从滴瓶中取用少量试剂。瓶上装有滴管的试剂瓶称作滴瓶。滴管上部装有橡皮头,下部为细长的管子。使用时,提起滴管,使管口离开液面,用手指紧捏滴管上部的橡皮头,以赶出滴管中的空气,然后把滴管,伸入试剂瓶中,放开手指,吸入试剂。再提起滴管将试剂滴入试管或烧杯中。将试剂滴入试管中时,可用无名指和中指夹住滴管,将它悬空地放在靠近试管口的上方,然后用大姆指和食指掐捏橡皮头,使试剂滴入试管中。禁止将滴管伸入试管中。否则,滴管的管端将很容易碰到试管壁上面沾附了其他溶液。以致使试剂被污染。固体试剂一般装在带胶木塞的广口瓶中,液体试剂则盛在细口瓶中。溴酚蓝水溶液(2%)
Laemmli 加样缓冲液(2×)是一种以溴酚蓝为染料的 2 倍浓缩的蛋白上样缓冲液,主要 由 2-ME、SDS、溴酚蓝、Laemmli 分层缓冲液等组成,可用于不连续蛋白电泳的上样。 组成: 编号 名称 PE0005 5ml Storage Laemmli 加样缓冲液(2×) 使用说明书 4℃ 1份 操作步骤(光供参考): 1、 取适量的蛋白样品和 Laemmli 加样缓冲液(2×)等量混合,充分混匀。 2、 直接上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内即可。 3、 通常电泳至蓝色染料到达 PAGE 胶的底部附近即可停止。 注意事项: 1、 Leagene Laemmli 加样缓冲液(2×)中含少量β-巯基乙醇,有轻微刺激性气味。 2、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期: 12 个月有效。亦可室温短期保存。绿藻保色液Ⅱ滴剂是指药物与适宜的溶剂或分散介质制成的滴至动物的头、背等部位局部给药的液体试剂。
校准液标示值往往是按其基质偏差修正的,所以标示值并非实际值。校准液、质控血清通常是经过处理的混合人或动物血清,这种制备物在特定分析系统中往往与人新鲜血清反应性不同而产生基质偏差。如总胆固醇测定基质效应研究指出:校准液酶法测定回收结果偏低可达5%~7%。甘油三酯测定,有人主张选用双试剂方法消除内源性甘油,这个方法是可行的,但忽视了一个化学平衡理论。因为所有的酯在水溶液中都不是简单地以酯的形式存在,而是以水解与酯化相平衡的形式存在。在一个平衡体系中,如果去除游离甘油,这个平衡就向生成甘油方向移动,甘油三酯就会重新水解,生成新的甘油,达到新的平衡,因此样品与R1试剂孵育时间越长,测得甘油三酯值就越低。甘油三酯测定,不只要去除游离甘油,而且还要克服样本含量真实性发生的变化,试剂中必须加入甘油激酶,并且延迟时间要标准化。所以,一些试验项目在消除内源性物质干扰的同时,会带来样品含量真实性的变化。
用液体试剂时要注意什么?在试管里进行某些实验时,取试剂不需要准确用量,只要学会估计取用液体的量即可。例如用滴管取用液体,lmL相当多少滴,5mL液体占一个试管容量的几分之几等。倒入试管里溶液的量,一般不超过其容积的1/3。定量取用液体时,用量筒或移液管。量筒用于量度一定体积的液体,可根据需要选用不同容量的量筒。量取液体后读数时,要使视线与量筒内液体的弯月面的低处保持水平,偏高或偏低都会读不准而造成较大的误差。室温条件,水平转子离心400g,离心30-40min,可见细胞分层。
两性霉素B溶液(10mg/ml):注意事项:两性霉素B作用原理在于其与菌类细胞膜上的Ergosterol结合导致细胞膜通透性发生变化,使菌类细胞内钾离子、氨基酸通透到到膜外,破坏菌类正常代谢,进而使菌类细胞死亡。储存条件:4℃,避光,12个月。两性霉素B又称庐山霉素,是从链霉菌(Streptomycesnodosus)的培养液中分离而得的一种多烯类克菌类,其抑菌机制是能与菌类细胞膜上的麦角甾醇结合,导致细胞膜受损,通透性提高,细胞内物质外漏,破坏正常代谢而起抑菌作用。细菌因其细胞膜上不含麦角甾醇成分,故无效。两性霉素B克菌类谱广,几乎对绝大部分菌类均有效,耐药菌株少见,高浓度时呈杀菌作用。两性霉素B溶液在室温不稳定,易被光、热和酸破坏,在pH6.0~7.5下克菌作用很好。当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用。PBS磷酸盐粉剂(0.01mol/L,pH7.2-7.4)
BCA蛋白检测试剂盒有许多优点:检测的灵敏度高。溴酚蓝水溶液(2%)
试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一。每种试剂都有一定的空白吸光度范围,试剂空白吸光度的改变往往提示该试剂的变质;如利用Trinder反应为原理的检测试剂会因含酚类物质被氧化为醌而变为红色。碱性磷酸酶、r一谷氨酰转肽酶、淀粉酶等检测试剂会因基质分解出硝基酚或酚基苯胺而变黄。有些试剂久置后变浑浊。这些情况均可使空白吸光度升高。丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶等负反应,在放置过程中其试剂空白吸光度会因NADH自行氧化为NAD+而下降。原则上,吸光度上升的反应,其试剂空白吸光度越低越好,不能超过一个高限;相反,吸光度下降的反应,其试剂空白吸光度不能低于一个低限。因此,试剂空白吸光度限值,常作为程序参数输入仪器,如经核查超限,仪器会自动报警,提示更换试剂。溴酚蓝水溶液(2%)