、DNA和RNA等重要信息。外泌体较早见于1981年,EGTrams等在体外培养的绵羊红细胞上清液中发现了有膜结构的小囊泡,并命名为exosome。对于外泌体的作用,当时推测为细胞排泄废物的一种方式。1996年GRaposo等发现类似于B淋巴细胞的免疫细胞也会分泌抗原呈递外泌体(antigenpresentingvesicle),所分泌的外泌体可以直接刺激效应CD4+细胞的抗一些病症反应。2007年HValadi等进一步发现细胞之间可以通过外泌体中RNA交换遗传物质。随着有关外泌体研究越来越多,研究者发现它普遍参与了机体免疫应答、抗原呈递、细胞分化、一些病症生长于侵袭等各种生物过程中。超离法因操作简单,获得的囊泡数量较多而广受?欢迎,但过程比较费时,且回收率不稳定,纯度也受到质疑。外泌体提取试剂推荐厂家
研究探讨了外泌体是否可以作为RNAi的有效载体的可能性。与脂质体和其他合成药物纳米颗粒载体不同,外泌体含有可能增强内吞作用的跨膜和膜锚定蛋白,从而促进其内容物的递送。CD47是外泌体蛋白质之一,是一个普遍表达的整合素相关跨膜蛋白,其部分功能可以保护细胞免受吞噬作用。CD47是信号调节蛋白α(SIRPα,也称为CD172a)的配体,CD47-SIRPα间的结合能够发出“不要吃我”的信号,从而压制吞噬作用。病基因RAS能够促进胰腺病细胞增殖,增强胞饮作用从而促进一些病症细胞摄取外泌体。合成纳米颗粒对细胞有一定毒性作用,但使用外泌体能够较小化对细胞的毒性。研究人员发现,CD47和病基因KRAS驱动的胞饮作用都会压制外泌体被循环系统的清理,并增强胰腺病细胞对外泌体的特异性。所以,外泌体的这种特性增强了它们通过递送RNAi来特异性靶向胰腺病中的KRAS的能力,并且使用外泌体作为单一靶向剂显着改善了所有实验PDAC小鼠模型的总生存期。温州正规外泌体提取试剂报价如纯度和回收率低,杂蛋白较多(假阳性),颗粒大小不均一,产生难以去除的聚合物。
外泌体不断地被细胞产生和吸收。它们可能是新生成的外泌体和消耗的外泌体的混合物(红色和蓝色)。目前尚不清楚内生性产生或消耗的外泌体是一起释放还是单独释放。外泌体与生殖发育,抗细菌:人类的生殖,妊娠和胚胎发育需要精确,微调和动态的细胞间通讯。**,羊水,血液和母乳均含有具有特定功能的外泌体:精浆来源的外泌体与生殖器免疫有关,还有助于阻断HIV的传染;胎盘滋养细胞来源的外泌体可将一类miRNA输送至非胎盘细胞,促进自噬和细菌防御机能;母乳来源的外泌体也对婴儿的免疫系统有帮助。
人体几乎所有类型的细胞都能分泌外泌体,外泌体普遍存在并分布于各种体液中,携带多种蛋白质、mRNA、miRNA和脂质类物质等,作为重要的传递信号分子,形成了一种全新的细胞-细胞间信息传递系统,可参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和一些病症细胞生长等过程。外泌体与微泡:我们知道,细胞间相互作用可以通过释放蛋白质、核酸、脂质等分子到胞外与受体结合从而介导胞内细胞传导。除此之外,细胞还可以释放膜囊泡,外泌体与微泡就是其中两种,二者相似但形成方式不同:外泌体是细胞内内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中的膜囊泡,而微泡则是细胞出芽与细胞膜融合后直接脱落形成的囊泡,且外泌体大小均一,直径在40~100nm,其大小取决于其起源部位以及细胞中的脂质双层结构;而微泡大小不一,直径在50~1000nm之间。主要来源于细胞内内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。
目前外泌体提取的标准依然是超速离心法;方法十分复杂繁琐,耗时长,以提取尿液中的外泌体为例,每次至少需要200毫升的尿液量,并通过超速离心(120000g/分钟)20小时以上才能获得足够的外泌体量,同时对超速离心机的设备要求以及操作程序的培训较大提高了提取成本,无法实现临床的常规化应用。由于国内有关外泌体提取试剂的缺乏,我国对外泌体的研究还基本依赖于过程繁琐的超速离心和进口提取试剂盒,因此也严重阻碍了我国在外泌体的研究和临床应用上的发展。色谱法。这种方法分离到的外泌体在电镜下大小均一,但是需要特殊的设备,应用不普遍。珠海正规外泌体提取试剂
对外泌体的研究兴趣日益增长,无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。外泌体提取试剂推荐厂家
外泌体因诺贝尔医学奖而被众人知晓,也因其作为生命信息传递者,在体液中普遍存在及易获得性等特点被誉为液体活检"新贵",成为疾病的精确诊断和治病研究的热点,尤其是在一些病症研究领域[。外泌体作为细胞间通信载体的作用现在已被普遍接受。外泌体包含胞质环境中富含的DNA,RNA,蛋白质和其它分析物,研究表明,外泌体中的运转RNA和蛋白质与一些病症的生长密切相关,有望作为诊断标志物。研究发现Vps4A是一个外泌体的重要调控因子,与肝病的发生有着密切的关系,Vps4A基因的表达下调肝病的发生及转移相关。通过microRNA高通量测序发现Vps4A基因能导致外泌体分泌肝病相关的重要microRNA,与肝病的发生密切相关。外泌体提取试剂推荐厂家
有研究发现,NSCLC患者肺组织外泌体表面EGFR免疫染色呈阳性的占80%,而慢性肺炎组织的外泌体EGFR呈阳性的只占2%,因而认为外泌体的EGFR蛋白可以用作NSCLC与慢性肺炎鉴别诊断的生物标志物。Park等通过Sys-BodyFlu-id数据库分析发现153种特异性胸腔积液外泌体蛋白质,进一步的Westernblotting分析显示多种特异性胸腔积液外泌体蛋白参与EGFR信号传导途径以促进一些病症的发生的发展,因此外泌体蛋白可能作为肺病诊断筛查的生物学标记物。外泌体相关蛋白质与肺病的诊断:近年来众多文献报道,肺病细胞分泌的外泌体中富含多种蛋白质并促进肺病的发生的发展,是早期诊断肺病的有效...