配制ph计的3mol/L的KCL溶液 ph计的ph电极在使用前都是被护套里的保护液保护着,是为了保持其原有的ph电势平衡不变,为了测量时会更加精确。这里面就是PH电极的保护液,即 3mol/L的KCL溶液。所以要自己学会如何配置,使ph电极浸泡在保护液里,这样就能快速回复其活性,又能很好的测量了。配制ph计保护液——3mol/L的KCL溶液步骤: 1、计算:KCL摩尔质量74.5g/moL, 则KCL质量=3mol×74.5g/mol=223.5g; 2、 称量:用分析天平称量KCL=223.5g,注意分析天平的使用; 3、 溶解:在烧杯中用100ml蒸馏水使之完全溶解,并用玻璃棒搅拌; 4、 转移,洗涤:把溶解好的溶液移入1000ml容量瓶,用容量瓶瓶口较细的。PBS:PBS粉剂每袋加ddH2O定容至1000mL,调pH7.2,高压灭菌,4℃保存备用。磷酸盐缓冲液(pH6.8)
pH缓冲溶液有何用途:(1)pH测量前标定校准pH计。(2)用以检定pH计的准确性,例如,用pH=6.86和pH=14.00,标定pH计后,将pH电极插入pH=9.18溶液中,检查仪器显示值和标准溶液的pH值是否一致。(3)在一般精度测量时检pH计是否需要重新标定。pH计标定并使用后也许会产生漂移或变化,因此在测试前将电极插入与被测溶液比较接近的标准缓冲液中,根据误差大小确定是否需要重新标定。(4)检测pH电极的性能。如何配制pH标准缓冲溶液:对于一般pH测量,可使用成套的pH组冲试剂(可配制250mL),配制溶液时,应使用去离子水,并预先煮沸15~30分钟,以除去溶解的二氧化碳。剪开塑料袋将试剂倒入烧杯中,用适量去离子水使之溶解,并冲洗包装袋,再倒入250mL容量瓶中,稀释至刻度,充分摇匀即可。过氧化氢酶(CAT)检测试剂盒(钼酸铵比色法)从试剂瓶取用试剂,用左手持量筒(或试管),并用大姆指指示所需体积刻度处。
主要试剂配制:(1)PBS:PBS粉剂每袋加ddH2O定容至1000mL,调pH7.2,高压灭菌,4℃保存备用。(2)RPIM-1640培养基:临用前根据需要加15%胎牛血清,较后按1%体积分数加入双抗贮存液(青霉素+链霉素),使青霉素和链霉素的终浓度分别为100 U/mL和100 U/mL,置于4℃冰箱保存。(3)台盼蓝染液:称取4g台盼蓝,于研钵中用少量双蒸水研磨,加双蒸水至100mL,1500rpm离心15min,吸取上层液,即为4%水溶液。用前,用1.8%氯化钠溶液稀释1倍,即为2%台盼蓝染液。
BCA蛋白检测试剂盒是进行蛋白质浓度测定的常见的方法之一。BCA蛋白定量的主要原理是:蛋白质在碱性条件下,可以将二价Cu2+离子还原成一价Cu+离子。产生的一价Cu+离子可以与BCA(Bicinchoninicacid)试剂结合,终生成紫色的复合物。该复合物在562nm处有很强的吸收峰。复合物的多少与蛋白质的浓度呈接近的线性关系。BCA蛋白检测试剂盒有许多优点:检测的灵敏度高,检测的蛋白质浓度下限可达20μg/mL。线性范围广,在20-2000μg/mL的范围内,呈接近的线性关系。兼容性良好,产品可以兼容的化学物质非常普遍。科研实验中试剂取用应注意事项:取用少量的液体—使用胶头滴管。
检测试剂盒实验如何改进错误?评价试剂的实用性。试剂的稳定性对准确度非常重要。在启用检测试剂盒之前,应重复检测阴性和阳性对照品和样品,试剂只在试剂符合要求后才干使用。操作前仔细阅读检测试剂盒说明书。严格按照说明书要求进行标准化操作。不同批号的试剂不混合。值得改善的是,只要通过反复的试验,如洗盘的数量,才干加以改善。加样要准确、快速。样品添加的不准确度和酶制剂用量的不确认度直接影响显色效果。此外,显色深度和A值的确认与显色剂和终液体的加入量有关,因此样品的装载应慎重。检测试剂盒需要在必定时间内完结采样的试验,如果采样速度慢,会呈现差错,试剂会露出很长时间,特别是当室温过高时,保质期会缩短乃至失效。磷酸缓冲盐溶液可调整的适宜pH缓冲作用。乙酸钠缓冲液(2mol/L,pH3.6-5.0,无菌)
液体培养基接种向肉膏蛋白胨液体培养基中接种少量菌体时,其操作步骤基本与斜面接种时相同。磷酸盐缓冲液(pH6.8)
检测试剂盒实验注意事项有哪些?正式试验时,应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件,待检样品应作一式二份,以保证实验结果的准确性。有时本底较高,说明有非特异性反应,可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。在实验中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之间。吸附温度,时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18~24小时。蛋白质包被的浓度需进行滴定:即用不同的蛋白质浓度(0.1、1.0和10μg/ml等)进行包被后,在其它试验条件相同时,观察阳性标本的OD值。选择OD值大而蛋白量少的浓度。对于多数蛋白质来说通常为1~10μg/ml。磷酸盐缓冲液(pH6.8)