液体培养基接种向肉膏蛋白胨液体培养基中接种少量菌体时,其操作步骤基本与斜面接种时相同,不同之处是挑取菌体的接种环放入液体培养基后,应在液体表面处的管内壁上轻轻磨擦,使菌体从环上脱落,混进液体培养基,塞好试管塞后,摇动液体,使菌体在液体中分布均匀,或用试管振荡器混匀。向液体培养基中接种量大或要求定量接种时,可将无菌水或液体培养基注入菌种试管,用接种环将菌苔刮下,再将菌种悬液以无菌吸管定量吸出加入,或直接倒入液体培养基。如果菌种为液体培养物,则可用无菌吸管定量吸出加入或直接倒入液体培养基。整个接种过程都要求无菌操作。普遍使用液体试剂的基本原理,因此液体试剂在药剂学上的应用具有普遍意义。红霉素溶液(Erythromycin,50mg/ml)
pH缓冲溶液的效能指标:pH缓冲溶液抵抗外加强酸、强碱的能力可以用缓冲容量β来表示,缓冲容量的意义是,使1L缓冲溶液的pH增大1个单位时需加入的强碱(NaOH)的物质的量(mol),或减小1个pH单位时时需加入的强酸(HCl)的物质的量,显然β越大,缓冲外加强酸强碱的能力就越大。β与pH、总浓度C及共轭弱酸碱的浓度比有关。式中的C为弱酸+弱酸盐(或弱碱+弱碱盐)的总浓度,显然,总浓度越大,缓冲能力就越大。式中的两个δ分别为弱酸HA、弱酸根A-(又称共轭碱)的分布分数值,δ定义为其平衡浓度与总浓度之比(我以前在论坛中曾作过介绍),它们也是pH值的函数。数据学上可以证明:恒定C时,当两个分布分数值均等于0.5时,缓冲容量较大,其实用意义是:选择缓冲溶液体系时,应该选弱酸与弱酸盐的浓度比接近1,而pH值仍能满足配制要求的体系,对于弱碱及弱碱盐溶液,也有同样的要求。乙酸钠缓冲液(2mol/L,pH3.6-5.0)冬季检测试剂盒的正确保存:血清标本如是以无菌操作别离。
BMC原代分离步骤:1) 抽取人的外周血于肝素抗凝管中,取足5mL新鲜血液,加入PBS按1:1稀释血液(一般**管2mL+2mL)。2) 取淋巴细胞分离液5mL于15mL灭菌离心管中待用。3) 吸取稀释血液,在离分层液上方1cm处,沿试管壁徐徐加入,使稀释血液重叠于分层液上,并与分离液形成明显界面。4) 室温,离心2000rpm,20min。此时离心管中形成5层:较上面是血浆,血浆层和淋巴细胞分离液之间是淋巴细胞层呈白膜状。5) 小心吸取中间呈白膜状的单个核细胞层,尽量全部吸出单个核细胞。加5倍以上体积的PBS洗2次,每次离心1500rpm,10min。
单个核细胞分离步骤:Ficoll试剂混匀:首先将Ficoll试剂瓶颠倒多次混匀,使用注射器法吸取Ficoll分离液(去掉聚丙烯盖,插入注射器针头)或吸管法吸取Ficoll分离液(去掉聚丙烯盖,拉起铝环,拉开金属密封,移除银环。拿掉橡胶密封,无菌操作吸取需要的Ficoll分离液)。1.离心管加入3mLFicoll分离液。2.稀释过的血液样本小心铺到Ficoll分离液上面。注:缓慢加入样本,小心不要和Ficoll分离液混合,勿搅动。1.室温条件,水平转子离心400g,离心30-40min,可见细胞分层。2.用无菌吸管吸掉上层血浆和血小板,不要碰到单个核细胞层。3.无菌吸管转移单个核细胞层到无菌离心管。配制ph计的3mol/L的KCL溶液 ph计的ph电极在使用前都是被护套里的保护液保护着。
利福平溶液片有什么作用:【性状】本品滴丸为暗红色,缓冲液为无色澄明溶液。 【作用类别】 【药理毒理】利福平为半合成广谱杀菌剂,与依赖于DNA的RNA多聚酶的β亚单位牢固结合,克制细菌RNA的合成,防止该酶与DNA连接,从而阻断RNA转录过程。 【药代动力学】利福平为脂溶性,易于进入敏感菌细胞内杀死敏感菌。眼部给药吸收后可弥散至大部分体液和组织中,本品在肝脏中可被自身诱导微粒体氧化酶作用而迅速去乙酰化,成为具有克菌活性的代谢物,然后经水解形成无活性的代谢物由尿排出。本品主要经胆汁和肠道排出,亦可经乳汁排出。利福平不能经血液透析或腹膜透析除去。每种细胞对G418的敏感性不同,一般变动在100ug/ml~1000ug/ml范围。乙酸钠缓冲液(2mol/L,pH3.6-5.0)
如果菌种为液体培养物,则可用无菌吸管定量吸出加入或直接倒入液体培养基。红霉素溶液(Erythromycin,50mg/ml)
淋巴细胞亚群及其功能:T淋巴细胞及其分类主要应用抗T细胞表面抗原McAb.根据T淋巴细胞表面分化抗原将成熟T细胞分为CD4+、CD8-和CD4-、CD8+两大亚群,T淋巴细胞的功能与表现型之间的对应关系是相对的,其免疫活性可能受“微环境”的影响,并受MHC抗原的制约,许多研究证明,CD4+T细胞具有杀伤活性,介导Ι类抗原不相容时的靶细胞溶解。TU等研究表明,CD4+的细胞毒活性存在两种完全不同的机理,并证明TH1和TH2的细胞毒活性不同。前者强,后者弱或无活性。Dennert等发现,克隆化的T淋巴细胞具有辅助,细胞毒活性和迟发型超敏反应作用,这种功能的多样性有赖于所采用的分析方法。CD4+细胞识别Ι类MHC抗原,其效应的发挥也受Ι类抗原的制约;CD3+细胞识别Ι类MHC抗原,发挥免疫效应也受其控制。红霉素溶液(Erythromycin,50mg/ml)