主要试剂配制：（1）PBS：PBS粉剂每袋加ddH2O定容至1000mL，调pH7.2，高压灭菌，4℃保存备用。（2）RPIM-1640培养基：临用前根据需要加15%胎牛血清，较后按1%体积分数加入双抗贮存液(青霉素+链霉素)，使青霉素和链霉素的终浓度分别为100 U/mL和100 U/mL，置于4℃冰箱保存。（3）台盼蓝染液：称取4g台盼蓝，于研钵中用少量双蒸水研磨，加双蒸水至100mL，1500rpm离心15min，吸取上层液，即为4%水溶液。用前，用1.8%氯化钠溶液稀释1倍，即为2%台盼蓝染液。每种细胞对G418的敏感性不同，一般变动在100ug/ml～1000ug/ml范围。多组分酸碱指示剂(溴甲酚绿-溴甲酚紫-甲酚红)
pH缓冲溶液有何用途：（1）pH测量前标定校准pH计。（2）用以检定pH计的准确性，例如，用pH=6.86和pH=14.00，标定pH计后，将pH电极插入pH=9.18溶液中，检查仪器显示值和标准溶液的pH值是否一致。（3）在一般精度测量时检pH计是否需要重新标定。pH计标定并使用后也许会产生漂移或变化，因此在测试前将电极插入与被测溶液比较接近的标准缓冲液中，根据误差大小确定是否需要重新标定。（4）检测pH电极的性能。如何配制pH标准缓冲溶液：对于一般pH测量，可使用成套的pH组冲试剂（可配制250mL），配制溶液时，应使用去离子水，并预先煮沸15～30分钟，以除去溶解的二氧化碳。剪开塑料袋将试剂倒入烧杯中，用适量去离子水使之溶解，并冲洗包装袋，再倒入250mL容量瓶中，稀释至刻度，充分摇匀即可。多组分酸碱指示剂(溴甲酚绿-溴甲酚紫-甲酚红)pH缓冲溶液有何用途：检测pH电极的性能。
弱酸-弱碱型缓冲溶液（即共轭酸碱缓冲溶液）、酸式盐缓冲溶液、强酸或强碱溶液。在一些特殊情况下也使用混合体系的缓冲溶液（两种pKa相近的共轭酸碱缓冲溶液混合而成）。大家比较熟悉的是共轭酸碱缓冲溶液，例如，HAc-NaAc、HF-NH4F、NH3-NH4Cl。其实，酸式盐也可作为缓冲溶液，因为酸式盐的pH值大多是恒定的，随其浓度增减的变化不大，例如，NaHCO3溶液在1.0M至0.01M之间，其pH值几乎都在8左右（理论值为8.3），同样可以抵抗溶液中产生的少量强酸、强碱（或外加），保持溶液的pH值恒定或变化微小。强酸、强碱溶液也能缓冲滴定过程中产生的少量强酸或强碱，保持溶液的pH值变化很小，故强酸强碱也可作为广义的pH缓冲溶液（以前的分析化学教材就是这样分的），例如，EDTA络合滴定铋，需另外加入一定量的0.1mol/L硝酸溶液，就是为了增强溶液对滴定中产生的H+的缓冲作用。
使用方法：1， 固定细胞或组织样品，经过固定后，适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，可先进行免疫荧光染色，染完毕后再进行染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行染色。 2， 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，混匀。 3， 室温染色 5-10 分钟。 4， 吸除染色液，生理盐水洗涤 2-3 次，每次 3-5 分钟。 5， 置于荧光显微镜下观察，激发波长 360-400nm。 溶液注意事项： dapi 被普遍认为具有致性，操作时应戴手套，并避免交叉污染。 本产品需避光，并尽量避免反复冻融。荧光染料都存在淬灭问题，建议染色后尽量当天完成检测。 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。DC细胞诱导：将收集的PBMC在1640培养基，在37 ℃、5 % CO2条件下在培养板培养4h。
缓冲溶液作用原理和pH值：当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时，有阻碍溶液pH变化的作用，称为缓冲作用，这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液（如HAc与NaAc），弱碱及其盐的混合溶液（如NH3·H2O与NH4Cl）等都是缓冲溶液。由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用，是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时，H 离子基本上被A-离子消耗：所以溶液的pH值几乎不变；当加入一定量强碱时，溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。固体试剂的取用:瓶塞必须倒放在桌面上【防止药品腐蚀实验台或污染药品】。乙酸-EDTA缓冲液(pH5.5)
氨苄青霉素溶液配置：加入40ml灭菌水，充分混合溶解之后定容至50ml。多组分酸碱指示剂(溴甲酚绿-溴甲酚紫-甲酚红)
BMC原代分离步骤：1) 抽取人的外周血于肝素抗凝管中，取足5mL新鲜血液，加入PBS按1：1稀释血液（一般**管2mL+2mL）。2) 取淋巴细胞分离液5mL于15mL灭菌离心管中待用。3) 吸取稀释血液，在离分层液上方1cm处，沿试管壁徐徐加入，使稀释血液重叠于分层液上，并与分离液形成明显界面。4) 室温，离心2000rpm，20min。此时离心管中形成5层：较上面是血浆，血浆层和淋巴细胞分离液之间是淋巴细胞层呈白膜状。5) 小心吸取中间呈白膜状的单个核细胞层，尽量全部吸出单个核细胞。加5倍以上体积的PBS洗2次，每次离心1500rpm，10min。多组分酸碱指示剂(溴甲酚绿-溴甲酚紫-甲酚红)
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