使用方法：1， 固定细胞或组织样品，经过固定后，适当洗涤除去固定剂。如果需要进行免疫荧光染色，可先进行免疫荧光染色，染完毕后再进行染色。如果不需要进行其它染色，则直接进行染色。 2， 对于贴壁细胞或组织切片，加入少量染色液，覆盖住样品即可。对于悬浮细胞，至少加入待染色样品体积 3 倍的染色液，混匀。 3， 室温染色 5-10 分钟。 4， 吸除染色液，生理盐水洗涤 2-3 次，每次 3-5 分钟。 5， 置于荧光显微镜下观察，激发波长 360-400nm。 溶液注意事项： dapi 被普遍认为具有致性，操作时应戴手套，并避免交叉污染。 本产品需避光，并尽量避免反复冻融。荧光染料都存在淬灭问题，建议染色后尽量当天完成检测。 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光衰减封片剂。固体试剂的取用:直接倾倒时瓶口必须紧挨试管口，试管45度，并且缓缓地倒。人工唾液(Greenwood)
试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一，但不能反映试剂质量的全部。试剂成份、纯度、用量及稳定性，才是保证试剂质量的关键所在。目前市售的一些试剂具有抗干扰作用，主要是通过加入抗干扰物质或使用新的色素原以避免内源性物质的干扰。但值得注意的是：一些试验项目在消除内源性物质干扰的同时，会带来样品含量真实性的变化。 线性范围变窄 现象：高值测不高。原因：生产试剂时有效成分投料量不足;试剂成份稳定性较差。灵敏度变低现象：酶促反应速度曲线斜率下降，测定结果有严重系统误差。原因：试剂底物浓度不足。Earle's平衡盐溶液(10×EBSS,含钙镁糖酚红)氨苄青霉素溶液配置：0.22μm滤膜过滤除菌，小份分装（1ml/管）后，置于－20℃保存。
挑选检测试剂盒的方法：灵敏度。反应的是检测试剂盒检出被检物质的低量的才行，用户可根据自个样本中待检目标的量挑选合适的检测试剂盒，比如待检目标量很低，一般的检测试剂盒不能满足要求，可挑选高敏的检测试剂盒。重复性：科学试验考究重复性，通常检测试剂盒，其板内和板间变异系数应当控制在15%以内。特异性：检测试剂盒的特异性与检测试剂盒的关键组分，抗体对有关，若抗体对中为多抗，另一个有必要为单抗，推荐运用双单抗。简便性：在确保高质量数据的情况下，试验时间短，操作便捷，这也可以作为挑选检测试剂盒的一个判断。
具体的检测试剂盒规矩说明操作方法：要确保微量加样器的准确性，能够运用蒸馏水和电子天平进行确认(因为蒸馏水不含杂质，温度环境为20%左右时，lmL的水能够看作是lg、200L的水能够看作是0.2g)每一把微量加样器都应该将其高量程和低量程进行确认。在运用微量加样器时，汲取不同瓶子中液体后要更换头，即便汲取规范品溶液。汲取液体时速度不易太快，以免发生气泡，汲取的量不够准确。将液体加到酶标孔中时，避免头和孔内液体触摸，可使头上的液滴和孑L壁触摸，液滴会自然流下去。吸入液体时的的方法是吸两档打一档，避免因为头的毛细作用使得部分液体不能流出而形成的差错。挑选ELISA检测试剂盒的方法：灵敏度。反应的是检测试剂盒检出被检物质的低量的才行。
检测试剂盒检测成果分析办法:如果呈现规范曲线的线性欠好，或平行性欠好(双孔对照孔的OD值不同很大)，或呈现跳孔的现象，可能引起的原因有酶标板孔间彼此污染、洗板后未能尽快进行下一步操作、添加样品或其它试剂时操作的办法不对、孵育位置避光性不佳或盖板膜没有密封好使得水分蒸腾、酶标板孔问参加的试剂量不同，相对应的解决办法是加样时请当心勿将液体溅人另一孔中，人工洗板时也请当心，勿将洗涤液溅人另一微孔中、在洗板后及时进行下一步操作、添加试剂时请悬空滴入，牢记勿将头接触到板孔内，吸取不同试剂瓶中的液体时就要替换一次头、确认孵育环境不透光，盖板膜将酶标板密封好、运用已校正过的微量加样器，如将次参加液体时头上留有一滴的液体滴下，那么将今后头上留有的液体也滴下，以保证参加液体体积的一致性。液体试剂的取用方法试剂瓶取用试剂，用左手持量筒（或试管），并用大姆指指示所需体积刻度处。丙基红指示剂(4.6-6.6)
试剂的稳定性对准确度非常重要。人工唾液(Greenwood)
加药时间:由于基因转染到细胞内之后要一段时间才能表达出蛋白质。所以筛选不能太早；但是也不能太晚，因为转染了外源基因的细胞代谢负荷较大，增值较慢，时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没，终导致筛选不出阳性克隆，一般要在转染24小时之后才开始加G418筛选。随着细胞的代谢G418的浓度和活性都回下降，所以每3~5天都要更换一次含有G418的筛选液。这时药物浓度可以降至200ug/ml。培养液:加药筛选约6天左右，细胞会大量死亡，孔中只剩下的细胞。这时会出现两个问题：1.死亡的细胞会裂解释放出有害物质，导致那些有neo表达的阳性细胞死亡，即非选择性死亡。2.孔中细胞数目很少，细胞之间的信号会变得很弱，也会导致阳性细胞的状态不佳甚至死亡。这个时候需要一种特殊的培养液：假如你要转染3T3细胞，在3T3细胞汇合度达到80%的时候，换液，培养过夜之后收集培养液，通过滤器消毒，和新鲜的培养液按1：1混合备用。再转染后筛选过程中就可以应用这种培养基。人工唾液(Greenwood)
