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核糖核酸（缩写为RNA，即Ribonucleic Acid），存在于生物细胞以及部分病菌、类病菌中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸，核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种，即A（腺嘌呤）、G（鸟嘌呤）、C（胞嘧啶)、U(尿嘧啶)，其中，U（尿嘧啶）取代了DNA中的T。核糖核酸在体内的作用主要是引导蛋白质的合成。人体一个细胞含RNA约10pg（含DNA约7pg）。与DNA相比，RNA种类繁多，分子量较小，含量变化大。RNA可根据结构和功能的不同分为信使RNA和非编码RNA。非编码RNA分为非编码大RNA和非编码小RNA。非编码大RNA包括核糖体RNA、长链非编码RNA。非编码小RNA包括转移RNA、核酶、小分子RNA等。小分子RNA（20~300nt）包括 miRNA、 SiRNA、 piRNA、scRNA、 snRNA、 snoRNA等，细菌也有小分子RNA（50~500nt）。在细胞中，RNA种类繁多。根据结构功能的不同，RNA主要分三类，即tRNA、rRNA，以及mRNA。长沙正规RNA提取试剂哪家便宜

科学家曾经在实验室里就成功地让RNA实现了自我复制的功能。不仅如此，还有科学家构建了一种DNA-RNA杂交基因组的大肠杆菌。这个实验证明，即使有DNA-RNA的杂交链的中间态，生物也不至于会死亡。所以，RNA较早可能给就是生物的遗传物质，只是后来逐步被替代了。当然，还有一些次要的原因，比如，我们都知道DNA是在细胞核当中的，完成生命活动这些步骤其实都在细胞核外进行，因此这样其实更加安全。而如果是RNA，那就没有必要存在细胞核了，但是当细胞损失时，就很容易出现问题。因此，DNA后来逐渐取代了RNA作为生物的遗传物质。但这并不是说RNA不能够作为遗传物质，相反它是可以作为遗传物质而存在的。苏州正规RNA提取试剂哪里买总共可以使用该试剂盒进行50次标准提取。

Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，采用变性剂即内含异硫氰酸胍酚和β-巯基乙醇等变性物质，能迅速破碎细胞，压制细胞释放出的核酸酶。异硫氰酸胍属于解偶剂，是一类强力的蛋白质变性剂，可溶解蛋白质，并使蛋白质二级结构消失，细胞结构降解，**白迅速与核酸分离。β-巯基乙醇主要破坏RNase蛋白质中的二硫键。细胞裂解后，细胞释放出蛋白质、DNA、RNA等物质，再根据它们在不同的PH值和不同极性溶剂的溶解度不同而使得分开。RNA的定量计算1.RNA定量方法与DNA定量相似。RNA在260nm波长处有较大的吸收峰。因此，可以用260nm波长分光测定RNA浓度，OD值为1相当于大约40μg/ml的单链RNA。如用1cm光径，用 ddH2O稀释DNA样品n倍并以ddH2O为空白对照，根据此时读出的OD260值即可计算出样品稀释前的浓度：RNA（mg/ml）=40×OD260读数×稀释倍数（n）/1000。2. RNA纯品的OD260/OD280的比值为2.0，故根据OD260/OD280的比值可以估计RNA的纯度。若比值较低，说明有残余蛋白质存在；比值太高，则提示RNA有降解。

RNA提取试剂盒原理：该EpiQuik™总RNA提取试剂盒提供了一种快速，简单，经济有效的方法，可从全血，哺乳动物细胞，细菌细胞和菌类细胞中分离总RNA。优化的洗涤剂和离液盐用于裂解细胞并灭活核糖核酸酶。专门的高盐缓冲系统允许RNA物质基团结合到旋转柱的玻璃纤维基质上，同时使污染物通过柱被有效地洗去。纯的RNA用RE缓冲液洗脱，不用酚提取或醇沉淀。 RNA提取试剂盒特点：1、快速程序在25-40分钟内提供高质量的总RNA。2、即用型RNA，可在绝大多数下游应用，例如RT-PCR，cDNA合成，Northern Blotting，Differential display，Primer Extension， mRNA selection。3、适用样品：全血，哺乳动物细胞，细菌细胞和菌类细胞（样品起始量：300μl全血，10 ^ 7个哺乳动物细胞，10 ^ 9个细菌细胞和10 ^ 8个菌类细胞。总共可以使用该试剂盒进行50次标准提取。总RNA的产量可达30μg。产量可能因样品类型而异。）当然还有其它的进口试剂盒，但是均存在价格高、订货周期长的问题。

经典Trizol法并不能获得总RNA：这个事实可能会刷不少新手甚至老手的三观，但确有实验支持：经典Trizol法会选择性丢失低GC比的miRNA。这一点，源自一则作者自撤稿的故事。V. Narry Kim是韩国鼎鼎大名的美女科学家，专做RNA相关的研究，包括miRNA。几年前她们组发现一个奇怪的“现象”，即贴壁细胞在消化之后，会有一些miRNA的丰度突然降低，看起来好像是被快速“降解”掉了，并据此写了一篇文章发到Molecular Cell上。但很快她们就发现，这个“现象”难以重复：如果用Trizol做实验，就一定是阳性结果，而用试剂盒提RNA，就重复不出来。难道是号称能提总RNA的Trizol方案出了问题？确实如此。经进一步实验后发现，经典的Trizol方案会使得低GC比的miRNA丢失。再采集样本之后马上加入 DNA/RNA Shield，可以快速降解掉 RNase 等蛋白物质。温州贵阳RNA提取试剂

在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。长沙正规RNA提取试剂哪家便宜

DNA和RNA的鉴别染色：利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定，非固定细胞核酸，或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果，但该方法已被许多实验室普遍采用。RNA是核糖核酸，DNA是脱氧核酸。区别：溶解性：都溶于水而不溶于乙醇，因此，常用乙醇来沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶，故可用苯酚来沉淀RNA。长沙正规RNA提取试剂哪家便宜