糖原染色法:染色原理细胞胞浆中存在糖原或多糖类物质(如糖蛋白、粘多糖、糖脂、粘蛋白等),过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化为二醛基,其与Schiff试剂中的无色品红结合后呈现紫红色,沉积在细胞内多糖所在之处。染色步骤:1.组织石蜡包埋切片后脱蜡至水,蒸馏水洗2min(细胞爬片4%多聚甲醛固定后水洗);2.滴加过碘酸溶液,氧化5min;3.蒸馏水洗10min;4.滴加Schiff试剂,侵染10-20min;5.倾去Schiff试剂,流水冲洗10min;6.滴加苏木素染色液,染核1-2min;7.流水冲洗5min;8.酸性乙醇分化液分化待冷却至50℃过滤,加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。山东提供糖原染色试剂盒生产厂家
特殊染色方法选择应遵循:染色结果对比鲜明、结果易保存、阳性突出的染色方法;突出的阳性结果在于所选择方法表达的色调及如何进行背景的复染。结果能够长时间保存、不褪色对于后续的调阅、科研、论文均较为有利。如显示淀粉样物质,甲基紫染色法虽然流程较为简单,但结果不易保存,阳性对比度相对不突出;刚果红染色法阳性结果明显,长时间保存不褪色,流程简便,更是实用的方法。如显示弹性纤维,地衣红染色染液虽配制较方便,但结果对比度相对欠佳,与其他几个染色法相比,多不选择使用。江苏品质好的糖原染色试剂盒进货价对临床样本进行染色,以便样本的进一步筛查和检测。
医院检验中心糖原染色操作规程:1.雪夫氏试剂:400m1蒸馏水煮沸除去C02,逐渐加碱性品红2.08溶解后,待冷却至60℃,加1mm01儿HCl40ml,再加偏重亚硫酸钠(NaHSO:)4g,次日加活性碳1.5g,放置半天后过滤。配好后液体为无色透明,保存于4℃冰箱中。2.过碘酸作用液:过碘酸1g溶于蒸馏水100ml中,或取过碘酸钾(1tI04)0。698加蒸馏水100ml,微加热使溶解,再加浓硝酸0.3m1,置冰箱中保存。3.固定液:95%乙醇90ml与甲醛10m1混匀。4.20g/l甲基绿:甲基绿2g溶于100m1蒸馏水。[操作]_x005f_x005f_x005f_x000c_(1)新鲜或陈旧血片、骨髓片于固定液内10分钟。(2)水洗数次后,对照片先用唾液消化30分钟,也可在同一片,在其中间用蜡笔划界,一半做对照,另一半做测定。(3)水洗后,滴加过碘酸数滴于涂片上,作用10分钟后,再水洗数次。
糖原染色(PAS):(1)原理:过碘酸将血细胞内的糖原氧化,生成醛基。醛基与雪夫液中的无色品红结合,形成紫色化合物,定位于细胞质中。(2)操作方法:干燥涂片,滴加甲醛固定液固定10分钟,流水冲洗,晾干。滴加过碘酸溶液作用20分钟,流水冲洗,晾干。滴加雪夫液作用60分钟,流水冲洗,晾干。滴加甲基绿溶液复染10分钟,流水冲洗,晾干镜检。(4)临床意义:根据染色阳性程度和阳性物形态鉴别主要用于急性淋巴细胞白血病和急性非淋巴细胞白血病鉴别,还有助于红白血病与巨幼细胞贫血和溶血性贫血的鉴别诊断。无水酒精渗透较慢,而且容易产生极化。
糖原染色(过碘酸-雪夫反应)原理多糖中乙二醇基经过碘酸氧化成二醛基与无色品红结合,形成紫红色化合物。沉积于含糖原的胞浆中。结果:胞浆中出现弥散状,颗粒状,块状红色为阳性。无红色颗粒为阴性_x005f_x000c_临床意义1、正常血细胞的染色反应粒系:原粒细胞糖原含量很低,随着细胞的分化成熟,糖原含量逐增加,至成熟阶段糖原含量十分丰富。淋巴细胞:糖原常凝聚成颗粒或块状。巨核细胞-血小板系统:PAS反应呈粗大的紫色颗粒或团块。正常红系:阴性。对疾病诊断的意义白血病类型的鉴别:急性粒细胞白血病:原始粒细胞呈阴性或弱阳性反应,以弥散性为主;急性淋巴细胞白血病原、幼淋巴细胞多呈粗颗粒、块状阳性反应~帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞,腺细胞呈阳性反应。浙江哪家提供糖原染色试剂盒推荐厂家
可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。山东提供糖原染色试剂盒生产厂家
糖原染色临床意义:1、急性淋巴细胞白血病、淋巴组织恶性增生性疾病、红白血病、戈谢病的原始细胞呈强阳性反应或阳性反应;缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍、骨髓增生异常综合征亦可呈阳性反应;急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、良性淋巴细胞增多症、尼曼-皮克细胞呈阴性反应或弱阳性反应。巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等,幼红细胞为阴性反应。偶有个别幼红细胞呈阳性反应。2、帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞,巨核细胞呈强阳性反应;霍奇金细胞呈弱阳性或阴性反应。3、帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞,腺细胞呈阳性反应。山东提供糖原染色试剂盒生产厂家
染色试剂盒:GUS基因就是β-葡萄糖苷酸酶基因(β-glucuronidase),是从大肠杆菌K-12菌株分离出的一种酸性水解酶。该基因产物为β-葡萄糖苷酸酶,属水解酶类,相当稳定而不易降解,以β-葡萄糖苷酸酯类物质为底物,其反应产物可用多种方法检测出来。由于绝大多数植物没有检测到葡萄糖苷酸酶的背景活性,因此这个基因被普遍应用于基因调控的研究中。根据GUS基因检测所用的底物不同,可以选择三种检测方法:组织化学法、分光光度法和荧光法(灵感度为分光光度检测法较高)。其中较为常用的是组织化学法。拥有千锤百炼的专业人才队伍,保证实验快速、有效的完成。如何使用糖原染色试剂盒生产厂家染色的一般原则:1.荧...