弱酸-弱碱型缓冲溶液(即共轭酸碱缓冲溶液)、酸式盐缓冲溶液、强酸或强碱溶液。在一些特殊情况下也使用混合体系的缓冲溶液(两种pKa相近的共轭酸碱缓冲溶液混合而成)。大家比较熟悉的是共轭酸碱缓冲溶液,例如,HAc-NaAc、HF-NH4F、NH3-NH4Cl。其实,酸式盐也可作为缓冲溶液,因为酸式盐的pH值大多是恒定的,随其浓度增减的变化不大,例如,NaHCO3溶液在1.0M至0.01M之间,其pH值几乎都在8左右(理论值为8.3),同样可以抵抗溶液中产生的少量强酸、强碱(或外加),保持溶液的pH值恒定或变化微小。强酸、强碱溶液也能缓冲滴定过程中产生的少量强酸或强碱,保持溶液的pH值变化很小,故强酸强碱也可作为广义的pH缓冲溶液(以前的分析化学教材就是这样分的),例如,EDTA络合滴定铋,需另外加入一定量的0.1mol/L硝酸溶液,就是为了增强溶液对滴定中产生的H+的缓冲作用。杀灭曲线的建立:按照每2天进行活细胞计数,来确定杀灭未转染细胞的恰当浓度。甘油溶液(100%,无菌)
液体培养基接种向肉膏蛋白胨液体培养基中接种少量菌体时,其操作步骤基本与斜面接种时相同,不同之处是挑取菌体的接种环放入液体培养基后,应在液体表面处的管内壁上轻轻磨擦,使菌体从环上脱落,混进液体培养基,塞好试管塞后,摇动液体,使菌体在液体中分布均匀,或用试管振荡器混匀。向液体培养基中接种量大或要求定量接种时,可将无菌水或液体培养基注入菌种试管,用接种环将菌苔刮下,再将菌种悬液以无菌吸管定量吸出加入,或直接倒入液体培养基。如果菌种为液体培养物,则可用无菌吸管定量吸出加入或直接倒入液体培养基。整个接种过程都要求无菌操作。MES buffer(0.1mol/L,pH6.5)固体试剂的取用:直接倾倒时瓶口必须紧挨试管口,试管45度,并且缓缓地倒。
缓冲溶液的缓冲能力:在缓冲溶液中加入少量强酸或强碱,其溶液pH值变化不大,但若加入酸,碱的量多时,缓冲溶液就失去了它的缓冲作用。这说明它的缓冲能力是有一定限度的。缓冲溶液的缓冲能力与组成缓冲溶液的组分浓度有关。0.1mol·L-1HAc和0.1mol· L-1NaAc组成的缓冲溶液,比0.01mol·L-1HAc和0.01mol·L-1NaAc的缓冲溶液缓冲能力大。关于这一点通过计算便可证实。但缓冲溶液组分的浓度不能太大,否则,不能忽视离子间的作用。组成缓冲溶液的两组分的比值不为1∶1时,缓冲作用减小,缓冲能力降低,当c(盐)/c(酸)为1∶1时△pH较小,缓冲能力大。不论对于酸或碱都有较大的缓冲作用。缓冲溶液的pH值可用下式计算:此时缓冲能力大。缓冲组分的比值离1∶1愈远,缓冲能力愈小,甚至不能起缓冲作用。对于任何缓冲体系,存在有效缓冲范围,这个范围大致在pKaφ(或pKbφ)两侧各一个pH单位之内。
检测试剂盒试验忌讳:浓洗刷液或许会有结晶析出,检测试剂盒稀释时可在水浴中加温助溶,洗刷时不影响成果。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔孔的OD值),请先将样本稀释必定倍数(n倍)后再测定,计算时请终乘以稀释倍数(×5×n)。各步加样均应运用加样器,并常常校正其正确性,以防止试验误差。一次加样时间好控制在5分钟内,如标本数目多,举荐运用排加样。封板膜只限一次性运用,以防止交叉污染。严格按照说明书的操作进行,检测试剂盒试验成果断定有必要以酶标仪读数为准。从冷躲环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可运用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装进密封袋中保存。见光易分解的试剂(如硝酸银)应装在棕色瓶中。
当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液(如HOAc与NaOAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H+离子基本上被A-离子消耗:所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。如需少量液体试剂则可用滴管取用,取用时应注意不要将滴管碰到或插入接收容器的壁上或里面。Tricine加样缓冲液(2×)
当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。甘油溶液(100%,无菌)
非变性PAGE蛋白上样缓冲液(2X) (Native Gel Sample Loading Buffer,2X),, 是一种以溴酚蓝为染料的2倍浓缩液的非变性PAGE蛋白上样缓冲液,试剂中不含有SDS,DTT。可用于非变性的蛋白样品上样及其它分析。使用说明:1)按照1份蛋白样品加入1份非变PAGE蛋白上样缓冲液(2X)即1:1的比例混合,即可上样,电泳。2)通常电泳到当溴酚蓝染料到达胶的底端处附近即可停止电泳。注意事项:1)SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(2X)中含少量DTT和巯基乙醇,有轻微刺激性气味。2)SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(2X)必须完全溶解后再使用。3)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。甘油溶液(100%,无菌)