缓冲溶液的计算分为两大类:(1)已知共轭酸碱的浓度或质量,计算pH值。(2)已知pH值,计算配制时要满足的浓度和质量配制缓冲溶液时,有多种组合的方法,常见的有以下几种(1)两种溶液混合:如,NH3+NH4Cl溶液,NaOH溶液 +NH4Cl溶液,NH3+HCl溶液。(2)固体试剂+溶液:如,NH3+NH4Cl固体,NaOH固体 +NH4Cl溶液,HAc+NaAc固体。(3)两种固体试剂溶解混合:如,NaOH固体 +NH4Cl固体,Na2CO3固体+NaHCO3固体。由此可见,缓冲溶液的计算类型是很丰富的。实验中的配制一般是按共轭酸碱的量来称取或量取试剂后,再溶解混合到指定体积。但分析化学学习中的计算类型则可以演绎出十几种计算情况。室温条件,水平转子离心400g,离心30-40min,可见细胞分层。MES buffer(0.05mol/L,pH4.0-9.0)
丁胺卡那霉素给药说明:(1)应监测血药浓度,尤其新生儿、老年和肾功能减退的患者,本品的有效治好浓度范围为15—25μg/ml,应避免高峰血药浓度持续在35μg/ml以上和谷浓度超过5μg/ml。(2)不能测定血药浓度时,应根据测得的肌酐除去率调整剂量。(3)给予开始饱和量(7.5mg/kg)后,有肾功能不全、前庭功能或听力减退的患者所用维持量酌减,即剂量不变,延长给药间期;或给药间期不变,每次剂量减少或停用本品。其维持量可按下式计算。①延长给药间期(小时),每次用量不变(7.5mg/kg),给药间期=患者血肌酐(mg/100ml)×9或②减少每次给药量,每12小时用药一次:每次剂量=患者肌酐除去率(ml/min)×7.5(mg/kg)/正常人肌酐除去率(ml/min)。由于阿米卡星在体内不代谢,主要经尿排出,因此肾功能减退的患者可能引起药物积聚达中毒浓度。IEF考马斯亮蓝染色液如果试剂符合基准物质的要求 (组成与化学式相符、纯度高、稳定),可以直接配制标准溶液。
G418溶液是什么:G418(G418,G 418,G-418,Geneticin)是一种氨基糖苷类 ,这种氨基糖类的结构和新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似,在分子遗传试验中,是稳定转染常用的抗性筛选试剂。它通过克制转座子Tn601,Tn5的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞产生东西,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。当neo基因被整合进真核细胞DNA后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA ,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的表达 ,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。G418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以普遍应用。溶液配制:G418溶液配制时,一般溶于水配成50mg/ml的原液,使用时再稀释使用。在筛选菌类和藻类时,一般用5mg/l 的浓度或者更低。筛选哺乳动物细胞是大可400mg/l的浓度。
检测试剂盒的要点有哪些?在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。一切试剂瓶盖须盖紧以避免蒸腾和污染,试剂避免受到微生物的污染,由于蛋白水解酶的干扰将导致出现过错的成果。当心汲取试剂并严格遵守给定的孵育时刻和温度。请注意在汲取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,*个孔与后一个孔加样之间的时刻距离假如太大,将会导致不同的 “预孵育”时刻,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且,洗涤不充分将影响实验成果。检测试剂盒保存:部分试剂保存于-20℃,部分试剂保存于2-8℃,详细以标签上的标明为准。固体试剂一般装在带胶木塞的广口瓶中,液体试剂则盛在细口瓶中。
检测试剂盒以免疫学反应为根底,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗刷除去剩余的游离反应物,从而确保试验结果的特异性与稳定性。运用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入,再与HRP符号的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,通过完全洗刷后加底物TMB显色。检测试剂盒TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线核算样品的浓度。检测试剂盒以免疫学反应为根底。明胶水溶液(1%)
科研实验中试剂取用应注意事项:视线与量筒内液体的凹液面的低处保持水平。MES buffer(0.05mol/L,pH4.0-9.0)
亚甲基蓝染色液(1%)使用说明 货号:G1303 规格:100ml 保存:室温,避光,12 个月。 产品说明: 亚甲基蓝(Methylene blue)又称美蓝、次甲基蓝、次甲蓝等,是一种芳香杂环化合物。含水 亚甲基蓝的分子式为 C16H24ClN3O3S,分子量为 373.9,CAS 号为 7220-79-3。亚甲基蓝染色 液常用于丝绸、纸张、细菌、细胞等染色。因其容易氧化,染色结果不宜长久保存。 操作说明:(光供参考) 1、 样品处理 (1) (2) (3) 对于石蜡切片:常规脱蜡复水。 对于冰冻切片:蒸馏水 2min。 对于培养细胞:先用 4%多聚甲醛固定,然后蒸馏水洗涤 2min,较后 换用新鲜的蒸馏水,再洗涤 2min。 2、 美蓝染色 (1) (2) 染色结果: Methylene blue Stain(1%)染色。 用蒸馏水或自来水充分洗涤,进行观察和拍照。 组织或细胞 蓝色 注意事项: 1、 开始次使用本试剂时建议先取 1~2 个样品做预实验。 2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。MES buffer(0.05mol/L,pH4.0-9.0)