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染色的原理和临床意义：在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色，常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS－D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS－D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理，同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间，较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞，因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒－单核细胞白血病 该染色法在急性粒－单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞，甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应，因此酯酶双染色反应在急性粒－单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液。正规糖原染色试剂盒厂家现货

糖原D-PAS染色液：使用方法：1、两张相同切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇入水。2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。另一张不用淀粉酶溶液处理，入水中1h作为对照。3、流水冲洗两张切片各5～10min。4、入过碘酸溶液，室温放置5～8min，一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。6、入Schiff Reagent，置于室温阴暗处浸染10～20min。7、自来水冲洗10min。8、入Mayer苏木素染色液，染细胞核1～2min。9、(可选)酸性乙醇分化液分化2～5s。10、自来水冲洗10～15min，更换蒸馏水清洗使其返蓝。11、二甲苯透明，中性树胶封固。天津如何使用糖原染色试剂盒生产厂家利用化学试剂与细胞内的某些物质进行化学反应。

PAS染色试剂配制及染色方法：1.材料与方1.1 实验材料新鲜小白鼠肝脏、肾脏标本各30例，均来自我室实验材料。1.2 主要试剂1.2.1 AAF固定液又称酒精醋酸福尔马林混合固定液，其配方：无水乙醇80mL，冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2 Carnoy固定液 氯仿300mL，冰醋酸100mL，95％酒精600mL。1.2.3 过碘酸溶液 0.5g过碘酸（HIO）溶于100mL蒸馏水或者70％酒精溶液中，或者按如下配方配制：过碘酸0.8g，95％乙醇70mL，醋酸钠0.27g，水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4 无色品红液（Schiff氏液） 在三角烧内加入蒸馏水500mL，煮沸后，在保持微沸的情况下，加入碱性品红2.5g，并不断摇动约5min（勿使之沸腾），使碱性品红彻底溶解（溶解液为深红色）。冷却到50℃时，过滤，加入1N盐酸50mL，再待冷却至25℃时加入偏重亚硫酸钠2.5g，塞住瓶口，摇动容器以充分混合（此时颜色明显变淡），然后避光放置或冰箱内24h。

染色的一般原则：因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用凋亡诱导处理的细胞做单阳对照，进行荧光补偿的调节。标记抗体常用荧光素 FITC，EGFP激发光：488nm发射光：525nm;使用面较广，价格便宜。PE激发光488nm 发射光575nm，此荧光的激发效率较佳，故此荧光得到的信号较强；检测某些弱表达的抗原，推荐使用此荧光素。价格较FITC昂贵。APC激发光633nm， 发射光660nm，在配有双激光的流式细胞仪上，此荧光染料可与7-AAD或PI共同使用来避开自带绿色荧光的样本。流式细胞仪相关试剂盒。糖原染色显示在肝或心肌细胞内有大量糖原存在即可确诊。

糖原及粘液染色法：操作方法：（1）石蜡切片脱蜡至水。（2） 0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液（过碘酸再结晶应重新配制使用）。（3）蒸馏水洗，70%酒精洗。（4）Schiff氏液15-30分钟。（Schiff氏液从冰箱取出升至室温使用）（5）流水冲洗10分钟。（6）苏木素浸染细胞核2-3分钟。（7）脱水、透明、封盖。结果：糖原呈红色，细胞核呈蓝色。试剂 配制：（1）0. 5%过碘酸（HIO4）水溶液或70%酒精溶液。（2）Schiff氏 试剂 。碱性品红 1g蒸馏 水 200ml1N盐酸（98.3ml比重1.16盐酸，加入 蒸馏 水成1000ml） 20ml偏重亚硫酸钠或钾 1g碱性品红1g加入200ml蒸馏水，搅拌加热沸腾，待冷却至50℃过滤，加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。置于暗处，两天后溶液变桔黄色或草黄色，然后加入少量活性碳并震荡、过滤，此时溶液应为无色。保存冰箱备用。溶液如显浅红色或草黄色，染色效果较差。推荐用于骨和软骨的染色。山东哪家生产糖原染色试剂盒销售厂家

对某种盐基性人工合成染料如硫堇或甲苯胺蓝有异染性。正规糖原染色试剂盒厂家现货

糖原D-PAS染色液注意事项：1、切片脱蜡应尽量干冷，否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。2、过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时温度以18～22℃较佳。3、试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)、应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多的阳光和空气，使用前较好提前取出恢复到在室温后，避光暗处使用。4、酸性乙醇分化液应经常更换新液，其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够。5、在过碘酸溶液和Schiff Reagent中作用时间非常重要，该依据切片厚薄、组织类别等决定。6、况冶切片染色时间尽量要短。正规糖原染色试剂盒厂家现货

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