稳定转染细胞的筛选：1、转染48 h后，用含适当浓度的潮霉素B筛选培养基来传代细胞（直接传代或者稀释后传代）。注意：细胞处于活跃分裂状态时的杀伤效果较好。但细胞过于稠密，其效率会降低，较好将细胞稀释至丰度低于25%。2、每隔3-4天更换含有药物的筛选培养液。3、筛选7天后观察并评估细胞克隆（集落）的形成情况。集落的形成可能还需要一周或者更多的时间（取决于宿主细胞类型，转染，以及筛选效果）。4、挑取并转移5-10个抗性克隆于35mm细胞培养板，继续用含药物的筛选培养液维持培养7天。5、后续更换正常培养基培养即可。液体试剂用水应以蒸馏水为宜。DNase/RNase混合液
单个核细胞分离液：反复着床失败(recurrent implantation failure, RIF)已成为阻碍妊娠率进一步提高的瓶颈问题。PBMCs (peripheral blood mononuclear cells)是指外周血单个核细胞包括T淋巴细胞、B淋巴细胞和单核细胞等,研究发现皮下注射丈夫或第三者外周血淋巴细胞主动免疫治好能提高IVF-ET反复着床失败患者的妊娠率和活产率。在着床前宫腔灌注自体单个核细胞（PBMCs）（部分文献写为单核细胞）联合HCG用于反复着床障碍的患者其具有操作简单、一次完成、安全简便、无反应等优点。对于反复着床失败患者在胚胎移植前给予宫腔灌注HCG处理过的PBMCs免疫治好能明显提高患者的胚胎着床率和妊娠率。壮观/奇霉素溶液(Spectinomycin,50mg/ml)利福平溶液怎么配制：加入40ml甲醇，振荡充分混合溶解之后定容50ml，可以涡旋。
hochest染色和DAPI染色有什么区别：1、每个染料有自己独特的激发谱线和发射谱线.这也是以上两个染料的主要区别. 另外Hoechest 33258 是膜透性的,因此在活细胞时候能轻松进入;DAPI是半透性的,有选择性的进入.因此Hoechest 33258 一般用来染活细胞,可以长驱直入;DAPI一般是染固定细胞.2、两者都可以用紫外看，参见以下的激发发射波长Hoechst 33258的较大激发波长为346nm，较大发射波长为460nm；Hoechst 33258和双链DNA结合后，较大激发波长为352nm，较大发射波长为461nm。DAPI的较大激发波长为340nm，较大发射波长为488nm；DAPI和双链DNA结合后，较大激发波长为364nm，较大发射波长为454nm。
亚甲基蓝染色液(1%)使用说明 货号：G1303 规格：100ml 保存：室温，避光，12 个月。 产品说明： 亚甲基蓝(Methylene blue)又称美蓝、次甲基蓝、次甲蓝等，是一种芳香杂环化合物。含水 亚甲基蓝的分子式为 C16H24ClN3O3S，分子量为 373.9，CAS 号为 7220-79-3。亚甲基蓝染色 液常用于丝绸、纸张、细菌、细胞等染色。因其容易氧化，染色结果不宜长久保存。 操作说明：（光供参考） 1、 样品处理 （1） （2） （3） 对于石蜡切片：常规脱蜡复水。 对于冰冻切片：蒸馏水 2min。 对于培养细胞：先用 4%多聚甲醛固定，然后蒸馏水洗涤 2min，较后 换用新鲜的蒸馏水，再洗涤 2min。 2、 美蓝染色 （1） （2） 染色结果： Methylene blue Stain(1%)染色。 用蒸馏水或自来水充分洗涤，进行观察和拍照。 组织或细胞 蓝色 注意事项： 1、 开始次使用本试剂时建议先取 1～2 个样品做预实验。 2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。检测试剂盒在生物医学各领域的使用规模日益扩展。
使用方法：1， 固定细胞或组织样品，经过固定后，适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，可先进行免疫荧光染色，染完毕后再进行染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行染色。 2， 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，混匀。 3， 室温染色 5-10 分钟。 4， 吸除染色液，生理盐水洗涤 2-3 次，每次 3-5 分钟。 5， 置于荧光显微镜下观察，激发波长 360-400nm。 溶液注意事项： dapi 被普遍认为具有致性，操作时应戴手套，并避免交叉污染。 本产品需避光，并尽量避免反复冻融。荧光染料都存在淬灭问题，建议染色后尽量当天完成检测。 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。淋巴细胞分离液是一种根据细胞密度差异，借助离心产生的重力加速度，进行细胞的分离纯化的常用试剂。溶出介质(EP,pH7.6)
丁胺卡那霉素给药说明：长期用药可能导致耐药菌过度生长。DNase/RNase混合液
PBS是磷酸缓冲盐溶液的简称，不只伪狂犬病毒要用它稀释，一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释。原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用，蒸馏水不具有盐平衡作用，可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用，对完整的、具有活性的物质不能保证其在适条件下参与生物反应，所以使用PBS是。PBS也不是的，有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高，就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分，维持的条件保证生物活性物质保持其完整的特性。DNase/RNase混合液
