鼠尾胶原是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用,同时它也是一种天然的黏附剂,当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬片时,可在瓶底涂一层胶原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。通过本实验可掌握鼠尾胶原的制备方法,以及如何切割小玻片,并利用鼠尾胶原将其固定于培养瓶内。实验设备及材料:大鼠尾巴、剪刀、镊子、止血钳、弯头吸管、平皿、三角烧瓶、烧杯、量筒、天平、生理盐水、75%酒精、0.1%醋酸溶液、盖玻片、培养瓶、钻石笔、鼠尾胶原。实验内容:1、制备鼠尾胶原。2、切割小玻片。3、利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。论鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上,pH 7左右时可形成具有一定强度三维胶。温州鼠尾胶原供应商
实验应用:鼠尾胶原为底物的人鼻腔纤毛上皮细胞培养模式的建立目的建立以鼠尾胶原为贴附底物的人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式,为人鼻腔黏液纤毛运输系统的研究提供科学有效的方法.方法制备鼠尾胶原并铺片,以鼠尾胶原为贴附底物组织块培养法培养人鼻腔纤毛上皮细胞,培养7天时进行HE染色及扫描电镜和透射电镜观察细胞形态和结构,应用高速摄像技术测量纤毛摆动频率.结果鼠尾胶原要平坦均匀,平均厚度约为1mm;HE染色可见上皮细胞呈单层向周围爬开;扫描电镜下见纤毛上皮细胞呈不规则多角形,纤毛周围可见微绒毛;透射电镜下可见纤毛上皮细胞间为紧密连接;同一细胞任意两点纤毛摆动频率是相同的;同一来源体外培养的钩突和下鼻甲的纤毛摆动频率是相同的.结论以鼠尾胶原为贴附底物人鼻腔纤毛上皮细胞的体外培养模式的成功建立,为今后研究鼻内用药对纤毛清理功能的影响提供了良好的方法和途径。广州正规鼠尾胶原进货价它是研究成纤维细胞与细胞外基质之间以及细胞之间相互作用的良好模型。
胶原蛋白的提取方法:酸法提取:酸法提取主要采用低离子浓度酸性条件浸渍处理原料,从而破坏分子间的盐键和希夫碱,而引起纤维膨胀、溶解。作为溶剂使用的酸,主要有盐酸或亚硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、柠檬酸和甲酸等。酸法是提取胶原蛋白比较常用和有效的方法,用酸法提取的胶原较大程度地保持了其三股螺旋结构。此法处理快速,所得产品的分子量是连续的,适用于医用生物材料及原料的制备,但产品得率低,设备腐蚀严重,污染重。赵苍碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下从牛腱中提取胶原蛋白,得到高纯度的胶原蛋白溶液。
三维胶原的制备:鼠尾胶原蛋白I型在浓度1mg/ml以上,pH7左右时可形成具有一定强度三维胶,建议成胶浓度1-2mg/ml。胶原蛋白溶解于0.006mol/L乙酸中,在成胶过程中需要加入0.06X体积的0.1mol/LNaOH来中和。需要的溶液(均需要无菌、预冷):10xPBS(可含10mg/L的酚红用于pH指示)或10x培养液,0.1mol/LNaOH,0.1mol/L乙酸(一般不用),双蒸水A.不含细胞的三维胶原的制备(以配制1毫升,1mg/ml三维胶为例):将200ul鼠尾胶原蛋白I型(5mg/ml)加到置于冰浴的离心管中,加入690ulH2O。然后加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反过来把12ul0.1mol/LNaOH加到胶原溶液中,会由于NaOH不能迅速混匀而产生局部的胶原凝结),立即混匀。鼠尾胶原,是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用。
胶原蛋白占人体蛋白质总量的三分之一,不论来源于哪一种动物或哪一种组织的胶原都有许多共同特性。胶原蛋白可分为20几个亚型,但为常见的为I、II、III型胶原蛋白,即间质胶原蛋白。其中I型为丰富且品质优良。划重点:任何动物的胶原都有许多共性,I型胶原蛋白为丰富且品质优良,鼠尾胶原蛋白是I型胶原蛋白。于是,动物中心就进行了有关“耗子尾汁”的发明:一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法并在说明书中给出了原因:“一般的生物体中提取的胶原蛋白多为混合型,之前多从牛皮、猪皮、牛腱中提取,但这类胶原蛋白不仅有油脂等其他杂质,胶原蛋白就像骨骼中的一张充满小洞的网,它会牢牢地留住就要流失的钙质。石家庄鼠尾胶原哪家好
吸去生理盐水,将尾腱称重(0.5-1克)。温州鼠尾胶原供应商
一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法:随着现代医学的发展,各种医用耗材的更新换代也是日新月异。止血材料是常见的医疗器械产品。但是现今市面上的止血材料不光存在着容易引起伤口传染的缺点;同时还存在着容易与伤口粘附不易去除,导致伤口溃烂,或者因为粘附导致传染;再次就是止血材料多是通过吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血,很少有止血材料是使用能够自身具有止血性质的材料来生产的。现今市面上的可吸收止血材料有氧化纤维素、α-氰基丙烯酸酯类组织胶、医用止血明胶等,但是都有各自的缺点。如氧化纤维素可引起组织周围PH值升高;α-氰基丙烯酸酯类组织胶降解过程中释放出氰和甲醛等有毒物质;医用止血明胶黏附性较差,易脱落,因其吸收血液后膨胀可能压迫伤口周围组织等。温州鼠尾胶原供应商
鼠尾Ⅰ型胶原:选择适当的骨修复材料是治好骨缺损的中心环节。目前,临床上常用的有人工骨移植、自体骨移植和同种异体骨移植。其中,人工骨材料多为磷酸三钙、半水硫酸钙等含有钙和磷的无机矿物材料[1-2],由于不含自体骨组织中的有机大分子Ⅰ型胶原蛋白,其临床疗效远远低于自体骨组织。但是,自体骨移植和同种异体骨移植均来源于人类自身骨组织,数量有限,难以满足临床需要。因此,研发与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料,成为全世界骨组织工程学者孜孜以求的目标。由于天然骨组织是Ⅰ型胶原蛋白和羟基磷灰石钙生物矿化的产物,在分子结构上,羟基磷灰石钙晶体是以Ⅰ型胶原纤维为模板,呈片状镶嵌在胶原纤维分子间隙,...