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鼠尾胶原简介：鼠尾I型胶原蛋白（Collagenfromrattail,TypeI）系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备，纯度达到95%以上，可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被，特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养；也可用于制备三维胶原凝胶，使细胞在模拟的三维环境中生长。质量标准：1、SDS-PAGE分析纯度大于95%。2、无菌检验结果为阴性。3、本品2μg/cm2包被细胞培养皿后培养PC-12细胞，贴壁及生长正常。4、本品浓度1mg/mL，pH7.0时形成具有一定强度的三维胶原凝胶，NIH-3T3细胞在三维凝胶内生长正常、PC-12细胞在三维凝胶表面生长正常。鼠尾胶原蛋白的用途是什么：顾名思义，鼠尾胶原蛋白是从老鼠尾巴提取出来的物质。唐山鼠尾胶原厂家推荐

鼠尾胶原使用方法：1、细胞培养器皿的表面包被以包被浓度为2μg/cm2为例，用无菌0.006mol/L乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/mL。加到相应的培养器皿中，确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面。开盖在超净台上过夜晾干，也可以在室温放置1小时后，用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三个月以上的时间。三维胶原凝胶的制备：A、无细胞三维胶原凝胶的制备（以配制1mg/mL三维胶1mL为例）将200μL本品加到置于冰浴的离心管中，加入690μL双蒸水，然后加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100μL10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中（混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要测定pH值）。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。金华长沙鼠尾胶原利用鼠尾胶原可以构建类似物，该模型是进行皮肤部位型培养和制作复合皮的关键与基础。

使用方法：1、细胞培养器皿的表面包被：以包被浓度为2μg/cm2为例，用无菌0.006mol/L乙酸将胶原蛋白稀释到0.012mg/mL。加到相应的培养器皿中，确保胶原蛋白溶液铺满器皿的表面。开盖在超净台上过夜晾干，也可以在室温放置1小时后，用PBS洗3~4次后直接使用。包被好的器皿在4~25℃至少可保存三个月以上的时间。2、三维胶原凝胶的制备：A、无细胞三维胶原凝胶的制备（以配制1mg/mL三维胶1mL为例）将200μL本品加到置于冰浴的离心管中，加入690μL双蒸水，然后加到12μL0.1mol/LNaOH中（如果反过来把12μL0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结），立即混匀。再加入100μL10×PBS或10×培养液，混匀后立即加到培养器皿中（混匀后pH为7左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要测定pH值）。将培养器皿在室温放置20min待胶凝固后，转移到培养箱内。如果配制中使用的是10×PBS，使用前需要加入适当体积的细胞培养液预平衡。

鼠尾胶原备用胶凝程序：1）在冰上放置以下物品：胶原蛋白I、无菌10×PBS、无菌蒸馏水、无菌1MNaOH。2）确定胶原蛋白I待使用溶液所需的较终浓度的体积。3）在冰上放置无菌管以收存胶原蛋白I。4）在无菌条件下执行以下步骤。4.1加入10×PBS（终体积/10）mL4.2计算要使用的胶原蛋白I的体积（不要添加到管中直到步骤4.6为止）终体积x终胶原蛋白I浓度（mg/mL）。4.3向10×PBS溶液中加入（要加入的胶原体积×0.023）mL的无菌冰冷1MNaOH。4.4向4.3溶液中加入下述体积的无菌冰冷蒸馏水：添加蒸馏水体积=V（终）—V（胶原蛋白）—V(10×PBS）—V（1MNaOH）4.5混合管中的物质并放入冰中。4.6加入胶原蛋白I并计算体积，混匀，冰上备用。5）胶原蛋白I溶液可立即使用或在冰上放置2-3小时。6）使用时，无菌条件下将溶液加入到细胞培养装置中37°C凝胶30min。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁，涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录，并且制作简便，成本低廉。从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。

鼠尾胶原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事项：三维胶原的制备鼠尾胶原蛋白型在浓度1mg/ml以上，pH左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中，在成胶过程中需要加入0.06体积的0.1mol/LNaOH来中和。需要的溶液（均需要无菌、预冷）10mg/L酚红用于pH指示）0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一般不用)，双蒸水200ul鼠尾胶原蛋白型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中，加入690ulH2O12ul0.1mol/LNaOH12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中，会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结）立即混匀。再加入100ul10PBS10培养液，混匀后立即加到培养器皿中(混匀后pH左右，如果PBS或培养液中没有加酚红，初次使用时需要用pH试纸测试)。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。徐州开封鼠尾胶原

将黏稠的胶体溶液进行高速冷冻离心处理。唐山鼠尾胶原厂家推荐

鼠尾胶原，10mg包装，配制方法如下：1.配0.1M的乙酸溶液100ml。即取575ul冰乙酸加超纯水至100ml，容量瓶配制比较准确。2.用吸管吸取10ml刚配好的0.1M乙酸溶液（不要用*加，吸十次不如加一次z准确），加入盛胶原的瓶中，轻轻颠倒，不要震荡，蛋白容易起泡。几分钟即可，蛋白质非常好溶解。3.将胶原溶液移入事先压好的玻璃瓶中，比青霉素瓶大点的就行。用*在瓶底加1ml氯仿，打到一档就行，避免加入气泡。然后4度过夜除菌。4.第二天将上层胶原溶液分装进EP管中。用封口膜封口，4度保存，勿冷冻。唐山鼠尾胶原厂家推荐